Estudio prospectivo de una incubadora de sobremesa
Exploración del efecto de refresco del medio de cultivo de un solo paso en la tasa de ploidía embrionaria: un estudio prospectivo de incubadora de sobremesa
El uso del cultivo de embriones extendidos hasta la etapa de blastocisto y las pruebas genéticas preimplantacionales para aneuploidía (PGT-A) ha permitido la identificación y selección de embriones con el mejor potencial de desarrollo y mejores resultados clínicos de fertilización in vitro (FIV). Si bien existen numerosos tipos de medios de cultivo de embriones humanos disponibles comercialmente para el cultivo hasta la etapa de blastocisto, el impacto de las condiciones de cultivo en el desarrollo del blastocisto y la formación de aneuploidía no se comprende bien.
Las condiciones de cultivo son muy importantes para el éxito del ciclo de FIV, muchos de los factores que intervienen en el proceso se han estudiado exhaustivamente, incluido el uso de medios de cultivo secuenciales frente a medios de cultivo de un solo paso, incubadoras humidificadas frente a incubadoras secas y refrescar el medio el día. 3 vs cultivo ininterrumpido hasta el día 5. Sin embargo, ninguno de los estudios investigó el efecto sobre la tasa de euploidía en un diseño de ovocitos hermanos con PGT-A, que requiere cultivo hasta el día 7.
Descripción general del estudio
Estado
Condiciones
Descripción detallada
Se considera una práctica rutinaria clasificar los embriones en el día 3 de desarrollo, lo que requerirá perturbar las condiciones de cultivo anotando los embriones con microscopios invertidos. Se requiere cultivo extendido hasta el día 7 para realizar la biopsia de trofoectodermo requerida para PGT-A. Existen varios factores de cultivo que pueden afectar el desarrollo embrionario, como el pH, que se controla a través de la concentración de CO2, y también la osmolalidad, que es la concentración de soluto por litro de solución. La evaporación de la solución debido a la exposición a altas temperaturas (37 °C) puede cambiar las concentraciones y, por lo tanto, comprometer el desarrollo del embrión.
Para reducir la tasa de evaporación, las gotas de cultivo se cubren con una capa de aceite mineral. Las incubadoras humidificadas también pueden reducir la tasa de evaporación. Sin embargo, en el caso de incubadores secos, como los de sobremesa, reponer el medio de cultivo al menos una vez -trasladando los embriones a una nueva placa de cultivo- durante estos 7 días de cultivo puede ser la solución.
Dado que el medio de un solo paso está diseñado para mantener el desarrollo embrionario durante 5 días de cultivo continuos, mientras que algunos laboratorios cultivan embriones durante 7 días, es inevitable renovar el medio de cultivo el día 3 o el día 5 de desarrollo.
No hay evidencia concreta sobre cuál de estas prácticas proporcionará un mejor ambiente para el desarrollo embrionario. Además, ninguno de los estudios investigó el efecto del cambio de medio de cultivo de un solo paso el día 3 o el día 5 sobre los errores cromosómicos (aneuploidía/mosaicismo). En este estudio prospectivo de ovocitos hermanos, los investigadores tienen como objetivo explorar qué día de renovación del medio de cultivo (día 3 o día 5) proporciona una tasa más alta de blastocistos euploides.
Tipo de estudio
Inscripción (Anticipado)
Contactos y Ubicaciones
Estudio Contacto
- Nombre: SHIERYL DIGMA, RN
- Número de teléfono: 1061 97126528000
- Correo electrónico: shieryl.digma@artfertilityclinics.com
Ubicaciones de estudio
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Abu Dhabi, Emiratos Árabes Unidos, 60202
- Reclutamiento
- ART Fertility Clinics LLC
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Contacto:
- Barbara Lawrenz, PhD
- Número de teléfono: 1108 +97102 652 8000
- Correo electrónico: shieryl.digma@artfertilityclinics.com
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Contacto:
- Shieryl Digma, RN
- Número de teléfono: 1122 +97102 652 8000
- Correo electrónico: shieryl.digma@artfertilityclinics.com
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Investigador principal:
- Upma Pathak Shanker, Specialist
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Criterios de participación
Criterio de elegibilidad
Edades elegibles para estudiar
Acepta Voluntarios Saludables
Géneros elegibles para el estudio
Método de muestreo
Población de estudio
Descripción
Criterios de inclusión:
- Pacientes con un mínimo de 8 - 10 folículos durante la estimulación ovárica
- Pacientes con un mínimo de 8 ovocitos maduros
- PGT-A
- ICSI
- IMC<35
- Edad 18- 40
- Semen eyaculado fresco o congelado >10.000 espermatozoides móviles
- Cualquier estimulación ovárica
- Embriones cultivados en incubadora de sobremesa
Criterio de exclusión:
- PGT-M o PGT-SR
- Historia previa de arresto embrionario
- endometriosis
- Historia de tratamientos previos que puedan impactar en la reserva ovárica (cirugía anexial, quimioterapia, radiación…)
Plan de estudios
¿Cómo está diseñado el estudio?
