O Efeito da Vitamina C na Capacidade Oxidante Total GCF em Pacientes Fumantes com Periodontite

Todos os indivíduos foram selecionados por exame periodontal abrangente e gráficos periodontais completos foram obtidos e radiografias periapicais de boca inteira foram feitas usando a técnica de cone paralelo longo no momento do exame inicial para confirmar o diagnóstico.

Ambos os grupos (fumantes com periodontite estágio III-IV grau B) receberam raspagem bucal completa e alisamento radicular usando raspador ultrassônico e instrumentos manuais sob anestesia local, concluídos em 2 visitas. Os pacientes receberam instruções cuidadosas sobre as medidas de controle de placa auto-realizadas: escovação dos dentes duas vezes ao dia com escova e pasta de dente e limpeza interdental uma vez ao dia usando palitos de madeira triangulares e/ou escovas interdentais enxaguando com colutório de clorexidina 0,125% HCL (Hexitol®) para ser usado duas vezes ao dia por 2 semanas. O grupo II recebeu vit C antioxidante 2 gramas/dia durante quatro semanas.

Coleta de amostra de fluido crevicular gengival (GCF):

Em ambos os grupos, as amostras GCF foram coletadas na visita inicial e coletadas novamente 3 meses após o tratamento não cirúrgico da seguinte forma: na área selecionada (o local mais afetado periodontalmente), toda a placa supragengival detectada clinicamente foi removida cuidadosamente para minimizar a contaminação do tiras de papel junto à placa. Os dentes selecionados foram então cuidadosamente lavados com água, e os locais em estudo foram isolados com rolos de algodão para evitar a contaminação com saliva e suavemente secos com uma seringa de ar. Tiras de papel de filtro foram colocadas na entrada da fenda e deixadas no local por 30 segundos) e então colocadas em eppendorf plástico. Tiras com qualquer contaminação por placa, saliva ou sangue foram descartadas. A amostra do local individual foi armazenada a -80°C para processamento posterior. O GCF foi então extraído e testado quanto ao conteúdo da capacidade oxidante total.

Quantificação de TOC em GCF:

Amostras GCF de ambos os grupos foram analisadas usando a técnica ELISA para estimar o nível de capacidade oxidante total (TOC) em GCF da seguinte forma:

O TOC foi extraído da tira de papel pela adição de 100 μl de tampão fosfato salino ao tubo eppendorf, em seguida, misturado por vórtice seguido de centrifugação por 10 min a 3000Xg. O sobrenadante foi usado para estimar o TOC. Para a determinação quantitativa das concentrações de TOC humano em GCF, foi utilizado o Kit de Ensaio Immundiagnostik (ELISA) PerOx (TOS/TOC). O ELISA destina-se à determinação quantitativa do estado/capacidade oxidativa total (TOS/TOC) em sobrenadantes de plasma, soro e cultura celular de ácido etilenodiaminotetracético (EDTA).

A determinação dos peróxidos é realizada pela reação de uma peroxidase com os peróxidos da amostra seguida da conversão do TMB (Tetra-metilbenzidina) em um produto colorido. Após a adição de uma solução de parada, as amostras foram medidas a 450 nm em um leitor de placas de microtitulação. A quantificação é realizada pelo calibrador entregue