Aktivität der lysosomalen sauren Lipase bei nichtalkoholischer Fettlebererkrankung (NAFLD LAL)

Die nichtalkoholische Fettlebererkrankung (NAFLD) ist eine multifaktorielle Erkrankung, von der ein Viertel der Weltbevölkerung betroffen ist. Die pathologische Ansammlung von Fett in den Hepatozyten ist der erste Schlag und ist auf eine veränderte hepatische und extrahepatische Lipogenese, Lipolyse und Lipophagie der großen Lipidtröpfchen zurückzuführen.

Die Lipophagie spielt eine Schlüsselrolle bei der Entstehung von NAFLD, in den Autolysosomen werden kleine Fetttröpfchen durch das Enzym Lysosomal Acid Lipase (LAL) katabolisiert, das Cholesterinester und Triglyceride hydrolysiert und Cholesterin und freie Fettsäuren bildet.

Unsere Forschungsgruppe zeigte, dass von NAFLD betroffene Probanden entweder im Vergleich zu Patienten mit chronischer Lebererkrankung anderer Ätiologie, aber vergleichbarem Staging, entweder im Vergleich zu gesunden Kontrollpersonen eine reduzierte enzymatische Aktivität aufweisen.

Leukozyten sind der Hauptort der enzymatischen Aktivität im Blut, unsere Forschungsgruppe hat jedoch gezeigt, dass sie auch innerhalb der Blutplättchen nachgewiesen werden kann, was zeigt, wie die LAL-Aktivität zwischen Zellen ausgetauscht werden kann.

Darüber hinaus hat unsere Gruppe erstmals gezeigt, wie die intrazelluläre enzymatische Aktivität unabhängig von der Thrombozyten- und Leukozytenzahl und fortschreitend von einer chronischen Lebererkrankung bis hin zur Zirrhose reduziert wird.

Zu den Faktoren, die zu einem veränderten Fettstoffwechsel beitragen, muss die genetische Veranlagung zur Akkumulation von Leberfett gezählt werden. Mehrere Varianten von Genen, die Proteine ​​codieren, die an der Verdauung oder Speicherung von Fetten beteiligt sind, sind beteiligt.

In dieser Studie wurden berücksichtigt: Patatin-ähnliche Phospholipase-Domäne enthaltend 3 (PNPLA3), Transmembrane 6 Superfamily 2 (TM6SF2) und 17β-Hydroxysteroid-Dehydrogenase Typ 13 (HSD17B13).

Die rs738409-Variante (C> G, p.I148M) des PNPLA3-Gens besteht aus einem Protein, bei dem die katalytische Stelle nicht vollständig für das Substrat zugänglich ist, das sich folglich an der Speicherstelle anreichert.

Diese Variante wird häufig bei NAFLD-Patienten gefunden und es wurde ausführlich berichtet, dass die Variantenträger schneller zu einer schweren Erkrankung (Steatohepatitis) fortschreiten als Wildtyp-Patienten.

Das TM6SF2-Gen codiert einen Membrantransporter, der an der Bewegung der Triglyceride beteiligt ist, die Variante rs58542926 (C> T E167K) wurde mit einer erhöhten Prädisposition für Leberfibrose bei NAFLD-Patienten in Verbindung gebracht. Dies ist wahrscheinlich auf den Verlust der Proteinfunktion zurückzuführen, der zu einer hepatischen Retention von Triglyceriden und Cholesterin führt.

Im Gegensatz zu PNPLA3 und TM6SF2 hat die rs72613567 (TA>TAA)-Variante des HSD17B13-Gens eine schützende Wirkung gegen die NAFLD-Progression. Es ist durch einen Protein-Funktionsverlust gekennzeichnet, der vor chronischen Leberschäden schützt und das Fortschreiten der Krankheit abmildert, obwohl noch untersucht wird, wie die Schutzwirkung zustande kommt.

Aufgrund der multifaktoriellen Ätiologie der Krankheit, der Notwendigkeit einer gezielten Überwachung genetisch prädisponierter Probanden und zur Verhinderung des Fortschreitens der NALFD zu schweren pathologischen Formen, die durch eine erhöhte Sterblichkeit gekennzeichnet sind, werden 316 Probanden in diese Studie aufgenommen.

Sie werden wie folgt aufgeteilt: Italienische Kaukasier im Alter von > 18 und < 70 Jahren mit NAFLD ohne Zirrhose und Träger der PNPLA3 I148M-Variante und 158 italienische Kaukasier im Alter von > 18 und < 70 Jahren mit Nicht-Zirrhose NAFLD und Träger des Wildtypallels.

Die folgenden Ausschlusskriterien werden berücksichtigt: jede Art von bösartiger Erkrankung in den letzten 5 Jahren, jede Art von entzündlicher oder Autoimmunerkrankung, Kortikosteroide zur systemischen Anwendung, jede Art von Arzneimittel, die das Körpergewicht oder die Körperzusammensetzung beeinflussen kann, Niereninsuffizienz (GFR < 90 ml/min), Herzinsuffizienz (NYHA-Klassen II-IV), jede Art von Lebererkrankung statt NAFLD, übermäßiger Alkoholkonsum (> 140 g/Woche bei Männern und 70 g/Woche bei Frauen), Teilnahme an einer Gewichtsreduktion Programm in den letzten 3 Monaten, Gallensalze, Cholestyramin in den letzten 6 Monaten vor der Einschreibung, frühere Cholezystektomie, Gallenblasenerkrankung.

Peripheres Blut wird abgenommen, um hämatische Lipide (Gesamtcholesterin und Fraktionen, Triglyceride), die Gesamtblut-LAL-Aktivität zu messen, eine genetische Analyse durchzuführen und schließlich die Lipaseaktivität in den Blutplättchen zu bewerten.

Bei 100 Patienten wird je nach Vorhandensein/Fehlen der PNPLA3-Variante auch eine hepatische Elastographie durchgeführt, um die genetische Prädisposition für die NAFLD-Entwicklung oder -Progression abzuwägen. Schließlich bei Probanden, die eine um 30 % niedrigere Lipaseaktivität als normal aufweisen Wert (0,88 ± 0,38 (Mittelwert ± SD) wird die Methylierung des LIPA-Promotors untersucht.