Une étude prospective sur un incubateur de paillasse
Exploration de l'effet de rafraîchissement du milieu de culture en une seule étape sur le taux de ploïdie embryonnaire : une étude prospective sur un incubateur de paillasse
L'utilisation de la culture d'embryons étendue jusqu'au stade du blastocyste et des tests génétiques préimplantatoires pour l'aneuploïdie (PGT-A) a permis l'identification et la sélection des embryons avec le meilleur potentiel de développement et amélioré les résultats cliniques de la fécondation in vitro (FIV). Bien qu'il existe de nombreux types de milieux de culture d'embryons humains disponibles dans le commerce pour la culture jusqu'au stade de blastocyste, l'impact des conditions de culture sur le développement du blastocyste et la formation d'aneuploïdie n'est pas bien compris.
Les conditions de culture sont très importantes pour le succès du cycle de FIV, de nombreux facteurs impliqués dans le processus ont été largement étudiés, y compris l'utilisation d'un milieu de culture séquentiel par rapport à un milieu de culture en une seule étape, des incubateurs humidifiés par rapport à des incubateurs secs et le rafraîchissement du milieu le jour 3 vs culture ininterrompue jusqu'au jour 5. Cependant, aucune des études n'a étudié l'effet sur le taux d'euploïde dans une conception d'ovocytes frères et sœurs avec PGT-A, qui nécessite une culture jusqu'au jour 7.
Aperçu de l'étude
Statut
Les conditions
Description détaillée
Il est considéré comme une pratique courante de classer les embryons au jour 3 du développement, ce qui nécessitera de perturber les conditions de culture en annotant les embryons à l'aide de microscopes inversés. Une culture prolongée jusqu'au jour 7 est nécessaire pour effectuer la biopsie du trophectoderme requise pour le PGT-A. Plusieurs facteurs de culture peuvent affecter le développement de l'embryon, tels que le pH, qui est contrôlé par la concentration de CO2, ainsi que l'osmolalité, qui est la concentration de soluté par litre de solution. L'évaporation de la solution due à l'exposition à une température élevée (37°C) peut modifier les concentrations et donc compromettre le développement de l'embryon.
Pour réduire le taux d'évaporation, les gouttelettes de culture sont recouvertes d'une couche d'huile minérale. Les incubateurs humidifiés peuvent également réduire le taux d'évaporation. Cependant, dans le cas des incubateurs secs, tels que les incubateurs de paillasse, réapprovisionner le milieu de culture au moins une fois - en déplaçant les embryons dans une nouvelle boîte de culture - pendant ces 7 jours de culture pourrait être la solution.
Étant donné que le milieu en une seule étape est conçu pour soutenir le développement de l'embryon pendant 5 jours de culture continue, alors que certains laboratoires cultivent des embryons pendant 7 jours, le rafraîchissement du milieu de culture est inévitable au jour 3 ou au jour 5 du développement.
Il n'y a aucune preuve concrète sur laquelle de ces pratiques fournira un meilleur environnement pour le développement de l'embryon. De plus, aucune des études n'a étudié l'effet du changement de milieu de culture en une seule étape au jour 3 ou au jour 5, sur les erreurs chromosomiques (aneuploïdie/mosaïcisme). Les enquêteurs visent dans cette étude prospective sur les ovocytes frères et sœurs, d'explorer quel jour de rafraîchissement du milieu de culture (jour 3 ou jour 5) fournit un taux plus élevé de blastocystes euploïdes.
