Die Wirkung von Vitamin C auf die Gesamtoxidationsfähigkeit des GCF bei Raucherpatienten mit Parodontitis

Alle Probanden wurden einer umfassenden parodontalen Untersuchung unterzogen, und es wurden vollständige Parodontaldiagramme erstellt und periapikale Vollmund-Röntgenaufnahmen unter Verwendung der Langkegel-Paralleltechnik zum Zeitpunkt der Erstuntersuchung zur Bestätigung der Diagnose angefertigt.

Beide Gruppen (Raucher mit Parodontitis im Stadium III-IV Grad B) erhielten eine vollständige Zahnsteinentfernung und Wurzelglättung mit Ultraschall-Scaler und Handinstrumenten unter örtlicher Betäubung, die über 2 Besuche durchgeführt wurden. Die Patienten wurden sorgfältig in selbst durchgeführte Maßnahmen zur Plaquekontrolle eingewiesen: zweimal täglich Zähneputzen mit Bürste und Zahnpasta und einmal täglich die Zahnzwischenräume mit dreieckigen Holzzahnstochern und/oder Interdentalbürsten spülen mit 0,125 % Chlorhexidin-HCL-Mundspülung (Hexitol®) to be 2 Wochen lang zweimal täglich verwendet. Gruppe II erhielt vier Wochen lang täglich 2 Gramm Vitamin C als Antioxidans.

Entnahme der Gingiva-Crevicular-Flüssigkeit (GCF)-Probe:

In beiden Gruppen wurden GCF-Proben beim ersten Besuch gesammelt und 3 Monate nach der nicht-chirurgischen Behandlung wie folgt erneut gesammelt: Im ausgewählten Bereich (der am stärksten parodontal betroffenen Stelle) wurden alle klinisch nachgewiesenen supragingivalen Plaques sorgfältig entfernt, um die Kontamination zu minimieren Papierstreifen durch die Plakette. Die ausgewählten Zähne wurden dann vorsichtig mit Wasser gewaschen, und die zu untersuchenden Stellen wurden mit Watterollen isoliert, um eine Kontamination mit Speichel zu vermeiden, und vorsichtig mit einer Luftspritze getrocknet. Filterpapierstreifen wurden am Eingang des Spalts platziert und für 30 Sekunden dort belassen) und dann in Plastik-Eppendorf platziert. Streifen mit jeglicher Plaque-, Speichel- oder Blutverunreinigung wurden entsorgt. Die Probe von der einzelnen Stelle wurde zur späteren Verarbeitung bei –80°C gelagert. GCF wurde dann extrahiert und auf den Gehalt an Gesamtoxidationsmittelkapazität untersucht.

Quantifizierung von TOC in GCF:

GCF-Proben beider Gruppen wurden unter Verwendung der ELISA-Technik zur Abschätzung des Gehalts an Gesamtoxidationsmittelkapazität (TOC) in GCF wie folgt untersucht:

Das TOC wurde aus dem Papierstreifen extrahiert, indem 100 &mgr;l phosphatgepufferte Kochsalzlösung in das Eppendorf-Röhrchen gegeben wurden, dann durch Verwirbeln gemischt wurde, gefolgt von 10-minütiger Zentrifugation bei 3000 × g. Der Überstand wurde zur Abschätzung des TOC verwendet. Zur quantitativen Bestimmung der humanen TOC-Konzentrationen in GCF wurde das PerOx (TOS/TOC) Immundiagnostik Assay (ELISA) Kit verwendet. Der ELISA dient der quantitativen Bestimmung des Gesamtoxidationsstatus/-kapazität (TOS/TOC) in Ethylendiamintetraessigsäure (EDTA)-Plasma, Serum und Zellkulturüberständen.

Die Bestimmung der Peroxide erfolgt durch die Reaktion einer Peroxidase mit Peroxiden in der Probe, gefolgt von der Umwandlung von TMB (Tetra-Methylbenzidin) in ein farbiges Produkt. Nach Zugabe einer Stopplösung wurden die Proben bei 450 nm in einem Mikrotiterplatten-Lesegerät gemessen. Die Quantifizierung erfolgt durch den mitgelieferten Kalibrator