En prospektiv studie för en inkubator för bänkskivor
Utforska enstegskultur Medium förfriskningseffekt på embryoploiditet: en prospektiv studie i en inkubator på bänken
Användningen av utökad embryokultur till blastocyststadiet och preimplantationsgenetisk testning för aneuploidi (PGT-A) har möjliggjort identifiering och urval av embryon med den bästa utvecklingspotentialen och förbättrade kliniska resultat av in vitro fertilisering (IVF). Även om det finns många typer av kommersiellt tillgängliga humana embryoodlingsmedier för odling till blastocyststadiet, är effekten av odlingsförhållanden på blastocystutveckling och aneuploidibildning inte väl förstått.
Odlingsförhållanden är mycket viktiga för framgången för IVF-cykeln, många av faktorerna som är involverade i processen har studerats omfattande, inklusive användningen av sekventiellt odlingsmedium kontra enstegsodlingsmedium, fuktade inkubatorer kontra torra inkubatorer och uppfriskande av mediet på dagen 3 vs oavbruten kultur till dag 5. Ingen av studierna undersökte dock effekten på euploidhastighet i en syskonoocytdesign med PGT-A, som kräver odling till dag 7.
Studieöversikt
Status
Betingelser
Detaljerad beskrivning
Det anses vara en rutinmässig praxis att gradera embryona på dag 3 av utvecklingen, vilket kommer att kräva att odlingsförhållandena störs genom att annotera embryona med inverterade mikroskop. Förlängd odling till dag 7 krävs för att utföra trophectoderm biopsi som krävs för PGT-A. Det finns flera odlingsfaktorer som kan påverka embryonutvecklingen, såsom pH, som styrs genom koncentrationen av CO2, och även osmolaliteten, som är koncentrationen av löst ämne per liter lösning. Avdunstning av lösningen på grund av exponering för hög temperatur (37°C) kan ändra koncentrationerna och därmed äventyra embryonutvecklingen.
För att minska avdunstningshastigheten täcks kulturdroppar med ett lager mineralolja. Fuktade inkubatorer kan också minska avdunstningshastigheten. Men i fallet med torra inkubatorer, såsom bänkinkubatorer, kan påfyllning av odlingsmediet minst en gång - genom att flytta embryona till en ny odlingsskål - under dessa 7 dagars odling vara lösningen.
Eftersom enstegsmedium är utformat för att upprätthålla embryonutveckling under 5 kontinuerliga odlingsdagar, medan vissa laboratorier odlar embryon i 7 dagar, är det oundvikligt att uppdatera odlingsmediet antingen på dag 3 eller dag 5 av utvecklingen.
Det finns inga konkreta bevis på vilken av dessa metoder som kommer att ge en bättre miljö för embryonutveckling. Dessutom undersökte ingen av studierna effekten av byte av odlingsmedium i ett steg på dag 3 eller dag 5 på kromosomfelen (aneuploidi/mosaicism). Utredarna syftar i denna prospektiva syskonoocytstudie för att undersöka vilken dag av uppfriskning av odlingsmedium (dag 3 eller dag 5) som ger en högre andel euploida blastocyster.
Studietyp
Inskrivning (Förväntat)
Kontakter och platser
Studiekontakt
- Namn: SHIERYL DIGMA, RN
- Telefonnummer: 1061 97126528000
- E-post: shieryl.digma@artfertilityclinics.com
Studieorter
-
-
-
Abu Dhabi, Förenade arabemiraten, 60202
- Rekrytering
- ART Fertility Clinics LLC
-
Kontakt:
- Barbara Lawrenz, PhD
- Telefonnummer: 1108 +97102 652 8000
- E-post: shieryl.digma@artfertilityclinics.com
-
Kontakt:
- Shieryl Digma, RN
- Telefonnummer: 1122 +97102 652 8000
- E-post: shieryl.digma@artfertilityclinics.com
-
Huvudutredare:
- Upma Pathak Shanker, Specialist
-
-
Deltagandekriterier
Urvalskriterier
Åldrar som är berättigade till studier
Tar emot friska volontärer
Kön som är behöriga för studier
Testmetod
Studera befolkning
Beskrivning
Inklusionskriterier:
- Patienter med minst 8 - 10 folliklar under äggstocksstimulering
- Patienter med minst 8 mogna oocyter
- PGT-A
- ICSI
- BMI <35
- Ålder 18-40
- Färska eller frysta ejakulerade spermier >10 000 rörliga spermier
- Eventuell stimulering av äggstockarna
- Embryon odlade i bänkinkubator
Exklusions kriterier:
- PGT-M eller PGT-SR
- Tidigare historia av embryostopp
- Endometrios
- Historik om tidigare behandling som kan påverka äggstocksreserven (adnexal kirurgi, kemoterapi, strålning...)
