En Benchtop Incubator Prospective Study
Utforsking av enkelttrinnskultur Medium forfriskningseffekt på embryoploiditet: en prospektiv studie i en inkubator
Bruken av utvidet embryokultur til blastocyststadiet og preimplantasjons genetisk testing for aneuploidi (PGT-A) har muliggjort identifikasjon og seleksjon av embryoer med det beste utviklingspotensialet og forbedret kliniske resultater in vitro fertilisering (IVF). Mens det eksisterer mange typer kommersielt tilgjengelige humane embryokulturmedier for kultur til blastocyststadiet, er ikke innvirkningen av kulturbetingelser på blastocystutvikling og aneuploididannelse godt forstått.
Kulturbetingelser er svært viktige for suksessen til IVF-syklusen, mange av faktorene som er involvert i prosessen har blitt grundig studert, inkludert bruk av sekvensielt dyrkningsmedium vs enkelttrinns kulturmedium, fuktede inkubatorer vs tørre inkubatorer og oppfriskning av mediet på dagen 3 vs uavbrutt kultur til dag 5. Imidlertid undersøkte ingen av studiene effekten på euploidhastighet i et søskenoocyttdesign med PGT-A, som krever dyrking til dag 7.
Studieoversikt
Status
Forhold
Detaljert beskrivelse
Det anses som en rutinemessig praksis å gradere embryoene på dag 3 av utviklingen, noe som vil kreve forstyrrelse av kulturforholdene ved å kommentere embryoene ved hjelp av inverterte mikroskoper. Forlenget kultur til dag 7 er nødvendig for å utføre trophectoderm biopsi som kreves for PGT-A. Det er flere kulturfaktorer som kan påvirke embryoutviklingen, som pH, som styres gjennom konsentrasjonen av CO2, og også osmolaliteten, som er konsentrasjonen av oppløst stoff per liter løsning. Fordampning av løsningen på grunn av eksponering for høy temperatur (37 °C) kan endre konsentrasjonene og dermed kompromittere embryoutviklingen.
For å redusere fordampningshastigheten dekkes kulturdråper med et lag mineralolje. Fuktede inkubatorer kan også redusere fordampningshastigheten. Men i tilfelle av tørre inkubatorer, for eksempel benchtop-inkubatorer, kan etterfylling av kulturmediet minst én gang - ved å flytte embryoene til en ny kulturskål - i løpet av disse 7 dagene med dyrking være løsningen.
Siden enkelt-trinns medium er designet for å opprettholde embryoutvikling i 5 sammenhengende dyrkningsdager, mens noen laboratorier dyrker embryoer i 7 dager, er oppfriskning av kulturmediet uunngåelig enten på dag 3 eller dag 5 av utviklingen.
Det er ingen konkrete bevis på hvilken av disse praksisene som vil gi et bedre miljø for embryoutvikling. Dessuten undersøkte ingen av studiene effekten av bytte av ett-trinns kulturmedium på dag 3 eller dag 5, på kromosomfeilene (aneuploidi/mosaikk). Etterforskerne tar sikte på i denne prospektive søskenoocyttstudien for å utforske hvilken dag med forfriskning av kulturmedium (dag 3 eller dag 5) som gir en høyere frekvens av euploide blastocyster.
Studietype
Registrering (Forventet)
Kontakter og plasseringer
Studiekontakt
- Navn: SHIERYL DIGMA, RN
- Telefonnummer: 1061 97126528000
- E-post: shieryl.digma@artfertilityclinics.com
Studiesteder
-
-
-
Abu Dhabi, De forente arabiske emirater, 60202
- Rekruttering
- ART Fertility Clinics LLC
-
Ta kontakt med:
- Barbara Lawrenz, PhD
- Telefonnummer: 1108 +97102 652 8000
- E-post: shieryl.digma@artfertilityclinics.com
-
Ta kontakt med:
- Shieryl Digma, RN
- Telefonnummer: 1122 +97102 652 8000
- E-post: shieryl.digma@artfertilityclinics.com
-
Hovedetterforsker:
- Upma Pathak Shanker, Specialist
-
-
Deltakelseskriterier
Kvalifikasjonskriterier
Alder som er kvalifisert for studier
Tar imot friske frivillige
Kjønn som er kvalifisert for studier
Prøvetakingsmetode
Studiepopulasjon
Beskrivelse
Inklusjonskriterier:
- Pasienter med minimum 8 - 10 follikler under eggstokkstimulering
- Pasienter med minimum 8 modne oocytter
- PGT-A
- ICSI
- BMI <35
- Alder 18-40
- Ferske eller frosne ejakulerte sædceller >10 000 bevegelige sædceller
- Eventuell eggstokkstimulering
- Embryoer dyrket i benktopp inkubator
Ekskluderingskriterier:
- PGT-M eller PGT-SR
- Tidligere historie med embryoarrest
- Endometriose
- Historie om tidligere behandling som kan påvirke eggstokkreserven (adnexal kirurgi, kjemoterapi, stråling ...)
