L'effet de la vitamine C sur la capacité totale d'oxydation du GCF chez les patients fumeurs atteints de parodontite

Tous les sujets ont été dépistés par un examen parodontal complet et des tableaux parodontaux complets ont été obtenus et des radiographies périapicales de la bouche complète ont été prises en utilisant la technique du cône long parallèle au moment de l'examen initial pour confirmer le diagnostic.

Les deux groupes (fumeurs atteints de parodontite de stade III-IV grade B) ont reçu un détartrage complet de la bouche et un surfaçage radiculaire à l'aide d'un détartreur à ultrasons et d'instruments manuels sous anesthésie locale, réalisés en 2 visites. Les patients ont reçu des instructions minutieuses sur les mesures de contrôle de la plaque auto-effectuées : brossage des dents deux fois par jour avec une brosse et du dentifrice et nettoyage interdentaire une fois par jour à l'aide de cure-dents triangulaires en bois et/ou de brosses interdentaires rinçage avec un bain de bouche à 0,125 % de chlorhexidine HCL (Hexitol®) utilisé deux fois par jour pendant 2 semaines. Le groupe II a reçu de l'antioxydant vit C 2 grammes/jour pendant quatre semaines.

Prélèvement d'un échantillon de liquide créviculaire gingival (GCF) :

Dans les deux groupes, des échantillons de GCF ont été prélevés lors de la visite initiale et prélevés à nouveau 3 mois après le traitement non chirurgical comme suit : au niveau de la zone sélectionnée (le site le plus touché parodontalement), toute la plaque supragingivale détectée cliniquement a été retirée avec soin pour minimiser la contamination de la bandes de papier près de la plaque . Les dents sélectionnées ont ensuite été doucement lavées à l'eau, et les sites à l'étude ont été isolés avec des rouleaux de coton pour éviter la contamination par la salive et séchés doucement avec une seringue à air . Des bandes de papier filtre ont été placées à l'entrée de la crevasse et ont été laissées en place pendant 30 secondes) puis placées dans un eppendorf en plastique. Les bandelettes présentant une plaque, de la salive ou une contamination par le sang ont été jetées. L'échantillon du site individuel a été stocké à -80 °C pour un traitement ultérieur. Le GCF a ensuite été extrait et dosé pour la teneur en capacité oxydante totale.

Quantification du COT dans le GCF :

Les échantillons de GCF des deux groupes ont été analysés à l'aide de la technique ELISA pour estimer le niveau de capacité oxydante totale (TOC) dans le GCF comme suit :

Le COT a été extrait de la bande de papier en ajoutant 100 μl de tampon phosphate salin au tube eppendorf puis mélangé par vortex suivi d'une centrifugation pendant 10 min à 3000Xg. Le surnageant a été utilisé pour l'estimation du COT. Pour la détermination quantitative des concentrations de COT humaines dans le GCF, le kit PerOx (TOS/TOC) Immun-diagnostik Assay (ELISA) a été utilisé. ELISA est destiné à la détermination quantitative de l'état/capacité oxydative totale (TOS/TOC) dans le plasma, le sérum et les surnageants de culture cellulaire d'acide éthylène-diaminetétraacétique (EDTA).

Le dosage des peroxydes est réalisé par la réaction d'une peroxydase avec les peroxydes de l'échantillon suivie de la conversion du TMB (Tétra-méthylbenzidine) en un produit coloré. Après addition d'une solution d'arrêt, les échantillons ont été mesurés à 450 nm dans un lecteur de plaque de microtitration. La quantification est effectuée par le calibrateur livré