Эта страница была переведена автоматически, точность перевода не гарантируется. Пожалуйста, обратитесь к английской версии для исходного текста.

Проспективное исследование настольного инкубатора

23 марта 2023 г. обновлено: Ibrahim Elkhatib, ART Fertility Clinics LLC

Изучение влияния одноэтапного обновления культуральной среды на уровень плоидности эмбрионов: проспективное исследование в настольном инкубаторе

Использование расширенной культуры эмбрионов до стадии бластоцисты и преимплантационного генетического тестирования на анеуплоидию (PGT-A) позволило выявить и отобрать эмбрионы с наилучшим потенциалом развития и улучшить клинические результаты экстракорпорального оплодотворения (ЭКО). В то время как существует множество типов коммерчески доступных культуральных сред человеческого эмбриона для культивирования до стадии бластоцисты, влияние условий культивирования на развитие бластоцисты и формирование анеуплоидии изучено недостаточно.

Условия культивирования очень важны для успеха цикла ЭКО, многие факторы, участвующие в процессе, были тщательно изучены, в том числе использование последовательной питательной среды по сравнению с одностадийной питательной средой, увлажненных инкубаторов по сравнению с сухими инкубаторами и обновление среды в день. 3 по сравнению с непрерывным культивированием до 5-го дня. Тем не менее, ни в одном из исследований не изучалось влияние на уровень эуплоидов в дизайне родственных ооцитов с PGT-A, который требует культивирования до 7-го дня.

Обзор исследования

Статус

Рекрутинг

Условия

Вмешательство/лечение

Подробное описание

Считается обычной практикой оценивать эмбрионы на 3-й день развития, что потребует нарушения условий культивирования путем аннотирования эмбрионов с помощью инвертированных микроскопов. Для выполнения биопсии трофэктодермы, необходимой для PGT-A, требуется расширенная культура до 7-го дня. Существует несколько культуральных факторов, которые могут повлиять на развитие эмбриона, например, рН, который регулируется концентрацией СО2, а также осмоляльность, то есть концентрация растворенного вещества на литр раствора. Испарение раствора из-за воздействия высокой температуры (37°C) может изменить концентрацию и, следовательно, поставить под угрозу развитие эмбриона.

Для уменьшения скорости испарения капли культуры покрывают слоем минерального масла. Увлажненные инкубаторы также могут снизить скорость испарения. Однако в случае сухих инкубаторов, таких как настольные инкубаторы, решением проблемы может быть пополнение питательной среды хотя бы один раз — путем перемещения эмбрионов в новую чашку для культивирования — в течение этих 7 дней культивирования.

Поскольку одноступенчатая среда предназначена для поддержания развития эмбрионов в течение 5 дней непрерывного культивирования, в то время как некоторые лаборатории культивируют эмбрионы в течение 7 дней, обновление среды культивирования неизбежно либо на 3-й, либо на 5-й день развития.

Нет конкретных доказательств того, какая из этих практик обеспечит лучшую среду для развития эмбриона. Более того, ни в одном из исследований не изучалось влияние одноэтапной смены питательной среды на 3-й или 5-й день на хромосомные ошибки (анеуплоидия/мозаицизм). Исследователи стремятся в этом проспективном исследовании ооцитов братьев и сестер выяснить, какой день обновления питательной среды (день 3 или день 5) обеспечивает более высокую частоту эуплоидных бластоцист.

Тип исследования

Наблюдательный

Регистрация (Ожидаемый)

50

Контакты и местонахождение

В этом разделе приведены контактные данные лиц, проводящих исследование, и информация о том, где проводится это исследование.

Контакты исследования

Места учебы

Критерии участия

Исследователи ищут людей, которые соответствуют определенному описанию, называемому критериям приемлемости. Некоторыми примерами этих критериев являются общее состояние здоровья человека или предшествующее лечение.

Критерии приемлемости

Возраст, подходящий для обучения

От 18 лет до 40 лет (Взрослый)

Принимает здоровых добровольцев

Да

Полы, имеющие право на обучение

Женский

Метод выборки

Невероятностная выборка

Исследуемая популяция

В исследование могут быть включены все пациенты, отвечающие критериям включения, проходящие лечение бесплодия с анализом PGT-A на стадии бластоцисты.