Studieplan
Hvordan er studiet utformet?
Designdetaljer
Kohorter og intervensjoner
Gruppe / Kohort |
Intervensjon / Behandling |
|---|---|
|
dag 3 forfriskning
Alle MII oocytter vil bli inseminert av ICSI 39-41 timer etter den endelige utløseren for oocyttmodning. Etter ICSI vil oocytter dyrkes i 2-4 kulturskåler plassert i 2 separate kamre. Medieforfriskning: Zygote-scoring på dag 1 (18-20hpi). Kulturmedium forfriskning vil bli gjort 67-69 timer etter inseminering (dag 3). Embryogradering vil ikke bli gjort dag 2-5. Klargjøring og oppfriskning av kulturmedier: 30 µL kulturmedium (Global total LP tilsettes til hver brønn av de 8 brønnene i LifeGlobal GPS Dish (EGPS-010) og 50 µL til de midtre 3 dråpene. Rettene vil bli ekvilibrert over natten i en CO2-inkubator. Embryogradering bør gjøres før medieoppfriskning. Tidsavbrudd fra inkubatoren under medieforfriskning vil bli vurdert på dag 3 og dag 5. Én operatør bør utføre ICSI. Ved flere operatører vil hver operatørs injiserte oocytter deles mellom de 2 gruppene. |
Alle MII oocytter vil bli inseminert av ICSI 39-41 timer etter den endelige utløseren for oocyttmodning.
Zygote-scoring på dag 1 (18-20hpi).
Kulturmedium forfriskning vil bli gjort 67-69 timer etter inseminering (dag 3).
30 µL kulturmedium (Global total LP tilsettes til hver brønn av de 8 brønnene til LifeGlobal GPS Dish (EGPS-010) og 50 µL til de midtre 3 dråpene. Rettene vil bli ekvilibrert over natten i en CO2-inkubator.
Bør gjøres før medieoppfriskning.
For gruppe 2 gjøres embryogradering og medieoppfriskning før blastocystbiopsi.
|
|
dag 5 forfriskning
Alle MII oocytter vil bli inseminert av ICSI 39-41 timer etter den endelige utløseren for oocyttmodning. Etter ICSI vil oocytter dyrkes i 2-4 kulturskåler plassert i 2 separate kamre. Medieforfriskning og embryograderingstider: Zygote-scoring på dag 1 (18-20hpi). Embryogradering og oppfriskning av kulturmedier vil bli gjort 114-118 timer etter inseminering (dag 5). Klargjøring og oppfriskning av kulturmedier: 30 µL kulturmedium (Global total LP tilsettes til hver brønn av de 8 brønnene i LifeGlobal GPS Dish (EGPS-010) og 50 µL til de midtre 3 dråpene. Rettene vil bli ekvilibrert over natten i en CO2-inkubator. Embryogradering og medieoppfriskning gjøres før blastocystbiopsi. Tidsavbrudd fra inkubatoren under medieforfriskning vil bli vurdert på dag 3 og dag 5. Én operatør bør utføre ICSI. Ved flere operatører vil hver operatørs injiserte oocytter deles mellom de 2 gruppene. |
Alle MII oocytter vil bli inseminert av ICSI 39-41 timer etter den endelige utløseren for oocyttmodning.
30 µL kulturmedium (Global total LP tilsettes til hver brønn av de 8 brønnene til LifeGlobal GPS Dish (EGPS-010) og 50 µL til de midtre 3 dråpene. Rettene vil bli ekvilibrert over natten i en CO2-inkubator.
Bør gjøres før medieoppfriskning.
For gruppe 2 gjøres embryogradering og medieoppfriskning før blastocystbiopsi.
Zygote-scoring på dag 1 (18-20hpi).
