Een prospectief onderzoek naar een benchtop incubator
Verkenning van het verversingseffect van kweekmedium in één stap op de ploïdiesnelheid van embryo's: een prospectieve studie in een benchtop incubator
Het gebruik van uitgebreide embryocultuur tot het blastocyststadium en pre-implantatie genetische tests voor aneuploïdie (PGT-A) hebben de identificatie en selectie van embryo's met het beste ontwikkelingspotentieel en verbeterde klinische resultaten van in-vitrofertilisatie (IVF) mogelijk gemaakt. Hoewel er talloze soorten in de handel verkrijgbare kweekmedia voor menselijke embryo's bestaan voor kweek tot het blastocyststadium, wordt de impact van kweekomstandigheden op de ontwikkeling van blastocysten en de vorming van aneuploïdie niet goed begrepen.
Cultuuromstandigheden zijn erg belangrijk voor het succes van de IVF-cyclus, veel van de factoren die bij het proces betrokken zijn, zijn uitgebreid bestudeerd, waaronder het gebruik van sequentieel kweekmedium versus eenstaps kweekmedium, bevochtigde incubators versus droge incubators en verversing van het medium op dag 3 versus ononderbroken cultuur tot dag 5. Geen van de onderzoeken onderzocht echter het effect op de euploïdsnelheid in een eicelontwerp van een broer of zus met PGT-A, waarvoor kweek tot dag 7 vereist is.
Studie Overzicht
Toestand
Conditie
Gedetailleerde beschrijving
Het wordt als een routinepraktijk beschouwd om de embryo's te beoordelen op dag 3 van ontwikkeling, waarvoor de kweekomstandigheden moeten worden verstoord door de embryo's te annoteren met behulp van omgekeerde microscopen. Verlengde kweek tot dag 7 is vereist om trophectodermbiopsie uit te voeren die vereist is voor PGT-A. Er zijn verschillende kweekfactoren die de ontwikkeling van het embryo kunnen beïnvloeden, zoals de pH, die wordt geregeld door de CO2-concentratie, en ook de osmolaliteit, de concentratie opgeloste stof per liter oplossing. Verdamping van de oplossing als gevolg van blootstelling aan hoge temperaturen (37°C) kan de concentraties veranderen en daardoor de ontwikkeling van het embryo in gevaar brengen.
Om de verdampingssnelheid te verminderen, worden cultuurdruppels bedekt met een laag minerale olie. Bevochtigde incubators kunnen ook de verdampingssnelheid verminderen. In het geval van droge incubators, zoals benchtop incubators, kan het echter de oplossing zijn om het kweekmedium minstens één keer bij te vullen - door de embryo's naar een nieuwe kweekschaal te verplaatsen - gedurende deze 7 kweekdagen.
Aangezien eenstapsmedium is ontworpen om de embryo-ontwikkeling gedurende 5 ononderbroken kweekdagen te ondersteunen, terwijl sommige laboratoria embryo's gedurende 7 dagen kweken, is verversing van het kweekmedium onvermijdelijk op dag 3 of dag 5 van ontwikkeling.
Er is geen concreet bewijs voor welke van deze praktijken een betere omgeving zal bieden voor de ontwikkeling van embryo's. Bovendien onderzocht geen van de studies het effect van een eenstaps kweekmediumwisseling op dag 3 of dag 5 op de chromosomale fouten (aneuploïdie/mozaïek). Onderzoekers streven ernaar om in deze prospectieve eicelstudie bij broers en zussen te onderzoeken op welke dag van verversing van het kweekmedium (dag 3 of dag 5) een hoger aantal euploïde blastocysten optreedt.
Studietype
Inschrijving (Verwacht)
Contacten en locaties
Studiecontact
- Naam: SHIERYL DIGMA, RN
- Telefoonnummer: 1061 97126528000
- E-mail: shieryl.digma@artfertilityclinics.com
Studie Locaties
-
-
-
Abu Dhabi, Verenigde Arabische Emiraten, 60202
- Werving
- ART Fertility Clinics LLC
-
Contact:
- Barbara Lawrenz, PhD
- Telefoonnummer: 1108 +97102 652 8000
- E-mail: shieryl.digma@artfertilityclinics.com
-
Contact:
- Shieryl Digma, RN
- Telefoonnummer: 1122 +97102 652 8000
- E-mail: shieryl.digma@artfertilityclinics.com
-
Hoofdonderzoeker:
- Upma Pathak Shanker, Specialist
-
-
Deelname Criteria
Geschiktheidscriteria
Leeftijden die in aanmerking komen voor studie
Accepteert gezonde vrijwilligers
Geslachten die in aanmerking komen voor studie
Bemonsteringsmethode
Studie Bevolking
Beschrijving
Inclusiecriteria:
- Patiënten met minimaal 8 - 10 follikels tijdens ovariële stimulatie
- Patiënten met minimaal 8 rijpe eicellen
- PGT-A
- ICSI
- BMI<35
- Leeftijd 18-40
- Vers of bevroren zaadlozing >10.000 beweeglijke zaadcellen
- Elke ovariële stimulatie
- Embryo's gekweekt in benchtop incubator
Uitsluitingscriteria:
- PGT-M of PGT-SR
- Voorgeschiedenis van embryo-arrestatie
- Endometriose
- Voorgeschiedenis van eerdere behandelingen die de ovariële reserve kunnen aantasten (adnexoperatie, chemotherapie, bestraling...)