Type d'étude
Inscription (Anticipé)
Contacts et emplacements
Coordonnées de l'étude
- Nom: SHIERYL DIGMA, RN
- Numéro de téléphone: 1061 97126528000
- E-mail: shieryl.digma@artfertilityclinics.com
Lieux d'étude
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Abu Dhabi, Emirats Arabes Unis, 60202
- Recrutement
- ART Fertility Clinics LLC
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Contact:
- Barbara Lawrenz, PhD
- Numéro de téléphone: 1108 +97102 652 8000
- E-mail: shieryl.digma@artfertilityclinics.com
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Contact:
- Shieryl Digma, RN
- Numéro de téléphone: 1122 +97102 652 8000
- E-mail: shieryl.digma@artfertilityclinics.com
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Chercheur principal:
- Upma Pathak Shanker, Specialist
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Critères de participation
Critère d'éligibilité
Âges éligibles pour étudier
Accepte les volontaires sains
Sexes éligibles pour l'étude
Méthode d'échantillonnage
Population étudiée
La description
Critère d'intégration:
- Patientes avec un minimum de 8 à 10 follicules pendant la stimulation ovarienne
- Patientes avec un minimum de 8 ovocytes matures
- PGT-A
- ICSI
- IMC<35
- 18 à 40 ans
- Sperme éjaculé frais ou congelé > 10 000 spermatozoïdes mobiles
- Toute stimulation ovarienne
- Embryons cultivés dans un incubateur de paillasse
Critère d'exclusion:
- PGT-M ou PGT-SR
- Antécédents d'arrestation d'embryon
- Endométriose
- Antécédents de traitement pouvant impacter la réserve ovarienne (chirurgie annexielle, chimiothérapie, radiothérapie…)
Plan d'étude
Comment l'étude est-elle conçue ?
Détails de conception
Cohortes et interventions
Groupe / Cohorte |
Intervention / Traitement |
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rafraîchissement du jour 3
Tous les ovocytes MII seront inséminés par ICSI 39 à 41 heures après le déclenchement final de la maturation des ovocytes. Après ICSI, les ovocytes seront cultivés dans 2 à 4 boîtes de culture placées dans 2 chambres séparées. Rafraîchissement médiatique : Zygote marquant le jour 1 (18-20hpi). Le rafraîchissement du milieu de culture sera effectué 67 à 69 heures après l'insémination (jour 3). Le classement des embryons ne sera pas effectué du jour 2 au jour 5. Préparation et rafraîchissement des milieux de culture : 30 µL de milieu de culture (Global total LP est ajouté à chaque puits des 8 puits de LifeGlobal GPS Dish (EGPS-010) et 50 µL au centre 3 gouttes. Les plats seront équilibrés pendant la nuit dans un incubateur à CO2. Le classement des embryons doit être effectué avant le rafraîchissement des médias. Le temps passé hors de l'incubateur pendant le rafraîchissement des médias sera évalué les jours 3 et 5. Un opérateur doit effectuer l'ICSI. En cas d'opérateurs multiples, les ovocytes injectés de chaque opérateur seront répartis entre les 2 groupes. |
Tous les ovocytes MII seront inséminés par ICSI 39 à 41 heures après le déclenchement final de la maturation des ovocytes.
Zygote marquant le jour 1 (18-20hpi).
Le rafraîchissement du milieu de culture sera effectué 67 à 69 heures après l'insémination (jour 3).
30µL de milieu de culture (Global total LP est ajouté à chaque puits des 8 puits de LifeGlobal GPS Dish (EGPS-010) et 50µL au centre 3 gouttes. Les plats seront équilibrés pendant la nuit dans un incubateur à CO2.
Devrait être fait avant le rafraîchissement des médias.
Pour le groupe 2, le classement des embryons et le rafraîchissement des médias sont effectués avant la biopsie du blastocyste.
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rafraîchissement du jour 5
Tous les ovocytes MII seront inséminés par ICSI 39 à 41 heures après le déclenchement final de la maturation des ovocytes. Après ICSI, les ovocytes seront cultivés dans 2 à 4 boîtes de culture placées dans 2 chambres séparées. Calendrier de rafraîchissement des médias et de classement des embryons : notation des zygotes le jour 1 (18-20 hpi). Le classement des embryons et le rafraîchissement des milieux de culture seront effectués 114 à 118 heures après l'insémination (Jour 5). Préparation et rafraîchissement des milieux de culture : 30 µL de milieu de culture (Global total LP est ajouté à chaque puits des 8 puits de LifeGlobal GPS Dish (EGPS-010) et 50 µL au centre 3 gouttes. Les plats seront équilibrés pendant la nuit dans un incubateur à CO2. Le classement des embryons et le rafraîchissement des médias sont effectués avant la biopsie du blastocyste. Le temps passé hors de l'incubateur pendant le rafraîchissement des médias sera évalué les jours 3 et 5. Un opérateur doit effectuer l'ICSI. En cas d'opérateurs multiples, les ovocytes injectés de chaque opérateur seront répartis entre les 2 groupes. |
Tous les ovocytes MII seront inséminés par ICSI 39 à 41 heures après le déclenchement final de la maturation des ovocytes.
