Um estudo prospectivo de incubadora de bancada
Explorando o efeito do refresco do meio de cultura de etapa única na taxa de ploidia do embrião: um estudo prospectivo de incubadora de bancada
O uso de cultura estendida de embriões até o estágio de blastocisto e teste genético pré-implantação para aneuploidia (PGT-A) permitiu a identificação e seleção de embriões com o melhor potencial de desenvolvimento e melhores resultados clínicos de fertilização in vitro (FIV). Embora existam vários tipos de meios de cultura de embriões humanos comercialmente disponíveis para cultura até o estágio de blastocisto, o impacto das condições de cultura no desenvolvimento do blastocisto e na formação de aneuploidia não é bem compreendido.
As condições de cultura são muito importantes para o sucesso do ciclo de fertilização in vitro, muitos dos fatores envolvidos no processo foram extensivamente estudados, incluindo o uso de meio de cultura sequencial vs meio de cultura de etapa única, incubadoras umidificadas vs incubadoras secas e atualização do meio no dia 3 vs cultura ininterrupta até o dia 5. No entanto, nenhum dos estudos investigou o efeito na taxa de euplóide em um desenho de oócito irmão com PGT-A, que requer cultura até o dia 7.
Visão geral do estudo
Status
Condições
Descrição detalhada
É considerada uma prática de rotina classificar os embriões no dia 3 do desenvolvimento, o que exigirá perturbar as condições de cultura anotando os embriões usando microscópios invertidos. A cultura estendida até o dia 7 é necessária para realizar a biópsia do trofectoderma necessária para PGT-A. Existem vários fatores da cultura que podem afetar o desenvolvimento do embrião, como o pH, que é controlado pela concentração de CO2, e também a osmolalidade, que é a concentração de soluto por litro de solução. A evaporação da solução devido à exposição à alta temperatura (37°C) pode alterar as concentrações e, consequentemente, comprometer o desenvolvimento do embrião.
Para reduzir a taxa de evaporação, as gotas de cultura são cobertas com uma camada de óleo mineral. Incubadoras umidificadas também podem reduzir a taxa de evaporação. No entanto, no caso de incubadoras secas, como incubadoras de bancada, reabastecer o meio de cultura pelo menos uma vez - movendo os embriões para uma nova placa de cultura - durante esses 7 dias de cultura pode ser a solução.
Como o meio de etapa única é projetado para sustentar o desenvolvimento do embrião por 5 dias de cultura contínua, enquanto alguns laboratórios cultivam embriões por 7 dias, a atualização do meio de cultura é inevitável no dia 3 ou no dia 5 de desenvolvimento.
Não há evidências concretas sobre qual dessas práticas proporcionará um ambiente melhor para o desenvolvimento do embrião. Além disso, nenhum dos estudos investigou o efeito da troca de meio de cultura de etapa única no dia 3 ou no dia 5, nos erros cromossômicos (aneuploidia/mosaicismo). Os investigadores pretendem neste estudo prospectivo de oócitos irmãos, explorar qual dia de atualização do meio de cultura (dia 3 ou dia 5) fornece uma taxa mais alta de blastocistos euploides.
Tipo de estudo
Inscrição (Antecipado)
Contactos e Locais
Contato de estudo
- Nome: SHIERYL DIGMA, RN
- Número de telefone: 1061 97126528000
- E-mail: shieryl.digma@artfertilityclinics.com
Locais de estudo
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Abu Dhabi, Emirados Árabes Unidos, 60202
- Recrutamento
- ART Fertility Clinics LLC
-
Contato:
- Barbara Lawrenz, PhD
- Número de telefone: 1108 +97102 652 8000
- E-mail: shieryl.digma@artfertilityclinics.com
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Contato:
- Shieryl Digma, RN
- Número de telefone: 1122 +97102 652 8000
- E-mail: shieryl.digma@artfertilityclinics.com
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Investigador principal:
- Upma Pathak Shanker, Specialist
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Critérios de participação
Critérios de elegibilidade
Idades elegíveis para estudo
Aceita Voluntários Saudáveis
Gêneros Elegíveis para o Estudo
Método de amostragem
População do estudo
Descrição
Critério de inclusão:
- Pacientes com um mínimo de 8 a 10 folículos durante a estimulação ovariana
- Pacientes com no mínimo 8 ovócitos maduros
- PGT-A
- ICSI
- IMC <35
- Idade 18- 40
- Esperma ejaculado fresco ou congelado > 10.000 espermatozóides móveis
- Qualquer estimulação ovariana
- Embriões cultivados em incubadora de bancada
Critério de exclusão:
- PGT-M ou PGT-SR
- História prévia de parada de embriões
- Endometriose
- História de tratamento anterior que pode afetar a reserva ovariana (cirurgia anexial, quimioterapia, radioterapia…)
Plano de estudo
Como o estudo é projetado?
