Anticorpos SARS-CoV-2 e neutralização do vírus em uma coorte vacinada contra a COVID-19 (DER-CoV2-001)

Este estudo é um estudo observacional com posterior uso de material biológico codificado. Os soros do pessoal do Hospital Universitário de Zurique (USZ) vacinados com BNT162b2 (BioNTech/Pfizer) foram analisados ​​quanto a anticorpos específicos para SARS-CoV-2 e neutralização do vírus.

O soro foi analisado para IgG e IgA específicos do vírus usando kits ELISA da Euroimmun (Kriens, Suíça) de acordo com as instruções do fabricante. A IgG foi determinada com o kit quantitativo Anti-SARS-CoV-2 Quantivac e a IgA foi determinada com o kit semi-quantitativo Anti-SARS-CoV-2. Os kits determinam anticorpos contra a proteína spike-1. Os soros não foram diluídos nem inativados pelo calor antes do teste. As placas de 96 poços desenvolvidas foram analisadas por leitura de absorbância a 450 nm usando um leitor ELx808 ELISA da BioTek Instr. Inc.

Além disso, um ensaio de neutralização do SARS-CoV-2 foi desenvolvido no departamento. Neste ensaio de Dose de Infecção de Cultura de Tecidos (TCID), células Vero foram infectadas com SARS-CoV-2 vivo e soros foram adicionados em várias diluições para testar o potencial de neutralizar a infecção viral. O ensaio foi realizado em um laboratório de nível 3 de biossegurança. Resumidamente, as células VERO-E6 foram cultivadas durante a noite até ca. 80-90% de aderência em placas de cultura de células de 96 poços de fundo plano. O SARS-CoV-2 foi então misturado em placas de título de 96 poços de fundo redondo com diluições em série de 2 vezes de soro e incubado. A mistura vírus-soro foi então adicionada à célula VERO-E6 e as culturas foram novamente incubadas. Após três dias, as culturas foram fixadas por adição de paraformaldeído e coradas com cristal violeta para visualização da citotoxicidade. A maior diluição de soro que previne infecções das células foi definida como o título de neutralização.