30µL de milieu de culture (Global total LP est ajouté à chaque puits des 8 puits de LifeGlobal GPS Dish (EGPS-010) et 50µL au centre 3 gouttes. Les plats seront équilibrés pendant la nuit dans un incubateur à CO2.
Devrait être fait avant le rafraîchissement des médias.
Pour le groupe 2, le classement des embryons et le rafraîchissement des médias sont effectués avant la biopsie du blastocyste.
Zygote marquant le jour 1 (18-20hpi).
Le rafraîchissement des milieux de culture sera effectué 114 à 118 heures après l'insémination (Jour 5).
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Que mesure l'étude ?
Principaux critères de jugement
Mesure des résultats |
Description de la mesure |
Délai |
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Ploïdie du blastocyste
Délai: 3 jours
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déterminé après biopsie de cellules de trophectoderme, prélevées sur le blastocyste au jour 5, 6 ou 7 du développement
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3 jours
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Mesures de résultats secondaires
Mesure des résultats |
Description de la mesure |
Délai |
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Taux de ploïdie du cycle
Délai: Un jour
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le nombre d'embryons euploïdes dans le groupe divisé par le nombre total de 2PN (les deux groupes)
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Un jour
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Fréquence du mosaïcisme
Délai: Un jour
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défini comme le taux d'erreurs de mosaïque chez les embryons aneuploïdes.
Cela inclut les embryons en mosaïque complète ou les embryons aneuploïdes avec 1 ou plusieurs aberrations chromosomiques en mosaïque
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Un jour
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Qualité du blastocyste au moment de la biopsie
Délai: Un jour
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Quatre scores de qualité embryonnaire (EQ1, 2, 3, 4) basés sur le stade d'expansion du blastocyste, le grade de la masse cellulaire interne et le grade du trophectoderme.
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Un jour
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Taux de blastulation
Délai: 5 jours
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capacité de l'embryon à former une cavité (= blastuler) 114-118 heures après l'ICSI.
Nombre de blastocystes divisé par le nombre de 2PN
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5 jours
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Collaborateurs et enquêteurs
Parrainer
Les enquêteurs
- Chercheur principal: IBRAHIM ELKHATIB, ART Fertility Clinics LLC
Publications et liens utiles
Publications générales
- Bavister BD, Poole KA. Duration and temperature of culture medium equilibration affect frequency of blastocyst development. Reprod Biomed Online. 2005 Jan;10(1):124-9. doi: 10.1016/s1472-6483(10)60813-9.
- Costa-Borges N, Belles M, Meseguer M, Galliano D, Ballesteros A, Calderon G. Blastocyst development in single medium with or without renewal on day 3: a prospective cohort study on sibling donor oocytes in a time-lapse incubator. Fertil Steril. 2016 Mar;105(3):707-713. doi: 10.1016/j.fertnstert.2015.11.038. Epub 2015 Dec 12.
- Krasnopolskaya KV, Beketova AN, Sesina NI, capital ES, Cyrillichinchenko NK, Badalyan GV, Sudarikova NM, Bocharova TV, Zakharchenko EO. The effect of short-term disturbance of day 3 embryo culture on the development and implantation. Gynecol Endocrinol. 2019;35(sup1):1-4. doi: 10.1080/09513590.2019.1632083.
- Pena F, Davalos R, Rechkemmer A, Ascenzo A, Gonzales M. Embryo development until blastocyst stage with and without renewal of single medium on day 3. JBRA Assist Reprod. 2018 Mar 1;22(1):49-51. doi: 10.5935/1518-0557.20180012.
Dates d'enregistrement des études
Dates principales de l'étude
Début de l'étude (Réel)
Achèvement primaire (Anticipé)
Achèvement de l'étude (Anticipé)
Dates d'inscription aux études
Première soumission
Première soumission répondant aux critères de contrôle qualité
Première publication (Réel)
Mises à jour des dossiers d'étude
Dernière mise à jour publiée (Réel)
Dernière mise à jour soumise répondant aux critères de contrôle qualité
Dernière vérification
Plus d'information
Termes liés à cette étude
Mots clés
Termes MeSH pertinents supplémentaires
Autres numéros d'identification d'étude
- 2105-ABU-008-IK
Informations sur les médicaments et les dispositifs, documents d'étude
Étudie un produit pharmaceutique réglementé par la FDA américaine
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