Detalhes do projeto
Coortes e Intervenções
Grupo / Coorte |
Intervenção / Tratamento |
|---|---|
|
dia 3 refresco
Todos os oócitos MII serão inseminados por ICSI 39-41 horas após o início final da maturação oocitária. Após a ICSI, os oócitos serão cultivados em 2-4 placas de cultura colocadas em 2 câmaras separadas. Atualização da mídia: pontuação do zigoto no dia 1 (18-20hpi). A atualização do meio de cultura será feita 67-69 horas após a inseminação (Dia 3). A classificação do embrião não será feita no dia 2-5. Preparação e atualização do meio de cultura: 30 µL de meio de cultura (LP total global é adicionado a cada poço dos 8 poços do LifeGlobal GPS Dish (EGPS-010) e 50 µL às 3 gotas centrais. Os pratos serão equilibrados durante a noite em uma incubadora de CO2. A classificação do embrião deve ser feita antes da atualização da mídia. O tempo fora da incubadora durante a atualização da mídia será avaliado no dia 3 e no dia 5. Um operador deve realizar o ICSI. No caso de múltiplas operadoras, os oócitos injetados de cada operadora serão divididos entre os 2 grupos. |
Todos os oócitos MII serão inseminados por ICSI 39-41 horas após o início final da maturação oocitária.
Pontuação do zigoto no dia 1 (18-20hpi).
A atualização do meio de cultura será feita 67-69 horas após a inseminação (Dia 3).
30 µL de meio de cultura (LP total global é adicionado a cada poço dos 8 poços do LifeGlobal GPS Dish (EGPS-010) e 50 µL às 3 gotas centrais. Os pratos serão equilibrados durante a noite em uma incubadora de CO2.
Deve ser feito antes da atualização da mídia.
Para o grupo 2, a classificação do embrião e a atualização da mídia são feitas antes da biópsia do blastocisto.
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dia 5 refresco
Todos os oócitos MII serão inseminados por ICSI 39-41 horas após o início final da maturação oocitária. Após a ICSI, os oócitos serão cultivados em 2-4 placas de cultura colocadas em 2 câmaras separadas. Tempos de atualização de mídia e classificação de embriões: pontuação do zigoto no dia 1 (18-20hpi). A classificação do embrião e a atualização do meio de cultura serão feitas 114-118 horas após a inseminação (Dia 5). Preparação e atualização do meio de cultura: 30 µL de meio de cultura (LP total global é adicionado a cada poço dos 8 poços do LifeGlobal GPS Dish (EGPS-010) e 50 µL às 3 gotas centrais. Os pratos serão equilibrados durante a noite em uma incubadora de CO2. A classificação do embrião e a atualização do meio são feitas antes da biópsia do blastocisto. O tempo fora da incubadora durante a atualização da mídia será avaliado no dia 3 e no dia 5. Um operador deve realizar o ICSI. No caso de múltiplas operadoras, os oócitos injetados de cada operadora serão divididos entre os 2 grupos. |
Todos os oócitos MII serão inseminados por ICSI 39-41 horas após o início final da maturação oocitária.
30 µL de meio de cultura (LP total global é adicionado a cada poço dos 8 poços do LifeGlobal GPS Dish (EGPS-010) e 50 µL às 3 gotas centrais. Os pratos serão equilibrados durante a noite em uma incubadora de CO2.
Deve ser feito antes da atualização da mídia.
Para o grupo 2, a classificação do embrião e a atualização da mídia são feitas antes da biópsia do blastocisto.
Pontuação do zigoto no dia 1 (18-20hpi).
