Attività della lipasi acida lisosomiale nella steatosi epatica non alcolica (NAFLD LAL)

La steatosi epatica non alcolica (NAFLD) è una malattia multifattoriale che colpisce un quarto della popolazione mondiale. L'accumulo patologico di grasso, negli epatociti, è il primo colpo ed è dovuto ad alterata lipogenesi epatica ed extraepatica, lipolisi e lipofagia delle grosse goccioline lipidiche.

La lipofagia svolge un ruolo chiave nell'insorgenza della NAFLD, negli autolisosomi, piccole goccioline di grasso vengono catabolizzate dall'enzima Lysosomal Acid Lipase (LAL) che idrolizza esteri di colesterolo e trigliceridi formando colesterolo e acidi grassi liberi.

Il nostro gruppo di ricerca ha dimostrato che i soggetti affetti da NAFLD presentano un'attività enzimatica ridotta sia rispetto a pazienti con malattia epatica cronica di diversa eziologia, ma stadiazione comparabile, sia rispetto a soggetti sani di controllo.

I leucociti sono la sede principale dell'attività enzimatica nel sangue, tuttavia, il nostro gruppo di ricerca ha dimostrato che può essere rilevata anche all'interno delle piastrine, dimostrando come l'attività LAL possa essere scambiata tra le cellule.

Inoltre, il nostro gruppo ha dimostrato, per la prima volta, come l'attività enzimatica intracellulare si riduca, indipendentemente dalla conta piastrinica e leucocitaria e progressivamente dalla malattia epatica cronica fino alla cirrosi.

Tra i fattori che contribuiscono all'alterato metabolismo lipidico va annoverata la predisposizione genetica all'accumulo di grasso epatico. Sono coinvolte diverse varianti di geni che codificano per le proteine ​​implicate nella digestione o nell'immagazzinamento dei grassi.

In questo studio sono stati considerati: patatin-like phospholipase domain-containing 3 (PNPLA3), Transmembrane 6 superfamily 2 (TM6SF2) e 17β-Hydroxysteroid dehydrogenase type 13 (HSD17B13).

La variante rs738409 (C>G, p.I148M) del gene PNPLA3 è costituita da una proteina in cui il sito catalitico non è interamente accessibile al substrato che, di conseguenza, si accumula nel sito di stoccaggio.

Questa variante si trova comunemente nei soggetti NAFLD ed è stato ampiamente riportato come i portatori della variante progrediscano più rapidamente verso la malattia grave (steatoepatite) rispetto ai soggetti wild type.

Il gene TM6SF2 codifica per un trasportatore di membrana coinvolto nel movimento dei trigliceridi, la variante rs58542926 (C>T E167K) è stata associata a una maggiore predisposizione alla fibrosi epatica nei soggetti NAFLD. Ciò è probabilmente dovuto alla perdita della funzione proteica con conseguente ritenzione epatica di trigliceridi e colesterolo.

A differenza di PNPLA3 e TM6SF2, la variante rs72613567 (TA> TAA) del gene HSD17B13 ha un effetto protettivo contro la progressione della NAFLD. È caratterizzato da una perdita di funzione proteica che protegge dal danno epatico cronico e mitiga la progressione della malattia, anche se il modo in cui si verifica l'effetto protettivo è ancora in fase di studio.

A causa dell'eziologia multifattoriale della malattia, della necessità di effettuare una sorveglianza mirata nei soggetti geneticamente predisposti e, al fine di prevenire la progressione della NALFD verso forme patologiche gravi caratterizzate da un aumento della mortalità, in questo studio saranno arruolati 316 soggetti.

Saranno così suddivisi: Italiani caucasici, di età > 18 e <70 anni, con NAFLD non cirrotica e portatori della variante PNPLA3 I148M, e, 158 soggetti italiani caucasici, di età > 18 e <70 anni, con non cirrotica NAFLD e portatori dell'allele wild type.

Verranno considerati i seguenti criteri di esclusione: qualsiasi tipo di malattia maligna negli ultimi 5 anni, qualsiasi tipo di malattia infiammatoria o autoimmune, corticosteroidi per uso sistemico, qualsiasi tipo di farmaco che possa influenzare il peso corporeo o la composizione corporea, insufficienza renale (GFR < 90 ml/min), insufficienza cardiaca (classi NYHA II-IV), qualsiasi tipo di malattia epatica piuttosto che NAFLD, consumo eccessivo di alcol (> 140 g/settimana per gli uomini e 70 g/settimana per le donne), partecipazione a una riduzione del peso programma negli ultimi 3 mesi, sali biliari, colestiramina negli ultimi 6 mesi prima dell'arruolamento, precedente colecistectomia, malattia della colecisti.

Il sangue periferico sarà prelevato per misurare i lipidi ematici (colesterolo totale e frazioni, trigliceridi), l'attività LAL totale del sangue, per eseguire analisi genetiche e infine per valutare l'attività della lipasi nelle piastrine.

Verrà inoltre eseguita, in 100 pazienti, l'elastografia epatica in base alla presenza/assenza della variante PNPLA3, al fine di valutare la predisposizione genetica allo sviluppo o alla progressione della NAFLD Infine, nei soggetti che presentano un'attività della lipasi inferiore del 30% rispetto al normale valore (0.88 ± 0.38 (media ± DS), verrà studiata la metilazione del promotore LIPA.