Aktywność kwaśnej lipazy lizosomalnej w niealkoholowej stłuszczeniowej chorobie wątroby (NAFLD LAL)

Niealkoholowa stłuszczeniowa choroba wątroby (NAFLD) jest wieloczynnikową chorobą dotykającą jedną czwartą światowej populacji. Patologiczne gromadzenie się tłuszczu w hepatocytach jest pierwszym uderzeniem i jest spowodowane zmienioną wątrobową i pozawątrobową lipogenezą, lipolizą i lipofagią dużych kropelek lipidów.

Kluczową rolę w powstawaniu NAFLD odgrywa lipofagia, w autolizosomach małe kropelki tłuszczu są katabolizowane przez enzym lizosomalnej lipazy kwasowej (LAL), który hydrolizuje estry cholesterolu i triglicerydy tworząc cholesterol i wolne kwasy tłuszczowe.

Nasza grupa badawcza wykazała, że ​​osoby dotknięte NAFLD wykazują obniżoną aktywność enzymatyczną w porównaniu z pacjentami z przewlekłą chorobą wątroby o różnej etiologii, ale w porównywalnym stopniu zaawansowania, w porównaniu ze zdrowymi osobami z grupy kontrolnej.

Leukocyty są głównym miejscem aktywności enzymatycznej we krwi, jednak nasza grupa badawcza wykazała, że ​​można ją wykryć również w płytkach krwi, demonstrując, w jaki sposób aktywność LAL może być wymieniana między komórkami.

Co więcej, nasza grupa wykazała po raz pierwszy, w jaki sposób wewnątrzkomórkowa aktywność enzymatyczna jest zmniejszana, niezależnie od liczby płytek krwi i leukocytów oraz stopniowo od przewlekłej choroby wątroby do marskości wątroby.

Wśród czynników wpływających na zaburzony metabolizm lipidów należy wymienić genetyczną predyspozycję do odkładania się tłuszczu w wątrobie. Zaangażowanych jest kilka wariantów genów, które kodują białka zaangażowane w trawienie lub magazynowanie tłuszczów.

W tym badaniu wzięto pod uwagę: patatynopodobną domenę fosfolipazy zawierającą 3 (PNPLA3), nadrodzinę transbłonową 6 2 (TM6SF2) i dehydrogenazę 17β-hydroksysteroidową typu 13 (HSD17B13).

Wariant rs738409 (C>G, p.I148M) genu PNPLA3 składa się z białka, w którym miejsce katalityczne nie jest całkowicie dostępne dla substratu, który w konsekwencji gromadzi się w miejscu magazynowania.

Ten wariant jest powszechnie spotykany u osób z NAFLD i szeroko donoszono, że nosiciele wariantu postępują szybciej w kierunku ciężkiej choroby (stłuszczeniowe zapalenie wątroby) niż u osobników typu dzikiego.

Gen TM6SF2 koduje transporter błonowy zaangażowany w ruch trójglicerydów, wariant rs58542926 (C> T E167K) został powiązany ze zwiększoną predyspozycją do zwłóknienia wątroby u pacjentów z NAFLD. Jest to prawdopodobnie spowodowane utratą funkcji białka, co skutkuje zatrzymaniem w wątrobie trójglicerydów i cholesterolu.

W przeciwieństwie do PNPLA3 i TM6SF2, wariant rs72613567 (TA> TAA) genu HSD17B13 ma działanie ochronne przed progresją NAFLD. Charakteryzuje się utratą funkcji białka, która chroni przed przewlekłym uszkodzeniem wątroby i łagodzi postęp choroby, chociaż sposób występowania efektu ochronnego jest nadal badany.

Ze względu na wieloczynnikową etiologię choroby, konieczność prowadzenia ukierunkowanego nadzoru u osób predysponowanych genetycznie oraz w celu zapobieżenia progresji NALFD w kierunku ciężkich postaci patologicznych charakteryzujących się zwiększoną śmiertelnością, do badania zostanie włączonych 316 osób.

Zostaną oni podzieleni w następujący sposób: osoby rasy włoskiej rasy kaukaskiej, w wieku > 18 i <70 lat, z NAFLD bez marskości wątroby i nosiciele wariantu PNPLA3 I148M oraz 158 osób rasy włoskiej rasy kaukaskiej, w wieku od > 18 do <70 lat, z chorobą bez marskości wątroby NAFLD i nosiciele allelu typu dzikiego.

Następujące kryteria wykluczenia będą brane pod uwagę: jakikolwiek typ choroby nowotworowej w ciągu ostatnich 5 lat, każdy rodzaj choroby zapalnej lub autoimmunologicznej, kortykosteroidy do stosowania ogólnoustrojowego, każdy rodzaj leku, który może wpływać na masę ciała lub skład ciała, niewydolność nerek (GFR < 90 ml/min), niewydolność serca (klasa II-IV wg NYHA), jakikolwiek rodzaj choroby wątroby raczej niż NAFLD, nadmierne spożycie alkoholu (>140 g/tydzień dla mężczyzn i 70 g/tydzień dla kobiet), udział w redukcji masy ciała programu w ciągu ostatnich 3 miesięcy, sole kwasów żółciowych, cholestyramina w ciągu ostatnich 6 miesięcy przed włączeniem, przebyta cholecystektomia, choroba pęcherzyka żółciowego.

Krew obwodowa zostanie pobrana w celu oznaczenia lipidów hematycznych (cholesterolu całkowitego i jego frakcji, triglicerydów), całkowitej aktywności LAL we krwi, wykonania badań genetycznych iw końcu oceny aktywności lipazy w płytkach krwi.

Elastografia wątroby zostanie również wykonana u 100 pacjentów, w zależności od obecności/nieobecności wariantu PNPLA3, w celu rozważenia genetycznej predyspozycji do rozwoju lub progresji NAFLD. Ostatecznie u osób, u których aktywność lipazy jest o 30% niższa niż normalnie (0,88 ± 0,38 (średnia ± SD), badana będzie metylacja promotora LIPA.