Detalles de diseño
Cohortes e Intervenciones
Grupo / Cohorte |
Intervención / Tratamiento |
|---|---|
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refrigerio día 3
Todos los ovocitos MII serán inseminados por ICSI 39-41 horas después de la activación de la maduración final de los ovocitos. Después de la ICSI, los ovocitos se cultivarán en 2 a 4 placas de cultivo colocadas en 2 cámaras separadas. Refresco de medios: puntuación de Zygote en el día 1 (18-20hpi). La renovación del medio de cultivo se realizará 67-69 horas después de la inseminación (Día 3). La clasificación de embriones no se realizará los días 2-5. Preparación y renovación de medios de cultivo: se agregan 30 µL de medio de cultivo (LP total global a cada pocillo de los 8 pocillos de LifeGlobal GPS Dish (EGPS-010) y 50 µL al centro 3 gotas. Los platos se equilibrarán durante la noche en una incubadora de CO2. La clasificación de los embriones debe realizarse antes de la actualización de los medios. El tiempo fuera de la incubadora durante la renovación de los medios se evaluará el día 3 y el día 5. Un operador debe realizar el ICSI. En caso de múltiples operadores, los ovocitos inyectados de cada operador se dividirán entre los 2 grupos. |
Todos los ovocitos MII serán inseminados por ICSI 39-41 horas después de la activación de la maduración final de los ovocitos.
Puntuación de cigoto en el día 1 (18-20hpi).
La renovación del medio de cultivo se realizará 67-69 horas después de la inseminación (Día 3).
Se agregan 30 µL de medio de cultivo (LP total global) a cada pocillo de los 8 pocillos de LifeGlobal GPS Dish (EGPS-010) y 50 µL al centro 3 gotas. Los platos se equilibrarán durante la noche en una incubadora de CO2.
Debe hacerse antes de la actualización de los medios.
Para el grupo 2, la clasificación de embriones y la renovación de medios se realizan antes de la biopsia de blastocisto.
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refrigerio día 5
Todos los ovocitos MII serán inseminados por ICSI 39-41 horas después de la activación de la maduración final de los ovocitos. Después de la ICSI, los ovocitos se cultivarán en 2 a 4 placas de cultivo colocadas en 2 cámaras separadas. Tiempos de actualización de medios y clasificación de embriones: puntuación de cigoto en el día 1 (18-20 hpi). La clasificación de los embriones y la renovación de los medios de cultivo se realizarán entre 114 y 118 horas después de la inseminación (Día 5). Preparación y renovación de medios de cultivo: se agregan 30 µL de medio de cultivo (LP total global a cada pocillo de los 8 pocillos de LifeGlobal GPS Dish (EGPS-010) y 50 µL al centro 3 gotas. Los platos se equilibrarán durante la noche en una incubadora de CO2. La clasificación de embriones y la renovación de medios se realizan antes de la biopsia de blastocisto. El tiempo fuera de la incubadora durante la renovación de los medios se evaluará el día 3 y el día 5. Un operador debe realizar el ICSI. En caso de múltiples operadores, los ovocitos inyectados de cada operador se dividirán entre los 2 grupos. |
Todos los ovocitos MII serán inseminados por ICSI 39-41 horas después de la activación de la maduración final de los ovocitos.