Описание

Критерии включения:

  • Пациентки с минимум 8-10 фолликулами во время стимуляции яичников
  • Пациентки с минимум 8 зрелыми ооцитами
  • ПГТ-А
  • ИКСИ
  • ИМТ<35
  • Возраст 18-40 лет
  • Свежая или замороженная эякулированная сперма >10 000 подвижных сперматозоидов
  • Любая стимуляция яичников
  • Эмбрионы культивируются в настольном инкубаторе

Критерий исключения:

  • ПГТ-М или ПГТ-СР
  • Предыдущая история остановки эмбриона
  • Эндометриоз
  • История предыдущего лечения, которое может повлиять на овариальный резерв (хирургия придатков, химиотерапия, облучение…)

Учебный план

В этом разделе представлена ​​подробная информация о плане исследования, в том числе о том, как планируется исследование и что оно измеряет.

Как устроено исследование?

Детали дизайна

Когорты и вмешательства

Группа / когорта
Вмешательство/лечение
3 день освежение

Все ооциты MII будут осеменены с помощью ИКСИ через 39-41 час после окончательного триггера созревания ооцитов.

После ИКСИ ооциты будут культивироваться в 2-4 культуральных чашках, помещенных в 2 отдельные камеры.

Обновление СМИ: оценка Zygote в день 1 (18-20HPI). Обновление питательной среды проводят через 67-69 часов после осеменения (день 3). Оценка эмбрионов не будет проводиться на 2-5 день. Приготовление и освежение питательной среды: 30 мкл питательной среды (Global total LP) добавляют в каждую лунку из 8 лунок LifeGlobal GPS Dish (EGPS-010) и 50 мкл в центральные 3 капли.

Чашки будут уравновешены в течение ночи в инкубаторе CO2. Оценка эмбрионов должна проводиться до обновления среды. Время вне инкубатора во время обновления среды будет оцениваться на 3-й и 5-й день.

ИКСИ должен выполнять один оператор. В случае нескольких операторов, инъецированные ооциты каждого оператора будут разделены между 2 группами.
Другой: Осеменение и культура
Все ооциты MII будут осеменены с помощью ИКСИ через 39-41 час после окончательного триггера созревания ооцитов.
Другой: Освежение среды Группа 1
Оценка зиготы в день 1 (18-20HPI). Обновление питательной среды проводят через 67-69 часов после осеменения (день 3).
Другой: Подготовка и освежение питательных сред

30 мкл культуральной среды (Global total LP) добавляют в каждую из 8 лунок LifeGlobal GPS Dish (EGPS-010) и 50 мкл в центральные 3 капли.

Чашки будут уравновешены в течение ночи в инкубаторе CO2.

Другой: Оценка эмбрионов
Это должно быть сделано до обновления носителя. Для группы 2 перед биопсией бластоцисты проводится классификация эмбрионов и обновление среды.
5 день освежение

Все ооциты MII будут осеменены с помощью ИКСИ через 39-41 час после окончательного триггера созревания ооцитов.

После ИКСИ ооциты будут культивироваться в 2-4 культуральных чашках, помещенных в 2 отдельные камеры.

Сроки обновления среды и оценки эмбрионов: оценка зиготы на 1-й день (18-20 HPI). Оценку эмбрионов и обновление питательной среды проводят через 114–118 часов после осеменения (день 5).

Приготовление и освежение питательной среды: 30 мкл питательной среды (Global total LP) добавляют в каждую лунку из 8 лунок LifeGlobal GPS Dish (EGPS-010) и 50 мкл в центральные 3 капли. Чашки будут уравновешены в течение ночи в инкубаторе CO2.

Перед биопсией бластоцисты проводится оценка эмбрионов и освежение среды. Время вне инкубатора во время обновления среды будет оцениваться на 3-й и 5-й день.

ИКСИ должен выполнять один оператор. В случае нескольких операторов, инъецированные ооциты каждого оператора будут разделены между 2 группами.
Другой: Осеменение и культура
Все ооциты MII будут осеменены с помощью ИКСИ через 39-41 час после окончательного триггера созревания ооцитов.
Другой: Подготовка и освежение питательных сред

30 мкл культуральной среды (Global total LP) добавляют в каждую из 8 лунок LifeGlobal GPS Dish (EGPS-010) и 50 мкл в центральные 3 капли.