Studie plan
Hoe is de studie opgezet?
Ontwerpdetails
Cohorten en interventies
Groep / Cohort |
Interventie / Behandeling |
|---|---|
|
dag 3 verfrissing
Alle MII-eicellen worden geïnsemineerd door ICSI 39-41 uur na de uiteindelijke trigger van de rijping van de eicel. Na ICSI worden oöcyten gekweekt in 2-4 kweekschalen die in 2 aparte kamers zijn geplaatst. Media-opfrissing: Zygote-score op dag 1 (18-20hpi). Verversing van het kweekmedium vindt plaats 67-69 uur na inseminatie (dag 3). Embryoclassificatie vindt niet plaats op dag 2-5. Voorbereiding en verversing van kweekmedia: 30 µL kweekmedium (Globaal totaal LP wordt toegevoegd aan elk putje van de 8 putjes van LifeGlobal GPS Dish (EGPS-010) en 50 µL aan het midden 3 druppels. Gerechten worden 's nachts geëquilibreerd in een CO2-incubator. Embryoclassificatie moet worden uitgevoerd voordat de media worden ververst. De time-out van de incubator tijdens mediaverversing wordt beoordeeld op dag 3 en dag 5. Eén operator dient de ICSI uit te voeren. In het geval van meerdere operators, worden de geïnjecteerde eicellen van elke operator verdeeld over de 2 groepen. |
Alle MII-eicellen worden geïnsemineerd door ICSI 39-41 uur na de uiteindelijke trigger van de rijping van de eicel.
Zygote scoren op dag 1 (18-20hpi).
Verversing van het kweekmedium vindt plaats 67-69 uur na inseminatie (dag 3).
30 µL kweekmedium (Globaal totaal LP wordt toegevoegd aan elk putje van de 8 putjes van LifeGlobal GPS Dish (EGPS-010) en 50 µL aan het midden 3 druppels. Gerechten worden 's nachts geëquilibreerd in een CO2-incubator.
Moet worden gedaan voordat de media worden ververst.
Voor groep 2 worden de embryo's beoordeeld en de media ververst voorafgaand aan de blastocystbiopsie.
|
|
dag 5 verfrissing
Alle MII-eicellen worden geïnsemineerd door ICSI 39-41 uur na de uiteindelijke trigger van de rijping van de eicel. Na ICSI worden oöcyten gekweekt in 2-4 kweekschalen die in 2 aparte kamers zijn geplaatst. Tijdstippen mediaverversing en embryosortering: Zygote-score op dag 1 (18-20hpi). Het beoordelen van het embryo en het verversen van de kweekmedia vindt plaats 114-118 uur na inseminatie (dag 5). Voorbereiding en verversing van kweekmedia: 30 µL kweekmedium (Globaal totaal LP wordt toegevoegd aan elk putje van de 8 putjes van LifeGlobal GPS Dish (EGPS-010) en 50 µL aan het midden 3 druppels. Gerechten worden 's nachts geëquilibreerd in een CO2-incubator. Embryoclassificatie en mediaverversing worden uitgevoerd voorafgaand aan de blastocystbiopsie. De time-out van de incubator tijdens mediaverversing wordt beoordeeld op dag 3 en dag 5. Eén operator dient de ICSI uit te voeren. In het geval van meerdere operators, worden de geïnjecteerde eicellen van elke operator verdeeld over de 2 groepen. |
Alle MII-eicellen worden geïnsemineerd door ICSI 39-41 uur na de uiteindelijke trigger van de rijping van de eicel.
30 µL kweekmedium (Globaal totaal LP wordt toegevoegd aan elk putje van de 8 putjes van LifeGlobal GPS Dish (EGPS-010) en 50 µL aan het midden 3 druppels. Gerechten worden 's nachts geëquilibreerd in een CO2-incubator.
Moet worden gedaan voordat de media worden ververst.
Voor groep 2 worden de embryo's beoordeeld en de media ververst voorafgaand aan de blastocystbiopsie.
