Benchtop-hautomotutkimus
Yksivaiheisen viljelyalustan virkistysvaikutuksen tutkiminen alkion ploidiasteessa: pöytähautomon tulevaisuudentutkimus
Laajennetun alkioviljelmän käyttö blastokystavaiheeseen asti ja preimplantaatiogeeninen aneuploidian (PGT-A) testaus on mahdollistanut parhaan kehityspotentiaalin omaavien alkioiden tunnistamisen ja valinnan sekä parantuneet koeputkihedelmöityksen (IVF) kliiniset tulokset. Vaikka on olemassa lukuisia kaupallisesti saatavilla olevia ihmisalkioiden viljelyalustoja blastokystivaiheeseen asti, viljelyolosuhteiden vaikutusta blastokystan kehitykseen ja aneuploidian muodostumiseen ei ymmärretä hyvin.
Viljelyolosuhteet ovat erittäin tärkeitä IVF-syklin onnistumiselle, monia prosessiin osallistuvia tekijöitä on tutkittu laajasti, mukaan lukien peräkkäisen elatusaineen käyttö vs. yksivaiheisen viljelyalustan käyttö, kostutetut inkubaattorit vs. kuiva-inkubaattorit ja alustan virkistäminen päivällä. 3 vs keskeytymätön viljely päivään 5 asti. Mikään tutkimuksista ei kuitenkaan tutkinut vaikutusta euploidiseen nopeuteen sisarusoosyyttimallissa PGT-A:lla, joka vaatii viljelyä päivään 7 asti.
Tutkimuksen yleiskatsaus
Tila
Ehdot
Yksityiskohtainen kuvaus
Rutiininomaisena käytäntönä pidetään alkioiden luokittelua kehityspäivänä 3, mikä edellyttää viljelyolosuhteiden häiritsemistä merkitsemällä alkiot käänteismikroskoopeilla. Pidennetty viljely päivään 7 vaaditaan PGT-A:lle vaaditun trofektodermibiopsian suorittamiseksi. On olemassa useita viljelytekijöitä, jotka voivat vaikuttaa alkion kehitykseen, kuten pH, jota ohjataan CO2-pitoisuuden avulla, ja myös osmolaliteetti, joka on liuenneen aineen pitoisuus litrassa liuosta. Liuoksen haihtuminen altistumisesta korkealle lämpötilalle (37 °C) voi muuttaa pitoisuuksia ja siten vaarantaa alkion kehittymisen.
Haihtumisnopeuden vähentämiseksi viljelypisarat peitetään mineraaliöljykerroksella. Kostutetut inkubaattorit voivat myös vähentää haihtumisnopeutta. Kuivissa inkubaattoreissa, kuten pöytähautomoissa, viljelyalustan täydentäminen ainakin kerran - siirtämällä alkiot uuteen viljelymaljaan - näiden 7 viljelypäivän aikana saattaa kuitenkin olla ratkaisu.
Koska yksivaiheinen elatusaine on suunniteltu ylläpitämään alkion kehitystä 5 jatkuvaa viljelypäivää, kun taas jotkut laboratoriot viljelevät alkioita 7 päivää, viljelyalustan virkistäminen on väistämätöntä joko 3. tai 5. kehityspäivänä.
Ei ole konkreettista näyttöä siitä, mikä näistä käytännöistä tarjoaa paremman ympäristön alkioiden kehitykselle. Lisäksi mikään tutkimuksista ei tutkinut yksivaiheisen viljelyalustan vaihdon vaikutusta päivänä 3 tai 5 kromosomivirheisiin (aneuploidia/mosaiikki). Tutkijat pyrkivät tässä tulevassa sisarusoosyyttitutkimuksessa selvittämään, mikä viljelyalustan virkistyspäivä (päivä 3 vai päivä 5) tarjoaa suuremman euploidisten blastokystien määrän.
Opintotyyppi
Ilmoittautuminen (Odotettu)
Yhteystiedot ja paikat
Opiskeluyhteys
- Nimi: SHIERYL DIGMA, RN
- Puhelinnumero: 1061 97126528000
- Sähköposti: shieryl.digma@artfertilityclinics.com
Opiskelupaikat
-
-
-
Abu Dhabi, Yhdistyneet Arabiemiirikunnat, 60202
- Rekrytointi
- ART Fertility Clinics LLC
-
Ottaa yhteyttä:
- Barbara Lawrenz, PhD
- Puhelinnumero: 1108 +97102 652 8000
- Sähköposti: shieryl.digma@artfertilityclinics.com
-
Ottaa yhteyttä:
- Shieryl Digma, RN
- Puhelinnumero: 1122 +97102 652 8000
- Sähköposti: shieryl.digma@artfertilityclinics.com
-
Päätutkija:
- Upma Pathak Shanker, Specialist
-
-
Osallistumiskriteerit
Kelpoisuusvaatimukset
Opintokelpoiset iät
Hyväksyy terveitä vapaaehtoisia
Sukupuolet, jotka voivat opiskella
Näytteenottomenetelmä
Tutkimusväestö
Kuvaus
Sisällyttämiskriteerit:
- Potilaat, joilla munasarjojen stimulaation aikana on vähintään 8–10 follikkelia
- Potilaat, joilla on vähintään 8 kypsää munasolua
- PGT-A
- ICSI
- BMI <35
- Ikä 18-40
- Tuore tai jäädytetty siemensyöksy > 10 000 liikkuvaa siittiötä
- Mikä tahansa munasarjojen stimulaatio
- Alkiot viljellään pöytähautomossa
Poissulkemiskriteerit:
- PGT-M tai PGT-SR
- Aiempi alkionpysäytyshistoria
- Endometrioosi
- Aikaisempi hoito, joka saattaa vaikuttaa munasarjareserviin (adnexal-leikkaus, kemoterapia, sädehoito…)
Opintosuunnitelma
Miten tutkimus on suunniteltu?
