Lysosomaalisen happolipaasin aktiivisuus alkoholittomassa rasvamaksasairaudessa (NAFLD LAL)

Alkoholiton rasvamaksatauti (NAFLD) on monitekijäinen sairaus, joka vaikuttaa neljännekseen maailman väestöstä. Patologinen rasvan kerääntyminen hepatosyytteihin on ensimmäinen osuma, ja se johtuu maksan ja maksan ulkopuolisen lipogeneesin, lipolyysin ja suurten lipidipisaroiden lipofagian muuttumisesta.

Lipofagialla on keskeinen rooli NAFLD:n puhkeamisessa, autolysosomeissa pieniä rasvapisaroita katabolisoi Lysosomal Acid Lipase (LAL) -entsyymi, joka hydrolysoi kolesteroliestereitä ja triglyseridejä muodostaen kolesterolia ja vapaita rasvahappoja.

Tutkimusryhmämme osoitti, että NAFLD-potilailla on vähentynyt entsymaattinen aktiivisuus joko verrattuna potilaisiin, joilla on krooninen maksasairaus, jolla on eri etiologia, mutta asteikko on vertailukelpoinen, joko verrattuna terveisiin kontrollihenkilöihin.

Leukosyytit ovat pääasiallinen entsymaattisen aktiivisuuden paikka veressä, mutta tutkimusryhmämme on osoittanut, että se voidaan havaita myös verihiutaleiden sisältä, mikä osoittaa kuinka LAL-aktiivisuus voidaan vaihtaa solujen välillä.

Lisäksi ryhmämme on osoittanut ensimmäistä kertaa, kuinka solunsisäinen entsymaattinen aktiivisuus vähenee verihiutaleiden ja leukosyyttien määrästä riippumatta ja asteittain kroonisesta maksasairaudesta kirroosiin.

Lipidiaineenvaihdunnan muuttumiseen vaikuttavien tekijöiden joukossa on otettava huomioon geneettinen taipumus maksan rasvan kertymiseen. Mukana on useita geenimuunnelmia, jotka koodaavat proteiineja, jotka liittyvät rasvojen sulatukseen tai varastointiin.

Tässä tutkimuksessa huomioitiin: patatiinin kaltainen fosfolipaasidomeenia sisältävä 3 (PNPLA3), Transmembraani 6 -superperhe 2 (TM6SF2) ja 17β-hydroksisteroididehydrogenaasi tyyppi 13 (HSD17B13).

PNPLA3-geenin rs738409-variantti (C> G, p.I148M) koostuu proteiinista, jonka katalyyttinen kohta ei ole täysin saatavilla substraatille, joka sen seurauksena kerääntyy varastointipaikkaan.

Tämä variantti löytyy yleisesti NAFLD-potilaista, ja on laajalti raportoitu, kuinka variantin kantajat etenevät nopeammin kohti vakavaa sairautta (steatohepatiitti) kuin villityypin koehenkilöt.

TM6SF2-geeni koodaa triglyseridien liikkeisiin osallistuvaa kalvonkuljettajaa, rs58542926 (C> T E167K) -variantti on yhdistetty lisääntyneeseen maksafibroosialttiuteen NAFLD-potilailla. Tämä johtuu todennäköisesti proteiinitoiminnan menetyksestä, mikä johtaa triglyseridien ja kolesterolin pidättymiseen maksassa.

Toisin kuin PNPLA3 ja TM6SF2, HSD17B13-geenin variantilla rs72613567 (TA>TAA) on suojaava vaikutus NAFLD:n etenemistä vastaan. Sille on ominaista proteiinin toiminnan menetys, joka suojaa krooniselta maksavauriolta ja lieventää taudin etenemistä, vaikka kuinka suojaava vaikutus ilmenee, on vielä tutkittavana.

Taudin monitekijäisen etiologian vuoksi, tarpeesta suorittaa kohdennettu seuranta altistuneilla geneettisillä koehenkilöillä ja estääkseen NALFD:n etenemisen kohti vakavia patologisia muotoja, joille on ominaista lisääntynyt kuolleisuus, tähän tutkimukseen otetaan mukaan 316 henkilöä.

He jaetaan seuraavasti: italialaiset valkoihoiset, yli 18- ja <70-vuotiaat, joilla on ei-kirroosi NAFLD ja PNPLA3 I148M -variantin kantajat, ja 158 italialaista valkoihoista henkilöä, jotka ovat iältään > 18 ja <70 vuotta, joilla ei ole kirroosia. NAFLD ja villityypin alleelin kantajat.

Seuraavat poissulkemiskriteerit huomioidaan: minkä tahansa tyyppinen pahanlaatuinen sairaus viimeisen 5 vuoden aikana, minkä tahansa tyyppinen tulehdus- tai autoimmuunisairaus, systeemiseen käyttöön tarkoitetut kortikosteroidit, minkä tahansa tyyppiset lääkkeet, jotka voivat vaikuttaa ruumiinpainoon tai kehon koostumukseen, munuaisten vajaatoiminta (GFR < 90 ml/min), sydämen vajaatoiminta (NYHA-luokat II-IV), mikä tahansa maksasairaus NAFLD:n sijaan, liiallinen alkoholinkäyttö (> 140 g/viikko miehillä ja 70 g/viikko naisilla), osallistuminen painonpudotukseen ohjelma viimeisten 3 kuukauden aikana, sappisuolat, kolestyramiini viimeisten 6 kuukauden aikana ennen ilmoittautumista, edellinen kolekystektomia, sappirakon sairaus.

Perifeeristä verta otetaan hemaattisten lipidien (kokonaiskolesteroli ja -fraktiot, triglyseridit), veren LAL-aktiivisuuden mittaamiseksi, geneettisen analyysin suorittamiseksi ja lopuksi verihiutaleiden lipaasiaktiivisuuden arvioimiseksi.

Maksan elastografia tehdään myös 100 potilaalle PNPLA3-variantin läsnäolon/puuttumisen mukaan, jotta voidaan punnita geneettistä taipumusta NAFLD:n kehittymiseen tai etenemiseen. Lopuksi koehenkilöille, joiden lipaasiaktiivisuus on 30 % normaalia alhaisempi. arvo (0,88 ± 0,38 (keskiarvo ± SD), tutkitaan LIPA-promoottorin metylaatiota.