Activité de la lipase acide lysosomale dans la stéatose hépatique non alcoolique (NAFLD LAL)

La stéatose hépatique non alcoolique (NAFLD) est une maladie multifactorielle qui touche un quart de la population mondiale. L'accumulation pathologique de graisse, dans les hépatocytes, est la première atteinte et est due à une altération de la lipogenèse hépatique et extrahépatique, de la lipolyse et de la lipophagie des grosses gouttelettes lipidiques.

La lipophagie joue un rôle clé dans l'apparition de la NAFLD, dans les autolysosomes, de petites gouttelettes de graisse sont catabolisées par l'enzyme Lysosomal Acid Lipase (LAL) qui hydrolyse les esters de cholestérol et les triglycérides formant du cholestérol et des acides gras libres.

Notre groupe de recherche a démontré que, les sujets atteints de NAFLD, présentent une activité enzymatique réduite soit par rapport à des patients atteints d'hépatopathie chronique d'étiologie différente, mais de stadification comparable, soit par rapport à des sujets témoins sains.

Les leucocytes sont le principal site d'activité enzymatique dans le sang, cependant, notre groupe de recherche a montré qu'il peut également être détecté à l'intérieur des plaquettes, démontrant comment l'activité LAL peut être échangée entre les cellules.

De plus, notre groupe a montré, pour la première fois, comment l'activité enzymatique intracellulaire est réduite, indépendamment du nombre de plaquettes et de leucocytes et progressivement de l'hépatopathie chronique jusqu'à la cirrhose.

Parmi les facteurs qui contribuent à l'altération du métabolisme des lipides, il faut compter la prédisposition génétique à l'accumulation de graisse hépatique. Plusieurs variantes de gènes codant pour des protéines impliquées dans la digestion ou le stockage des graisses sont impliquées.

Dans cette étude ont été pris en compte : la phospholipase de type patatine contenant le domaine 3 (PNPLA3), la superfamille 6 transmembranaire 2 (TM6SF2) et la 17β-hydroxystéroïde déshydrogénase de type 13 (HSD17B13).

Le variant rs738409 (C>G, p.I148M) du gène PNPLA3 consiste en une protéine dont le site catalytique n'est pas entièrement accessible au substrat qui, par conséquent, s'accumule dans le site de stockage.

Cette variante se trouve couramment chez les sujets NAFLD et il a été largement rapporté comment les porteurs de variantes progressent plus rapidement vers une maladie grave (stéatohépatite) que les sujets de type sauvage.

Le gène TM6SF2 code pour un transporteur membranaire impliqué dans le mouvement des triglycérides, le variant rs58542926 (C>T E167K) a été associé à une prédisposition accrue à la fibrose hépatique chez les sujets NAFLD. Cela est probablement dû à la perte de la fonction protéique entraînant une rétention hépatique des triglycérides et du cholestérol.

Contrairement à PNPLA3 et TM6SF2, le variant rs72613567 (TA>TAA) du gène HSD17B13 a un effet protecteur contre la progression de la NAFLD. Elle se caractérise par une perte de fonction protéique qui protège contre les lésions hépatiques chroniques et atténue la progression de la maladie, bien que la façon dont l'effet protecteur se produise soit encore à l'étude.

En raison de l'étiologie multifactorielle de la maladie, de la nécessité d'effectuer une surveillance ciblée chez les sujets génétiquement prédisposés et, afin de prévenir la progression du NALFD vers des formes pathologiques sévères caractérisées par une mortalité accrue, dans cette étude, 316 sujets seront inclus.

Ils seront répartis comme suit : Caucasiens italiens, âgés de > 18 et < 70 ans, avec NAFLD non cirrhotique et porteurs du variant PNPLA3 I148M, et, 158 sujets Caucasiens italiens, âgés de > 18 et < 70 ans, avec non cirrhotique NAFLD et porteurs de l'allèle de type sauvage.

Les critères d'exclusion suivants seront pris en compte : tout type de maladie maligne au cours des 5 dernières années, tout type de maladie inflammatoire ou auto-immune, les corticoïdes à usage systémique, tout type de médicament pouvant affecter le poids corporel ou la composition corporelle, insuffisance rénale (DFG < 90 mL/min), insuffisance cardiaque (NYHA classes II-IV), tout type de maladie hépatique plutôt que NAFLD, consommation excessive d'alcool (> 140 g/semaine pour les hommes et 70 g/semaine pour les femmes), participation à une réduction de poids programme au cours des 3 derniers mois, sels biliaires, cholestyramine au cours des 6 derniers mois précédant l'inscription, cholécystectomie antérieure, maladie de la vésicule biliaire.

Le sang périphérique sera prélevé afin de mesurer les lipides hématiques (cholestérol total et ses fractions, triglycérides), l'activité LAL sanguine totale, d'effectuer des analyses génétiques et enfin d'évaluer l'activité lipasique dans les plaquettes.

Une élastographie hépatique sera également réalisée, chez 100 patients, selon la présence/absence du variant PNPLA3, afin de peser la prédisposition génétique sur le développement ou la progression de la NAFLD Enfin, chez les sujets qui présentent une activité lipasique inférieure de 30% à la normale (0,88 ± 0,38 (moyenne ± ET), la méthylation du promoteur LIPA sera étudiée.