Se agregan 30 µL de medio de cultivo (LP total global) a cada pocillo de los 8 pocillos de LifeGlobal GPS Dish (EGPS-010) y 50 µL al centro 3 gotas. Los platos se equilibrarán durante la noche en una incubadora de CO2.
Debe hacerse antes de la actualización de los medios.
Para el grupo 2, la clasificación de embriones y la renovación de medios se realizan antes de la biopsia de blastocisto.
Puntuación de cigoto en el día 1 (18-20hpi).
El refresco de los medios de cultivo se realizará entre 114 y 118 horas después de la inseminación (Día 5).
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¿Qué mide el estudio?
Medidas de resultado primarias
Medida de resultado |
Medida Descripción |
Periodo de tiempo |
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Ploidía de blastocisto
Periodo de tiempo: 3 días
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determinado después de la biopsia de células trofoectodérmicas, tomadas del blastocisto el día 5, 6 o 7 desde el desarrollo
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3 días
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Medidas de resultado secundarias
Medida de resultado |
Medida Descripción |
Periodo de tiempo |
|---|---|---|
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Tasa de ploidía del ciclo
Periodo de tiempo: 1 día
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el número de embriones euploides en el grupo dividido por el número total de 2PN (ambos grupos)
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1 día
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Frecuencia de Mosaicismo
Periodo de tiempo: 1 día
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definida como la tasa de errores de mosaico en embriones aneuploides.
Esto incluye embriones en mosaico completo o embriones aneuploides con 1 o más aberraciones cromosómicas en mosaico.
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1 día
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Calidad del blastocisto en el momento de la biopsia
Periodo de tiempo: 1 día
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Cuatro puntajes de calidad embrionaria (EQ1, 2, 3, 4) basados en la etapa de expansión del blastocisto, el grado de la masa celular interna y el grado del trofectodermo.
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1 día
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Tasa de blastulación
Periodo de tiempo: 5 dias
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capacidad del embrión para formar una cavidad (=para blastular) 114-118 horas después de la ICSI.
Número de blastocistos dividido por el número de 2PN
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5 dias
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Colaboradores e Investigadores
Patrocinador
Investigadores
- Investigador principal: IBRAHIM ELKHATIB, ART Fertility Clinics LLC
Publicaciones y enlaces útiles
Publicaciones Generales
- Bavister BD, Poole KA. Duration and temperature of culture medium equilibration affect frequency of blastocyst development. Reprod Biomed Online. 2005 Jan;10(1):124-9. doi: 10.1016/s1472-6483(10)60813-9.
- Costa-Borges N, Belles M, Meseguer M, Galliano D, Ballesteros A, Calderon G. Blastocyst development in single medium with or without renewal on day 3: a prospective cohort study on sibling donor oocytes in a time-lapse incubator. Fertil Steril. 2016 Mar;105(3):707-713. doi: 10.1016/j.fertnstert.2015.11.038. Epub 2015 Dec 12.
- Krasnopolskaya KV, Beketova AN, Sesina NI, capital ES, Cyrillichinchenko NK, Badalyan GV, Sudarikova NM, Bocharova TV, Zakharchenko EO. The effect of short-term disturbance of day 3 embryo culture on the development and implantation. Gynecol Endocrinol. 2019;35(sup1):1-4. doi: 10.1080/09513590.2019.1632083.
- Pena F, Davalos R, Rechkemmer A, Ascenzo A, Gonzales M. Embryo development until blastocyst stage with and without renewal of single medium on day 3. JBRA Assist Reprod. 2018 Mar 1;22(1):49-51. doi: 10.5935/1518-0557.20180012.
Fechas de registro del estudio
Fechas importantes del estudio
Inicio del estudio (Actual)
Finalización primaria (Anticipado)
Finalización del estudio (Anticipado)
Fechas de registro del estudio
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Publicado por primera vez (Actual)
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Última actualización publicada (Actual)
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Términos relacionados con este estudio
Palabras clave
Términos MeSH relevantes adicionales
Otros números de identificación del estudio
- 2105-ABU-008-IK
Información sobre medicamentos y dispositivos, documentos del estudio
Estudia un producto farmacéutico regulado por la FDA de EE. UU.
Estudia un producto de dispositivo regulado por la FDA de EE. UU.
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