Anticorps anti-SRAS-CoV-2 et neutralisation du virus dans une cohorte vaccinée contre le COVID-19 (DER-CoV2-001)

Cette étude est une étude observationnelle avec utilisation ultérieure de matériel biologique codé. Les sérums du personnel de l'hôpital universitaire de Zurich (USZ) vaccinés avec le BNT162b2 (BioNTech/Pfizer) ont été analysés pour les anticorps spécifiques au SRAS-CoV-2 et la neutralisation du virus.

Le sérum a été analysé pour les IgG et IgA spécifiques du virus en utilisant des kits ELISA d'Euroimmun (Kriens, Suisse) conformément aux instructions du fabricant. Les IgG ont été déterminées avec le kit quantitatif Anti-SARS-CoV-2 Quantivac et les IgA ont été déterminées avec le kit semi-quantitatif Anti-SARS-CoV-2. Les kits déterminent les anticorps dirigés contre la protéine spike-1. Les sérums n'ont pas été dilués ni inactivés par la chaleur avant le test. Les plaques à 96 puits développées ont été analysées en lisant l'absorbance à 450 nm à l'aide d'un lecteur ELISA ELx808 de BioTek Instr. Inc.

De plus, un test de neutralisation du SARS-CoV-2 a été développé au département. Dans ce test de dose d'infection de culture tissulaire (TCID), des cellules Vero ont été infectées par le SRAS-CoV-2 vivant et des sérums ont été ajoutés à diverses dilutions pour tester le potentiel de neutralisation de l'infection virale. Le test a été effectué dans un laboratoire de niveau de sécurité biologique 3. En bref, les cellules VERO-E6 ont été cultivées pendant une nuit jusqu'à env. Adhérence de 80 à 90 % dans des plaques de culture cellulaire à 96 puits à fond plat. Le SARS-CoV-2 a ensuite été mélangé dans des plaques de titre à 96 puits à fond rond avec des dilutions en série de 2 fois de sérum et incubé. Le mélange virus-sérum a ensuite été ajouté à la cellule VERO-E6, et les cultures ont été à nouveau incubées. Après trois jours, les cultures ont été fixées par addition de paraformaldéhyde et colorées au cristal violet pour la visualisation de la cytotoxicité. La dilution de sérum la plus élevée empêchant les infections des cellules a été définie comme le titre de neutralisation.