Forfriskning av kulturmedier vil bli gjort 114-118 timer etter inseminering (dag 5).
|
Hva måler studien?
Primære resultatmål
Resultatmål |
Tiltaksbeskrivelse |
Tidsramme |
|---|---|---|
|
Blastocyst ploidi
Tidsramme: 3 dager
|
bestemt etter biopsi av trophectoderm-celler, tatt fra blastocysten på dag 5, 6 eller 7 fra utvikling
|
3 dager
|
Sekundære resultatmål
Resultatmål |
Tiltaksbeskrivelse |
Tidsramme |
|---|---|---|
|
Cycle ploidity rate
Tidsramme: 1 dag
|
antall euploide embryoer i gruppen delt på det totale antallet 2PN (begge grupper)
|
1 dag
|
|
Mosaikkfrekvens
Tidsramme: 1 dag
|
definert som frekvensen av mosaikkfeil i aneuploide embryoer.
Dette inkluderer hele mosaikk-embryoer eller aneuploide embryoer med 1 eller flere mosaikk-kromosomavvik
|
1 dag
|
|
Blastocystkvalitet på tidspunktet for biopsi
Tidsramme: 1 dag
|
Fire embryokvalitetspoeng (EQ1, 2, 3, 4) basert på ekspansjonsstadiet til blastocysten, graden av indre cellemasse og graden av trophectoderm.
|
1 dag
|
|
Blastasjonshastighet
Tidsramme: 5 dager
|
embryoets evne til å danne et hulrom (=å blastulere) 114-118 timer etter ICSI.
Antall blastocyster delt på antall 2PN
|
5 dager
|
Samarbeidspartnere og etterforskere
Sponsor
Etterforskere
- Hovedetterforsker: IBRAHIM ELKHATIB, ART Fertility Clinics LLC
Publikasjoner og nyttige lenker
Generelle publikasjoner
- Bavister BD, Poole KA. Duration and temperature of culture medium equilibration affect frequency of blastocyst development. Reprod Biomed Online. 2005 Jan;10(1):124-9. doi: 10.1016/s1472-6483(10)60813-9.
- Costa-Borges N, Belles M, Meseguer M, Galliano D, Ballesteros A, Calderon G. Blastocyst development in single medium with or without renewal on day 3: a prospective cohort study on sibling donor oocytes in a time-lapse incubator. Fertil Steril. 2016 Mar;105(3):707-713. doi: 10.1016/j.fertnstert.2015.11.038. Epub 2015 Dec 12.
- Krasnopolskaya KV, Beketova AN, Sesina NI, capital ES, Cyrillichinchenko NK, Badalyan GV, Sudarikova NM, Bocharova TV, Zakharchenko EO. The effect of short-term disturbance of day 3 embryo culture on the development and implantation. Gynecol Endocrinol. 2019;35(sup1):1-4. doi: 10.1080/09513590.2019.1632083.
- Pena F, Davalos R, Rechkemmer A, Ascenzo A, Gonzales M. Embryo development until blastocyst stage with and without renewal of single medium on day 3. JBRA Assist Reprod. 2018 Mar 1;22(1):49-51. doi: 10.5935/1518-0557.20180012.
Studierekorddatoer
Studer hoveddatoer
Studiestart (Faktiske)
Primær fullføring (Forventet)
Studiet fullført (Forventet)
Datoer for studieregistrering
Først innsendt
Først innsendt som oppfylte QC-kriteriene
Først lagt ut (Faktiske)
Oppdateringer av studieposter
Sist oppdatering lagt ut (Faktiske)
Siste oppdatering sendt inn som oppfylte QC-kriteriene
Sist bekreftet
Mer informasjon
Begreper knyttet til denne studien
Nøkkelord
Ytterligere relevante MeSH-vilkår
Andre studie-ID-numre
- 2105-ABU-008-IK
Legemiddel- og utstyrsinformasjon, studiedokumenter
Studerer et amerikansk FDA-regulert medikamentprodukt
Studerer et amerikansk FDA-regulert enhetsprodukt
Denne informasjonen ble hentet direkte fra nettstedet clinicaltrials.gov uten noen endringer. Hvis du har noen forespørsler om å endre, fjerne eller oppdatere studiedetaljene dine, vennligst kontakt register@clinicaltrials.gov. Så snart en endring er implementert på clinicaltrials.gov, vil denne også bli oppdatert automatisk på nettstedet vårt. .