Антитела к SARS-CoV-2 и нейтрализация вируса в когорте вакцинированных против COVID-19 (DER-CoV2-001)

Данное исследование представляет собой наблюдательное исследование с последующим использованием закодированного биологического материала. Сыворотка персонала Университетской больницы Цюриха (USZ), вакцинированного BNT162b2 (BioNTech/Pfizer), была проанализирована на наличие специфических антител против SARS-CoV-2 и нейтрализацию вируса.

Сыворотку анализировали на вирусспецифические IgG и IgA с использованием наборов ELISA от Euroimmun (Kriens, Швейцария) в соответствии с инструкцией производителя. IgG определяли с помощью количественного набора Anti-SARS-CoV-2 Quantivac, а IgA определяли с помощью полуколичественного набора Anti-SARS-CoV-2. Наборы определяют антитела против белка шипа-1. Перед тестированием сыворотки не разбавляли и не инактивировали нагреванием. Разработанные 96-луночные планшеты анализировали, измеряя поглощение при 450 нм с использованием считывателя ELx808 ELISA от BioTek Instr. Инк.

Кроме того, в отделении разработан тест на нейтрализацию SARS-CoV-2. В этом анализе дозы инфекции культуры тканей (TCID) клетки Vero были инфицированы живым SARS-CoV-2, и сыворотки были добавлены в различных разведениях, чтобы проверить способность нейтрализовать вирусную инфекцию. Анализ проводился в лаборатории уровня биобезопасности 3. Вкратце, клетки VERO-E6 выращивали в течение ночи до прибл. Адгезия 80-90% в плоскодонных 96-луночных планшетах для культивирования клеток. Затем SARS-CoV-2 смешивали в круглодонных 96-луночных планшетах для титрования с двукратными серийными разведениями сыворотки и инкубировали. Затем к ячейке VERO-E6 добавляли смесь вирус-сыворотка и культуры снова инкубировали. Через трое суток культуры фиксировали добавлением параформальдегида и окрашивали кристаллическим фиолетовым для визуализации цитотоксичности. Максимальное разведение сыворотки, предотвращающее инфицирование клеток, определяли как титр нейтрализации.