Чашки будут уравновешены в течение ночи в инкубаторе CO2.

Другой: Оценка эмбрионов
Это должно быть сделано до обновления носителя. Для группы 2 перед биопсией бластоцисты проводится классификация эмбрионов и обновление среды.
Другой: Освежение среды Группа 2
Оценка зиготы в день 1 (18-20HPI). Обновление питательных сред проводят через 114-118 часов после осеменения (день 5).

Что измеряет исследование?

Первичные показатели результатов

Мера результата
Мера Описание
Временное ограничение
Бластоциста плоидность
Временное ограничение: 3 дня
определяют после биопсии клеток трофэктодермы, взятых из бластоцисты на 5, 6 или 7 день от развития
3 дня

Вторичные показатели результатов

Мера результата
Мера Описание
Временное ограничение
Скорость цикла плоидности
Временное ограничение: 1 день
количество эуплоидных эмбрионов в группе, деленное на общее количество 2PN (обе группы)
1 день
Частота мозаики
Временное ограничение: 1 день
определяется как частота мозаичных ошибок у анеуплоидных эмбрионов. К ним относятся полностью мозаичные эмбрионы или анеуплоидные эмбрионы с 1 или более мозаичными хромосомными аберрациями.
1 день
Качество бластоцисты во время биопсии
Временное ограничение: 1 день
Четыре показателя качества эмбрионов (EQ1, 2, 3, 4), основанные на стадии расширения бластоцисты, степени внутренней клеточной массы и степени трофэктодермы.
1 день
Скорость бластуляции
Временное ограничение: 5 дней
способность эмбриона образовывать полость (= бластулировать) через 114-118 часов после ИКСИ. Количество бластоцист, деленное на количество 2PN
5 дней

Соавторы и исследователи

Здесь вы найдете людей и организации, участвующие в этом исследовании.

Спонсор

ART Fertility Clinics LLC

Следователи

  • Главный следователь: IBRAHIM ELKHATIB, ART Fertility Clinics LLC

Публикации и полезные ссылки

Лицо, ответственное за внесение сведений об исследовании, добровольно предоставляет эти публикации. Это может быть что угодно, связанное с исследованием.

Общие публикации

Полезные ссылки

Даты записи исследования

Эти даты отслеживают ход отправки отчетов об исследованиях и сводных результатов на сайт ClinicalTrials.gov. Записи исследований и сообщаемые результаты проверяются Национальной медицинской библиотекой (NLM), чтобы убедиться, что они соответствуют определенным стандартам контроля качества, прежде чем публиковать их на общедоступном веб-сайте.

Изучение основных дат

Начало исследования (Действительный)

15 июля 2021 г.

Первичное завершение (Ожидаемый)

30 июня 2023 г.

Завершение исследования (Ожидаемый)

31 декабря 2023 г.

Даты регистрации исследования

Первый отправленный

11 июля 2021 г.

Впервые представлено, что соответствует критериям контроля качества

11 июля 2021 г.

Первый опубликованный (Действительный)

20 июля 2021 г.

Обновления учебных записей

Последнее опубликованное обновление (Действительный)

24 марта 2023 г.

Последнее отправленное обновление, отвечающее критериям контроля качества

23 марта 2023 г.

Последняя проверка

1 марта 2023 г.

Дополнительная информация

Термины, связанные с этим исследованием

Ключевые слова

Дополнительные соответствующие термины MeSH

Другие идентификационные номера исследования

  • 2105-ABU-008-IK

Информация о лекарствах и устройствах, исследовательские документы

Изучает лекарственный продукт, регулируемый FDA США.

Нет

Изучает продукт устройства, регулируемый Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США.

Нет

Эта информация была получена непосредственно с веб-сайта clinicaltrials.gov без каких-либо изменений. Если у вас есть запросы на изменение, удаление или обновление сведений об исследовании, обращайтесь по адресу register@clinicaltrials.gov. Как только изменение будет реализовано на clinicaltrials.gov, оно будет автоматически обновлено и на нашем веб-сайте. .

Подписаться