Effekten av vitamin C på GCF total oxidantkapacitet hos rökare patienter med parodontit

Alla försökspersoner screenades genom omfattande parodontal undersökning och fullständiga parodontala diagram erhölls och periapikala röntgenbilder i hela munnen togs med användning av den långa konens parallella tekniken vid tidpunkten för den första undersökningen för att bekräfta diagnosen.

Båda grupperna (rökare med stadium III-IV grad B parodontit) fick full munfjällning och rothyvling med hjälp av ultraljudsskalare och handinstrument under lokalbedövning, genomförda under 2 besök. Patienterna fick noggrann instruktion i självutförda plackkontrollåtgärder: två gånger dagligen tandborstning med borste och tandkräm och en gång dagligen interdental rengöring med hjälp av triangulära trätandpetare och/eller interdentalborstar som sköljdes med 0,125 % klorhexidin HCL munvatten (Hexitol®) använd två gånger dagligen i 2 veckor. Grupp II fick antioxidant vit C 2 gram/dag i fyra veckor.

Samling av tandköttskrevikelvätska (GCF) prov:

I båda grupperna samlades GCF-prover vid det första besöket och samlades in igen 3 månader efter icke-kirurgisk behandling enligt följande: vid det valda området (den mest periodontalt drabbade platsen) avlägsnades allt kliniskt detekterat supragingivalt plack försiktigt för att minimera kontaminering av pappersremsor vid plaketten. De utvalda tänderna tvättades sedan försiktigt med vatten, och ställena som studerades isolerades med bomullsrullar för att förhindra kontaminering med saliv och torkades försiktigt med en luftspruta. Filterpappersremsor placerades vid ingången till springan och lämnades på plats i 30 sekunder) och placerades sedan i plast eppendorf. Remsor med eventuell plack, saliv eller blodkontamination kasserades. Provet från den individuella platsen förvarades vid -80°C för senare bearbetning. GCF extraherades sedan och analyserades med avseende på innehållet av total oxidantkapacitet.

Kvantifiering av TOC i GCF:

GCF-prover från båda grupperna analyserades med hjälp av ELISA-teknik för uppskattning av nivån av total oxidantkapacitet (TOC) i GCF enligt följande:

TOC extraherades från pappersremsan genom att tillsätta 100 μl fosfatbuffertsaltlösning till eppendorfröret och blandades sedan genom virvel följt av centrifugering i 10 minuter vid 3000Xg. Supernatanten användes för uppskattning av TOC. För den kvantitativa bestämningen av humana TOC-koncentrationer i GCF användes PerOx (TOS/TOC) Immun-diagnostik Assay (ELISA) Kit. ELISA är avsedd för kvantitativ bestämning av total oxidativ status/kapacitet (TOS/TOC) i etylendiamintetraättiksyra (EDTA)-plasma, serum och cellkultursupernatanter.

Bestämningen av peroxiderna utförs genom reaktion av ett peroxidas med peroxider i provet följt av omvandling av TMB (Tetra-metylbensidin) till en färgad produkt. Efter tillsats av en stopplösning mättes proverna vid 450 nm i en mikrotiterplattläsare. Kvantifieringen utförs av den levererade kalibratorn