Anticuerpos contra el SARS-CoV-2 y neutralización del virus en una cohorte vacunada contra el COVID-19 (DER-CoV2-001)

Este estudio es un estudio observacional con uso posterior de material biológico codificado. Los sueros del personal del Hospital Universitario de Zúrich (USZ) vacunados con BNT162b2 (BioNTech/Pfizer) se analizaron para detectar anticuerpos específicos contra el SARS-CoV-2 y neutralización del virus.

Se analizó el suero para detectar IgG e IgA específicas de virus usando kits ELISA de Euroimmun (Kriens, Suiza) de acuerdo con las instrucciones del fabricante. La IgG se determinó con el kit cuantitativo Anti-SARS-CoV-2 Quantivac y la IgA con el kit semicuantitativo Anti-SARS-CoV-2. Los kits determinan anticuerpos contra la proteína spike-1. Los sueros no se diluyeron ni se inactivaron con calor antes de la prueba. Las placas de 96 pocillos reveladas se analizaron leyendo la absorbancia a 450 nm usando un lector ELISA ELx808 de BioTek Instr. Cª

Además, en el departamento se desarrolló un ensayo de neutralización de SARS-CoV-2. En este ensayo de dosis de infección de cultivo de tejidos (TCID), las células Vero se infectaron con SARS-CoV-2 vivo y se agregaron sueros en varias diluciones para probar el potencial para neutralizar la infección viral. El ensayo se realizó en un laboratorio de nivel 3 de bioseguridad. Brevemente, las células VERO-E6 se cultivaron durante la noche hasta ca. 80-90 % de adherencia en placas de cultivo celular de 96 pocillos de fondo plano. Luego, el SARS-CoV-2 se mezcló en placas de titulación de 96 pocillos de fondo redondo con diluciones en serie de suero al doble y se incubó. A continuación, se añadió la mezcla de virus y suero a la célula VERO-E6 y los cultivos se incubaron de nuevo. Después de tres días, los cultivos se fijaron mediante la adición de paraformaldehído y se tiñeron con cristal violeta para visualizar la citotoxicidad. La dilución de suero más alta que previene infecciones de las células se definió como el título de neutralización.