Suunnittelun yksityiskohdat
Kohortit ja interventiot
Ryhmä/Kohortti |
Interventio / Hoito |
|---|---|
|
päivä 3 virvokkeita
Kaikki MII-oosyytit siemennetään ICSI:llä 39-41 tuntia viimeisen munasolun kypsymislaukaisimen jälkeen. ICSI:n jälkeen munasoluja viljellään 2-4 viljelymaljassa, jotka on sijoitettu 2 erilliseen kammioon. Mediapäivitys: Zygote-pisteytys päivänä 1 (18-20hpi). Viljelyalustan virkistys tehdään 67-69 tuntia inseminoinnin jälkeen (päivä 3). Alkioiden luokittelua ei tehdä päivänä 2-5. Viljelyalustan valmistus ja virkistys: 30 µl elatusainetta (Global total LP lisätään LifeGlobal GPS Dish (EGPS-010) 8 kuoppaan jokaiseen kuoppaan ja 50 µl keskelle 3 tippaa. Astiat tasapainotetaan yön yli CO2-inkubaattorissa. Alkioiden luokittelu tulisi tehdä ennen median päivittämistä. Hautomon poissaoloaika median virkistyksen aikana arvioidaan päivänä 3 ja päivänä 5. Yhden operaattorin tulee suorittaa ICSI. Jos käyttäjiä on useita, kunkin käyttäjän injektoidut munasolut jaetaan kahteen ryhmään. |
Kaikki MII-oosyytit siemennetään ICSI:llä 39-41 tuntia viimeisen munasolun kypsymislaukaisimen jälkeen.
Tsygootin pisteytys päivänä 1 (18-20hpi).
Viljelyalustan virkistys tehdään 67-69 tuntia inseminoinnin jälkeen (päivä 3).
30 µl elatusainetta (Global total LP lisätään LifeGlobal GPS Dish (EGPS-010) 8 kuoppaan jokaiseen kuoppaan ja 50 µl keskelle 3 tippaa. Astiat tasapainotetaan yön yli CO2-inkubaattorissa.
Se tulee tehdä ennen median päivittämistä.
Ryhmälle 2 alkion luokittelu ja elatusaineen virkistys tehdään ennen blastokystabiopsiaa.
|
|
päivä 5 virvokkeita
Kaikki MII-oosyytit siemennetään ICSI:llä 39-41 tuntia viimeisen munasolun kypsymislaukaisimen jälkeen. ICSI:n jälkeen munasoluja viljellään 2-4 viljelymaljassa, jotka on sijoitettu 2 erilliseen kammioon. Median virkistys ja alkioiden arvioinnin ajoitukset: Zygote-pisteytys päivänä 1 (18-20hpi). Alkioiden luokittelu ja viljelyalustan virkistys tehdään 114-118 tuntia inseminoinnin jälkeen (päivä 5). Viljelyalustan valmistus ja virkistys: 30 µl elatusainetta (Global total LP lisätään LifeGlobal GPS Dish (EGPS-010) 8 kuoppaan jokaiseen kuoppaan ja 50 µl keskelle 3 tippaa. Astiat tasapainotetaan yön yli CO2-inkubaattorissa. Alkioiden luokittelu ja elatusaine päivitetään ennen blastokystabiopsiaa. Hautomon poissaoloaika median virkistyksen aikana arvioidaan päivänä 3 ja päivänä 5. Yhden operaattorin tulee suorittaa ICSI. Jos käyttäjiä on useita, kunkin käyttäjän injektoidut munasolut jaetaan kahteen ryhmään. |
Kaikki MII-oosyytit siemennetään ICSI:llä 39-41 tuntia viimeisen munasolun kypsymislaukaisimen jälkeen.
30 µl elatusainetta (Global total LP lisätään LifeGlobal GPS Dish (EGPS-010) 8 kuoppaan jokaiseen kuoppaan ja 50 µl keskelle 3 tippaa. Astiat tasapainotetaan yön yli CO2-inkubaattorissa.
Se tulee tehdä ennen median päivittämistä.
Ryhmälle 2 alkion luokittelu ja elatusaineen virkistys tehdään ennen blastokystabiopsiaa.
