SARS-CoV-2-Antikörper und Virusneutralisation in einer gegen COVID-19 geimpften Kohorte (DER-CoV2-001)

Bei dieser Studie handelt es sich um eine Beobachtungsstudie mit anschließender Verwendung von codiertem biologischem Material. Seren von mit BNT162b2 (BioNTech/Pfizer) geimpftem Personal des Universitätsspitals Zürich (USZ) wurden auf SARS-CoV-2-spezifische Antikörper und Virusneutralisation analysiert.

Das Serum wurde mit ELISA-Kits von Euroimmun (Kriens, Schweiz) nach Herstellerangaben auf virusspezifisches IgG und IgA analysiert. IgG wurde mit dem quantitativen Anti-SARS-CoV-2 Quantivac-Kit und IgA mit dem semiquantitativen Anti-SARS-CoV-2-Kit bestimmt. Die Kits bestimmen Antikörper gegen das Spike-1-Protein. Die Seren wurden vor dem Testen nicht verdünnt und nicht hitzeinaktiviert. Die entwickelten Platten mit 96 Vertiefungen wurden durch Ablesen der Extinktion bei 450 nm unter Verwendung eines ELx808-ELISA-Lesegeräts von BioTek Instr. Inc.

Darüber hinaus wurde an der Abteilung ein SARS-CoV-2-Neutralisationsassay entwickelt. In diesem Tissue Culture Infection Dose (TCID)-Assay wurden Vero-Zellen mit lebendem SARS-CoV-2 infiziert, und Seren wurden in verschiedenen Verdünnungen hinzugefügt, um das Potenzial zur Neutralisierung einer Virusinfektion zu testen. Der Assay wurde in einem Labor der Biosicherheitsstufe 3 durchgeführt. Kurz gesagt wurden VERO-E6-Zellen über Nacht auf ca. 80–90 % Adhärenz in 96-Well-Zellkulturplatten mit flachem Boden. Das SARS-CoV-2 wurde dann in 96-Well-Titerplatten mit rundem Boden mit 2-fachen Reihenverdünnungen von Serum gemischt und inkubiert. Anschließend wurde das Virus-Serum-Gemisch zu den VERO-E6-Zellen gegeben und die Kulturen erneut inkubiert. Nach drei Tagen wurden die Kulturen durch Zugabe von Paraformaldehyd fixiert und zur Sichtbarmachung der Zytotoxizität mit Kristallviolett gefärbt. Als Neutralisationstiter wurde die höchste Serumverdünnung definiert, die eine Infektion der Zellen verhinderte.