Studieplan
Hur är studien utformad?
Designdetaljer
Kohorter och interventioner
Grupp / Kohort |
Intervention / Behandling |
|---|---|
|
dag 3 förfriskning
Alla MII-oocyter kommer att insemineras av ICSI 39-41 timmar efter slutlig oocytmognad. Efter ICSI kommer oocyterna att odlas i 2-4 odlingsskålar placerade i 2 separata kammare. Mediaförfriskning: Zygote-poäng på dag 1 (18-20hpi). Uppfriskning av kulturmedium kommer att göras 67-69 timmar efter insemination (dag 3). Embryogradering kommer inte att göras dag 2-5. Förberedelse och förfriskning av odlingsmedier: 30 µL odlingsmedium (Global total LP läggs till varje brunn av de 8 brunnarna i LifeGlobal GPS Dish (EGPS-010) och 50 µL till de 3 mittersta dropparna. Rätter kommer att jämviktas över natten i en CO2-inkubator. Embryogradering bör göras före mediauppfriskning. Time out från inkubatorn under mediauppfriskning kommer att bedömas dag 3 och dag 5. En operatör bör utföra ICSI. Vid flera operatörer kommer varje operatörs injicerade oocyter att delas mellan de 2 grupperna. |
Alla MII-oocyter kommer att insemineras av ICSI 39-41 timmar efter slutlig oocytmognad.
Zygote-poäng på dag 1 (18-20hpi).
Uppfriskning av kulturmedium kommer att göras 67-69 timmar efter insemination (dag 3).
30 µL odlingsmedium (Global total LP tillsätts till varje brunn av de 8 brunnarna i LifeGlobal GPS Dish (EGPS-010) och 50 µL till de 3 mittersta dropparna. Rätter kommer att jämviktas över natten i en CO2-inkubator.
Bör göras före mediauppfriskning.
För grupp 2 görs embryogradering och mediauppfräschning före blastocystbiopsi.
|
|
dag 5 förfriskning
Alla MII-oocyter kommer att insemineras av ICSI 39-41 timmar efter slutlig oocytmognad. Efter ICSI kommer oocyterna att odlas i 2-4 odlingsskålar placerade i 2 separata kammare. Medieuppfriskning och embryoklassificeringstid: Zygote-poäng på dag 1 (18-20hpi). Embryogradering och uppfräschning av kulturmedier kommer att göras 114-118 timmar efter insemination (dag 5). Förberedelse och förfriskning av odlingsmedier: 30 µL odlingsmedium (Global total LP läggs till varje brunn av de 8 brunnarna i LifeGlobal GPS Dish (EGPS-010) och 50 µL till de 3 mittersta dropparna. Rätter kommer att jämviktas över natten i en CO2-inkubator. Embryogradering och mediauppfräschning görs före blastocystbiopsi. Time out från inkubatorn under mediauppfriskning kommer att bedömas dag 3 och dag 5. En operatör bör utföra ICSI. Vid flera operatörer kommer varje operatörs injicerade oocyter att delas mellan de 2 grupperna. |
Alla MII-oocyter kommer att insemineras av ICSI 39-41 timmar efter slutlig oocytmognad.
30 µL odlingsmedium (Global total LP tillsätts till varje brunn av de 8 brunnarna i LifeGlobal GPS Dish (EGPS-010) och 50 µL till de 3 mittersta dropparna. Rätter kommer att jämviktas över natten i en CO2-inkubator.
Bör göras före mediauppfriskning.
För grupp 2 görs embryogradering och mediauppfräschning före blastocystbiopsi.
Zygote-poäng på dag 1 (18-20hpi).
Uppfräschning av kulturmedier kommer att göras 114-118 timmar efter insemination (dag 5).
|
Vad mäter studien?
