Het effect van vitamine C op de totale oxidantcapaciteit van GCF bij rokerspatiënten met parodontitis

Alle proefpersonen werden gescreend door uitgebreid parodontaal onderzoek en volledige parodontale grafieken werden verkregen en periapicale röntgenfoto's van de volledige mond werden gemaakt met behulp van de lange kegelparalleltechniek op het moment van het eerste onderzoek om de diagnose te bevestigen.

Beide groepen (rokers met stadium III-IV graad B parodontitis) ondergingen volledige mondschilfering en wortelschaven met behulp van ultrasone scaler en handinstrumenten onder lokale anesthesie, voltooid gedurende 2 bezoeken. Patiënten kregen zorgvuldige instructies over zelf uitgevoerde plaquecontrolemaatregelen: tweemaal daags tandenpoetsen met een borstel en tandpasta en eenmaal daags interdentale reiniging met driehoekige houten tandenstokers en/of interdentale ragers spoelen met 0,125% chloorhexidine HCL mondwater (Hexitol®) tweemaal daags gedurende 2 weken gebruikt. Groep II kreeg gedurende vier weken antioxidant vit C 2 gram/dag.

Verzameling van gingivale creviculaire vloeistof (GCF) -monster:

In beide groepen werden bij het eerste bezoek GCF-monsters genomen en 3 maanden na de niet-chirurgische behandeling als volgt opnieuw verzameld: op het geselecteerde gebied (de meest parodontaal aangetaste plaats) werden alle klinisch gedetecteerde supragingivale plaque zorgvuldig verwijderd om besmetting van de papieren stroken bij de plaquette. De geselecteerde tanden werden vervolgens voorzichtig gewassen met water en de onderzochte plaatsen werden geïsoleerd met wattenrollen om besmetting met speeksel te voorkomen en voorzichtig gedroogd met een luchtspuit. Filtreerpapierstroken werden bij de ingang van de spleet geplaatst en werden gedurende 30 seconden op hun plaats gelaten en vervolgens in plastic eppendorf geplaatst. Strips met plaque, speeksel of bloedverontreiniging werden weggegooid. Het monster van de individuele plaats werd bewaard bij -80°C voor latere verwerking. GCF werd vervolgens geëxtraheerd en getest op het gehalte aan totale oxidantcapaciteit.

Kwantificering van TOC in GCF:

GCF-monsters van beide groepen werden als volgt getest met behulp van de ELISA-techniek voor het schatten van het niveau van de totale oxidantcapaciteit (TOC) in GCF:

De TOC werd uit de papieren strook geëxtraheerd door 100 μl fosfaatbufferzoutoplossing aan de eppendorfbuis toe te voegen, vervolgens gemengd door vortex gevolgd door centrifugatie gedurende 10 minuten bij 3000 x g. Het supernatant werd gebruikt voor het schatten van TOC. Voor de kwantitatieve bepaling van humane TOC-concentraties in GCF werd PerOx (TOS/TOC) Immun-diagnostik Assay (ELISA) Kit gebruikt. ELISA is bedoeld voor de kwantitatieve bepaling van de totale oxidatieve status/capaciteit (TOS/TOC) in ethyleendiaminetetraazijnzuur (EDTA)-plasma, serum en celkweeksupernatanten.

De bepaling van de peroxiden wordt uitgevoerd door de reactie van een peroxidase met peroxiden in het monster gevolgd door de omzetting van TMB (Tetra-methylbenzidine) in een gekleurd product. Na toevoeging van een stopoplossing werden de monsters gemeten bij 450 nm in een microtiterplaatlezer. De kwantificering wordt uitgevoerd door de meegeleverde kalibrator