Actividad de la lipasa ácida lisosomal en la enfermedad del hígado graso no alcohólico (NAFLD LAL)

La enfermedad del hígado graso no alcohólico (EHGNA) es una enfermedad multifactorial que afecta a una cuarta parte de la población mundial. La acumulación patológica de grasa en los hepatocitos es el primer golpe y se debe a la alteración de la lipogénesis hepática y extrahepática, la lipólisis y la lipofagia de las grandes gotas de lípidos.

La lipofagia juega un papel clave en la aparición de NAFLD, en los autolisosomas, pequeñas gotas de grasa son catabolizadas por la enzima Lysosomal Acid Lipase (LAL) que hidroliza los ésteres de colesterol y los triglicéridos formando colesterol y ácidos grasos libres.

Nuestro grupo de investigación demostró que, los sujetos afectos de EHGNA, presentan una actividad enzimática reducida, ya sea en comparación con pacientes con enfermedad hepática crónica de diferente etiología, pero estadificación comparable, ya sea en comparación con sujetos control sanos.

Los leucocitos son el sitio principal de actividad enzimática en la sangre, sin embargo, nuestro grupo de investigación ha demostrado que también se puede detectar dentro de las plaquetas, demostrando cómo la actividad LAL se puede intercambiar entre células.

Además, nuestro grupo ha demostrado, por primera vez, cómo se reduce la actividad enzimática intracelular, independientemente del recuento de plaquetas y leucocitos y de forma progresiva desde la enfermedad hepática crónica hasta la cirrosis.

Entre los factores que contribuyen al metabolismo lipídico alterado, se debe contar la predisposición genética a la acumulación de grasa hepática. Están involucradas varias variantes de genes que codifican proteínas implicadas en la digestión o almacenamiento de grasas.

En este estudio se consideraron: fosfolipasa tipo patatina que contiene el dominio 3 (PNPLA3), transmembrana 6 superfamilia 2 (TM6SF2) y 17β-hidroxiesteroide deshidrogenasa tipo 13 (HSD17B13).

La variante rs738409 (C>G, p.I148M) del gen PNPLA3 consiste en una proteína en la que el sitio catalítico no es del todo accesible al sustrato que, en consecuencia, se acumula en el sitio de almacenamiento.

Esta variante se encuentra comúnmente en sujetos NAFLD y se ha informado ampliamente cómo los portadores de la variante progresan más rápido hacia la enfermedad grave (esteatohepatitis) que los sujetos de tipo salvaje.

El gen TM6SF2 codifica un transportador de membrana involucrado en el movimiento de los triglicéridos, la variante rs58542926 (C> T E167K) se ha asociado con una mayor predisposición a la fibrosis hepática en sujetos con NAFLD. Es probable que esto se deba a la pérdida de la función proteica que da como resultado la retención hepática de triglicéridos y colesterol.

A diferencia de PNPLA3 y TM6SF2, la variante rs72613567 (TA> TAA) del gen HSD17B13 tiene un efecto protector contra la progresión de NAFLD. Se caracteriza por una pérdida de función de la proteína que protege contra el daño hepático crónico y mitiga la progresión de la enfermedad, aunque aún se está estudiando cómo se produce el efecto protector.

Debido a la etiología multifactorial de la enfermedad, a la necesidad de realizar una vigilancia dirigida en sujetos genéticos predispuestos y, con el fin de evitar la progresión de la NALFD hacia formas patológicas graves caracterizadas por un aumento de la mortalidad, en este estudio se incluirán 316 sujetos.

Se dividirán de la siguiente manera: caucásicos italianos, mayores de 18 años y <70 años, con NAFLD no cirróticos y portadores de la variante PNPLA3 I148M, y 158 sujetos caucásicos italianos, mayores de 18 años y <70 años, con pacientes no cirróticos NAFLD y portadores del alelo de tipo salvaje.

Se considerarán los siguientes criterios de exclusión: cualquier tipo de enfermedad maligna en los últimos 5 años, cualquier tipo de enfermedad inflamatoria o autoinmune, corticoides de uso sistémico, cualquier tipo de fármaco que pueda afectar el peso corporal o la composición corporal, insuficiencia renal (TFG < 90 ml/min), insuficiencia cardíaca (clases II-IV de la NYHA), cualquier tipo de enfermedad hepática en lugar de EHGNA, consumo excesivo de alcohol (> 140 g/semana para hombres y 70 g/semana para mujeres), participación en una reducción de peso programa en los últimos 3 meses, sales biliares, colestiramina en los últimos 6 meses antes de la inscripción, colecistectomía previa, enfermedad de la vesícula biliar.

Se extraerá sangre periférica para medir los lípidos hemáticos (colesterol total y fracciones, triglicéridos), la actividad LAL en sangre total, para realizar análisis genéticos y finalmente para evaluar la actividad de la lipasa en las plaquetas.

También se realizará elastografía hepática, en 100 pacientes, según la presencia/ausencia de la variante PNPLA3, con el fin de sopesar la predisposición genética al desarrollo o progresión de EHGNA. Finalmente, en sujetos que presenten una actividad de la lipasa un 30% inferior a la normal (0,88 ± 0,38 (media ± SD), se estudiará la metilación del promotor LIPA.