Primära resultatmått
Resultatmått |
Åtgärdsbeskrivning |
Tidsram |
|---|---|---|
|
Blastocystploidi
Tidsram: 3 dagar
|
bestäms efter biopsi av trophectoderm-celler, tagna från blastocysten dag 5, 6 eller 7 från utvecklingen
|
3 dagar
|
Sekundära resultatmått
Resultatmått |
Åtgärdsbeskrivning |
Tidsram |
|---|---|---|
|
Cykelploidihastighet
Tidsram: 1 dag
|
antalet euploida embryon i gruppen dividerat med det totala antalet 2PN (båda grupperna)
|
1 dag
|
|
Mosaicism Frequency
Tidsram: 1 dag
|
definieras som frekvensen av mosaikfel i aneuploida embryon.
Detta inkluderar fullständiga mosaikambryon eller aneuploida embryon med 1 eller fler mosaikkromosomavvikelser
|
1 dag
|
|
Blastocystkvalitet vid tidpunkten för biopsi
Tidsram: 1 dag
|
Fyra embryokvalitetspoäng (EQ1, 2, 3, 4) baserade på blastocystens expansionsstadium, graden av den inre cellmassan och graden av trophectoderm.
|
1 dag
|
|
Blastulationshastighet
Tidsram: 5 dagar
|
embryots förmåga att bilda en hålighet (= att spränga) 114-118 timmar efter ICSI.
Antal blastocyster dividerat med antalet 2PN
|
5 dagar
|
Samarbetspartners och utredare
Sponsor
Utredare
- Huvudutredare: IBRAHIM ELKHATIB, ART Fertility Clinics LLC
Publikationer och användbara länkar
Allmänna publikationer
- Bavister BD, Poole KA. Duration and temperature of culture medium equilibration affect frequency of blastocyst development. Reprod Biomed Online. 2005 Jan;10(1):124-9. doi: 10.1016/s1472-6483(10)60813-9.
- Costa-Borges N, Belles M, Meseguer M, Galliano D, Ballesteros A, Calderon G. Blastocyst development in single medium with or without renewal on day 3: a prospective cohort study on sibling donor oocytes in a time-lapse incubator. Fertil Steril. 2016 Mar;105(3):707-713. doi: 10.1016/j.fertnstert.2015.11.038. Epub 2015 Dec 12.
- Krasnopolskaya KV, Beketova AN, Sesina NI, capital ES, Cyrillichinchenko NK, Badalyan GV, Sudarikova NM, Bocharova TV, Zakharchenko EO. The effect of short-term disturbance of day 3 embryo culture on the development and implantation. Gynecol Endocrinol. 2019;35(sup1):1-4. doi: 10.1080/09513590.2019.1632083.
- Pena F, Davalos R, Rechkemmer A, Ascenzo A, Gonzales M. Embryo development until blastocyst stage with and without renewal of single medium on day 3. JBRA Assist Reprod. 2018 Mar 1;22(1):49-51. doi: 10.5935/1518-0557.20180012.
Studieavstämningsdatum
Studera stora datum
Studiestart (Faktisk)
Primärt slutförande (Förväntat)
Avslutad studie (Förväntat)
Studieregistreringsdatum
Först inskickad
Först inskickad som uppfyllde QC-kriterierna
Första postat (Faktisk)
Uppdateringar av studier
Senaste uppdatering publicerad (Faktisk)
Senaste inskickade uppdateringen som uppfyllde QC-kriterierna
Senast verifierad
Mer information
Termer relaterade till denna studie
Nyckelord
Ytterligare relevanta MeSH-villkor
Andra studie-ID-nummer
- 2105-ABU-008-IK
Läkemedels- och apparatinformation, studiedokument
Studerar en amerikansk FDA-reglerad läkemedelsprodukt
Studerar en amerikansk FDA-reglerad produktprodukt
Denna information hämtades direkt från webbplatsen clinicaltrials.gov utan några ändringar. Om du har några önskemål om att ändra, ta bort eller uppdatera dina studieuppgifter, vänligen kontakta register@clinicaltrials.gov. Så snart en ändring har implementerats på clinicaltrials.gov, kommer denna att uppdateras automatiskt även på vår webbplats .