A atualização do meio de cultura será feita 114-118 horas após a inseminação (Dia 5).
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O que o estudo está medindo?
Medidas de resultados primários
Medida de resultado |
Descrição da medida |
Prazo |
|---|---|---|
|
Ploidia do blastocisto
Prazo: 3 dias
|
determinado após biópsia de células do trofectoderma, retiradas do blastocisto no dia 5, 6 ou 7 do desenvolvimento
|
3 dias
|
Medidas de resultados secundários
Medida de resultado |
Descrição da medida |
Prazo |
|---|---|---|
|
Taxa de ploidia do ciclo
Prazo: 1 dia
|
o número de embriões euplóides no grupo dividido pelo número total de 2PN (ambos os grupos)
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1 dia
|
|
Frequência do Mosaicismo
Prazo: 1 dia
|
definido como a taxa de erros de mosaico em embriões aneuplóides.
Isso inclui embriões em mosaico completos ou embriões aneuplóides com 1 ou mais aberrações cromossômicas em mosaico
|
1 dia
|
|
Qualidade do blastocisto no momento da biópsia
Prazo: 1 dia
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Quatro pontuações de qualidade do embrião (EQ1, 2, 3, 4) com base no estágio de expansão do blastocisto, no grau da massa celular interna e no grau do trofectoderma.
|
1 dia
|
|
Taxa de explosão
Prazo: 5 dias
|
capacidade do embrião de formar uma cavidade (= para blastular) 114-118 horas após a ICSI.
Número de blastocistos dividido pelo número de 2PN
|
5 dias
|
Colaboradores e Investigadores
Patrocinador
Investigadores
- Investigador principal: IBRAHIM ELKHATIB, ART Fertility Clinics LLC
Publicações e links úteis
Publicações Gerais
- Bavister BD, Poole KA. Duration and temperature of culture medium equilibration affect frequency of blastocyst development. Reprod Biomed Online. 2005 Jan;10(1):124-9. doi: 10.1016/s1472-6483(10)60813-9.
- Costa-Borges N, Belles M, Meseguer M, Galliano D, Ballesteros A, Calderon G. Blastocyst development in single medium with or without renewal on day 3: a prospective cohort study on sibling donor oocytes in a time-lapse incubator. Fertil Steril. 2016 Mar;105(3):707-713. doi: 10.1016/j.fertnstert.2015.11.038. Epub 2015 Dec 12.
- Krasnopolskaya KV, Beketova AN, Sesina NI, capital ES, Cyrillichinchenko NK, Badalyan GV, Sudarikova NM, Bocharova TV, Zakharchenko EO. The effect of short-term disturbance of day 3 embryo culture on the development and implantation. Gynecol Endocrinol. 2019;35(sup1):1-4. doi: 10.1080/09513590.2019.1632083.
- Pena F, Davalos R, Rechkemmer A, Ascenzo A, Gonzales M. Embryo development until blastocyst stage with and without renewal of single medium on day 3. JBRA Assist Reprod. 2018 Mar 1;22(1):49-51. doi: 10.5935/1518-0557.20180012.
Datas de registro do estudo
Datas Principais do Estudo
Início do estudo (Real)
Conclusão Primária (Antecipado)
Conclusão do estudo (Antecipado)
Datas de inscrição no estudo
Enviado pela primeira vez
Enviado pela primeira vez que atendeu aos critérios de CQ
Primeira postagem (Real)
Atualizações de registro de estudo
Última Atualização Postada (Real)
Última atualização enviada que atendeu aos critérios de controle de qualidade
Última verificação
Mais Informações
Termos relacionados a este estudo
Palavras-chave
Termos MeSH relevantes adicionais
Outros números de identificação do estudo
- 2105-ABU-008-IK
Informações sobre medicamentos e dispositivos, documentos de estudo
Estuda um medicamento regulamentado pela FDA dos EUA
Estuda um produto de dispositivo regulamentado pela FDA dos EUA
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Ensaios clínicos em Inseminação e cultura
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University of South CarolinaAtivo, não recrutandoCompulsão Alimentar | Imagem corporal | Comportamento Alimentar | Nutrição, Saudável | Comer TranstornadoEstados Unidos
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Eunice Kennedy Shriver National Institute of Child...Desconhecido
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