L'effetto della vitamina C sulla capacità ossidante totale del GCF nei pazienti fumatori con parodontite

Tutti i soggetti sono stati sottoposti a screening parodontale completo e sono state ottenute cartelle parodontali complete e sono state eseguite radiografie periapicali dell'intera bocca utilizzando la tecnica parallela a cono lungo al momento dell'esame iniziale per confermare la diagnosi.

Entrambi i gruppi (fumatori con parodontite di grado B in stadio III-IV) hanno ricevuto l'ablazione completa della bocca e la levigatura radicolare utilizzando un ablatore ultrasonico e strumenti manuali in anestesia locale, completati in 2 visite. I pazienti sono stati istruiti attentamente sulle misure di controllo della placca eseguite autonomamente: lavarsi i denti due volte al giorno con spazzolino e pasta dentifricia e una pulizia interdentale una volta al giorno utilizzando stuzzicadenti triangolari in legno e/o spazzolini interdentali risciacquare con collutorio clorexidina HCL allo 0,125% usato due volte al giorno per 2 settimane. Il gruppo II ha ricevuto vitamina C antiossidante 2 grammi al giorno per quattro settimane.

Raccolta del campione di fluido crevicolare gengivale (GCF):

In entrambi i gruppi, i campioni di GCF sono stati prelevati durante la visita iniziale e prelevati nuovamente 3 mesi dopo il trattamento non chirurgico come segue: nell'area selezionata (il sito più colpito dal punto di vista parodontale), tutta la placca sopragengivale rilevata clinicamente è stata rimossa con attenzione per ridurre al minimo la contaminazione del strisce di carta vicino alla targa. I denti selezionati sono stati quindi lavati delicatamente con acqua, i siti in esame sono stati isolati con rulli di cotone per evitare la contaminazione con la saliva e asciugati delicatamente con una siringa ad aria. Strisce di carta da filtro sono state poste all'ingresso della fessura e sono state lasciate in posizione per 30 secondi) e quindi poste in eppendorf di plastica. Le strisce con qualsiasi contaminazione di placca, saliva o sangue sono state scartate. Il campione dal singolo sito è stato conservato a -80°C per la successiva elaborazione. Il GCF è stato quindi estratto e analizzato per il contenuto della capacità ossidante totale.

Quantificazione del TOC in GCF:

I campioni GCF di entrambi i gruppi sono stati analizzati utilizzando la tecnica ELISA per la stima del livello di capacità ossidante totale (TOC) in GCF come segue:

Il TOC è stato estratto dalla striscia di carta aggiungendo 100 μl di tampone fosfato salino alla provetta eppendorf, quindi miscelato mediante vortex seguito da centrifugazione per 10 minuti a 3000 Xg. Il surnatante è stato utilizzato per la stima del TOC. Per la determinazione quantitativa delle concentrazioni di TOC umano in GCF, è stato utilizzato il kit PerOx (TOS/TOC) Immun-diagnostik Assay (ELISA). ELISA è destinato alla determinazione quantitativa dello stato/capacità ossidativa totale (TOS/TOC) in acido etilen-diamminotetraacetico (EDTA)-plasma, siero e surnatanti di colture cellulari.

La determinazione dei perossidi viene eseguita mediante la reazione di una perossidasi con i perossidi nel campione seguita dalla conversione del TMB (Tetra-metilbenzidina) in un prodotto colorato. Dopo l'aggiunta di una soluzione di arresto, i campioni sono stati misurati a 450 nm in un lettore di micropiastre. La quantificazione viene eseguita dal calibratore fornito