Tsygootin pisteytys päivänä 1 (18-20hpi).
Viljelyalustan virkistys tehdään 114-118 tuntia inseminoinnin jälkeen (päivä 5).
|
Mitä tutkimuksessa mitataan?
Ensisijaiset tulostoimenpiteet
Tulosmittaus |
Toimenpiteen kuvaus |
Aikaikkuna |
|---|---|---|
|
Blastokystiploidia
Aikaikkuna: 3 päivää
|
määritetty trofektodermisolujen biopsian jälkeen, otettu blastokysta päivänä 5, 6 tai 7 kehityksestä
|
3 päivää
|
Toissijaiset tulostoimenpiteet
Tulosmittaus |
Toimenpiteen kuvaus |
Aikaikkuna |
|---|---|---|
|
Pyöritä ploidia
Aikaikkuna: 1 päivä
|
euploidisten alkioiden lukumäärä ryhmässä jaettuna 2PN:n kokonaismäärällä (molemmat ryhmät)
|
1 päivä
|
|
Mosaiikkitaajuus
Aikaikkuna: 1 päivä
|
määritelty mosaiikkivirheiden määränä aneuploidisissa alkioissa.
Tämä sisältää täydelliset mosaiikkialkiot tai aneuploidiset alkiot, joissa on yksi tai useampi mosaiikkikromosomipoikkeama
|
1 päivä
|
|
Blastokystin laatu biopsian aikana
Aikaikkuna: 1 päivä
|
Neljä alkion laatupistettä (EQ1, 2, 3, 4), jotka perustuvat blastokystan laajenemisvaiheeseen, sisäisen solumassan ja trofektodermin luokkaan.
|
1 päivä
|
|
Räjähdysnopeus
Aikaikkuna: 5 päivää
|
alkion kyky muodostaa ontelo (= räjähtää) 114-118 tuntia ICSI:n jälkeen.
Blastokystien määrä jaettuna 2PN:n määrällä
|
5 päivää
|
Yhteistyökumppanit ja tutkijat
Sponsori
Tutkijat
- Päätutkija: IBRAHIM ELKHATIB, ART Fertility Clinics LLC
Julkaisuja ja hyödyllisiä linkkejä
Yleiset julkaisut
- Bavister BD, Poole KA. Duration and temperature of culture medium equilibration affect frequency of blastocyst development. Reprod Biomed Online. 2005 Jan;10(1):124-9. doi: 10.1016/s1472-6483(10)60813-9.
- Costa-Borges N, Belles M, Meseguer M, Galliano D, Ballesteros A, Calderon G. Blastocyst development in single medium with or without renewal on day 3: a prospective cohort study on sibling donor oocytes in a time-lapse incubator. Fertil Steril. 2016 Mar;105(3):707-713. doi: 10.1016/j.fertnstert.2015.11.038. Epub 2015 Dec 12.
- Krasnopolskaya KV, Beketova AN, Sesina NI, capital ES, Cyrillichinchenko NK, Badalyan GV, Sudarikova NM, Bocharova TV, Zakharchenko EO. The effect of short-term disturbance of day 3 embryo culture on the development and implantation. Gynecol Endocrinol. 2019;35(sup1):1-4. doi: 10.1080/09513590.2019.1632083.
- Pena F, Davalos R, Rechkemmer A, Ascenzo A, Gonzales M. Embryo development until blastocyst stage with and without renewal of single medium on day 3. JBRA Assist Reprod. 2018 Mar 1;22(1):49-51. doi: 10.5935/1518-0557.20180012.
Opintojen ennätyspäivät
Opi tärkeimmät päivämäärät
Opiskelun aloitus (Todellinen)
Ensisijainen valmistuminen (Odotettu)
Opintojen valmistuminen (Odotettu)
Opintoihin ilmoittautumispäivät
Ensimmäinen lähetetty
Ensimmäinen toimitettu, joka täytti QC-kriteerit
Ensimmäinen Lähetetty (Todellinen)
Tutkimustietojen päivitykset
Viimeisin päivitys julkaistu (Todellinen)
Viimeisin lähetetty päivitys, joka täytti QC-kriteerit
Viimeksi vahvistettu
Lisää tietoa
Tähän tutkimukseen liittyvät termit
Avainsanat
Muita asiaankuuluvia MeSH-ehtoja
Muut tutkimustunnusnumerot
- 2105-ABU-008-IK
Lääke- ja laitetiedot, tutkimusasiakirjat
Tutkii yhdysvaltalaista FDA sääntelemää lääkevalmistetta
Tutkii yhdysvaltalaista FDA sääntelemää laitetuotetta
Nämä tiedot haettiin suoraan verkkosivustolta clinicaltrials.gov ilman muutoksia. Jos sinulla on pyyntöjä muuttaa, poistaa tai päivittää tutkimustietojasi, ota yhteyttä register@clinicaltrials.gov. Heti kun muutos on otettu käyttöön osoitteessa clinicaltrials.gov, se päivitetään automaattisesti myös verkkosivustollemme .