Zygote scoren op dag 1 (18-20hpi).
Verversing van kweekmedia vindt plaats 114-118 uur na inseminatie (dag 5).
|
Wat meet het onderzoek?
Primaire uitkomstmaten
Uitkomstmaat |
Maatregel Beschrijving |
Tijdsspanne |
|---|---|---|
|
Blastocyst ploïdie
Tijdsspanne: 3 dagen
|
bepaald na biopsie van trophectodermcellen, genomen uit de blastocyst op dag 5, 6 of 7 van ontwikkeling
|
3 dagen
|
Secundaire uitkomstmaten
Uitkomstmaat |
Maatregel Beschrijving |
Tijdsspanne |
|---|---|---|
|
Cyclus ploïdie tarief
Tijdsspanne: 1 dag
|
het aantal euploïde embryo's in de groep gedeeld door het totale aantal 2PN (beide groepen)
|
1 dag
|
|
Mozaïek Frequentie
Tijdsspanne: 1 dag
|
gedefinieerd als het aantal mozaïekfouten in aneuploïde embryo's.
Dit omvat volledige mozaïekembryo's of aneuploïde embryo's met 1 of meer mozaïekchromosoomafwijkingen
|
1 dag
|
|
Blastocyst-kwaliteit op het moment van biopsie
Tijdsspanne: 1 dag
|
Vier embryokwaliteitsscores (EQ1, 2, 3, 4) gebaseerd op het expansiestadium van de blastocyst, de graad van de binnenste celmassa en de graad van het trophectoderm.
|
1 dag
|
|
Explosiesnelheid
Tijdsspanne: 5 dagen
|
vermogen van het embryo om een holte te vormen (=te blastuleren) 114-118 uur na ICSI.
Aantal blastocysten gedeeld door het aantal 2PN
|
5 dagen
|
Medewerkers en onderzoekers
Sponsor
Onderzoekers
- Hoofdonderzoeker: IBRAHIM ELKHATIB, ART Fertility Clinics LLC
Publicaties en nuttige links
Algemene publicaties
- Bavister BD, Poole KA. Duration and temperature of culture medium equilibration affect frequency of blastocyst development. Reprod Biomed Online. 2005 Jan;10(1):124-9. doi: 10.1016/s1472-6483(10)60813-9.
- Costa-Borges N, Belles M, Meseguer M, Galliano D, Ballesteros A, Calderon G. Blastocyst development in single medium with or without renewal on day 3: a prospective cohort study on sibling donor oocytes in a time-lapse incubator. Fertil Steril. 2016 Mar;105(3):707-713. doi: 10.1016/j.fertnstert.2015.11.038. Epub 2015 Dec 12.
- Krasnopolskaya KV, Beketova AN, Sesina NI, capital ES, Cyrillichinchenko NK, Badalyan GV, Sudarikova NM, Bocharova TV, Zakharchenko EO. The effect of short-term disturbance of day 3 embryo culture on the development and implantation. Gynecol Endocrinol. 2019;35(sup1):1-4. doi: 10.1080/09513590.2019.1632083.
- Pena F, Davalos R, Rechkemmer A, Ascenzo A, Gonzales M. Embryo development until blastocyst stage with and without renewal of single medium on day 3. JBRA Assist Reprod. 2018 Mar 1;22(1):49-51. doi: 10.5935/1518-0557.20180012.
Studie record data
Bestudeer belangrijke data
Studie start (Werkelijk)
Primaire voltooiing (Verwacht)
Studie voltooiing (Verwacht)
Studieregistratiedata
Eerst ingediend
Eerst ingediend dat voldeed aan de QC-criteria
Eerst geplaatst (Werkelijk)
Updates van studierecords
Laatste update geplaatst (Werkelijk)
Laatste update ingediend die voldeed aan QC-criteria
Laatst geverifieerd
Meer informatie
Termen gerelateerd aan deze studie
Trefwoorden
Aanvullende relevante MeSH-voorwaarden
Andere studie-ID-nummers
- 2105-ABU-008-IK
Informatie over medicijnen en apparaten, studiedocumenten
Bestudeert een door de Amerikaanse FDA gereguleerd geneesmiddel
Bestudeert een door de Amerikaanse FDA gereguleerd apparaatproduct
Deze informatie is zonder wijzigingen rechtstreeks van de website clinicaltrials.gov gehaald. Als u verzoeken heeft om uw onderzoeksgegevens te wijzigen, te verwijderen of bij te werken, neem dan contact op met register@clinicaltrials.gov. Zodra er een wijziging wordt doorgevoerd op clinicaltrials.gov, wordt deze ook automatisch bijgewerkt op onze website .