Lysosomal syrelipaseaktivitet ved ikke-alkoholisk fedtleversygdom (NAFLD LAL)

Ikke-alkoholisk fedtleversygdom (NAFLD) er en multifaktoriel sygdom, der rammer en fjerdedel af verdens befolkning. Patologisk ophobning af fedt, ind i hepatocytterne, er det første hit og skyldes ændret hepatisk og ekstrahepatisk lipogenese, lipolyse og lipofagi af de store lipiddråber.

Lipofagi spiller en nøglerolle i starten af ​​NAFLD, i autolysosomer kataboliseres små dråber af fedt af Lysosomal Acid Lipase (LAL) enzym, som hydrolyserer kolesterolestere og triglycerider og danner kolesterol og frie fedtsyrer.

Vores forskningsgruppe viste, at forsøgspersoner, der er ramt af NAFLD, udviser en reduceret enzymatisk aktivitet enten sammenlignet med patienter med kronisk leversygdom af forskellig ætiologi, men sammenlignelig stadieinddeling, enten sammenlignet med raske kontrolpersoner.

Leukocytter er hovedstedet for enzymatisk aktivitet i blodet, men vores forskningsgruppe har vist, at det også kan påvises inde i blodpladerne, hvilket viser, hvordan LAL-aktiviteten kan udveksles mellem celler.

Desuden har vores gruppe for første gang vist, hvordan den intracellulære enzymatiske aktivitet reduceres, uafhængigt af antallet af blodplader og leukocytter og progressivt fra kronisk leversygdom op til skrumpelever.

Blandt faktorer, som bidrager til ændret lipidmetabolisme, skal den genetiske disposition for ophobning af leverfedt tælles. Flere varianter af gener, der koder for proteiner, der er involveret i fordøjelsen eller opbevaringen af ​​fedtstoffer, er involveret.

I denne undersøgelse blev overvejet: patatin-lignende phospholipase domæne-indeholdende 3 (PNPLA3), Transmembrane 6 superfamilie 2 (TM6SF2) og 17β-Hydroxysteroid dehydrogenase type 13 (HSD17B13).

rs738409-varianten (C> G, p.I148M) af PNPLA3-genet består af et protein, hvori det katalytiske sted ikke er fuldstændig tilgængeligt for substratet, som følgelig akkumuleres i opbevaringsstedet.

Denne variant findes almindeligvis hos NAFLD-patienter, og det er blevet rapporteret bredt, hvordan variant-bærerne udvikler sig hurtigere mod alvorlig sygdom (steatohepatitis) end vildtype-patienter.

TM6SF2-genet koder for en membrantransportør involveret i triglyceridbevægelsen, rs58542926 (C>T E167K)-varianten er blevet forbundet med en øget disposition for leverfibrose hos NAFLD-personer. Dette skyldes sandsynligvis tab af proteinfunktion, hvilket resulterer i hepatisk tilbageholdelse af triglycerider og kolesterol.

I modsætning til PNPLA3 og TM6SF2 har rs72613567 (TA>TAA)-varianten af ​​HSD17B13-genet en beskyttende virkning mod NAFLD-progression. Det er kendetegnet ved et proteintab af funktion, der beskytter mod kronisk leverskade og dæmper udviklingen af ​​sygdommen, selvom hvordan den beskyttende virkning opstår, er stadig under undersøgelse.

På grund af sygdommens multifaktorielle ætiologi, behovet for at udføre en målrettet overvågning af prædisponerede genetiske forsøgspersoner og for at forhindre NALFD-progression mod alvorlige patologiske former karakteriseret ved en øget dødelighed, vil 316 forsøgspersoner blive indskrevet i denne undersøgelse.

De vil blive opdelt som følger: italienske kaukasiere, i alderen > 18 og <70 år, med ikke-cirrhotisk NAFLD og bærere af PNPLA3 I148M-varianten, og 158 italienske kaukasiske forsøgspersoner, i alderen > 18 og <70 år, med ikke-cirrose NAFLD og bærere af vildtype-allelen.

Følgende eksklusionskriterier vil blive taget i betragtning: enhver form for malign sygdom inden for de seneste 5 år, enhver form for inflammatorisk eller autoimmun sygdom, kortikosteroider til systemisk brug, enhver form for lægemiddel, der kan påvirke kropsvægt eller kropssammensætning, nyreinsufficiens (GFR < 90 ml/min), hjertesvigt (NYHA klasse II-IV), enhver form for leversygdom frem for NAFLD, overdreven alkoholindtagelse (> 140 g/uge for mænd og 70 g/uge for kvinder), deltagelse i en vægtreduktion program inden for de seneste 3 måneder, galdesalte, kolestyramin i de sidste 6 måneder før indskrivning, tidligere kolecystektomi, galdeblæresygdom.

Perifert blod vil blive udtaget for at måle hæmatiske lipider (total kolesterol og fraktioner, triglycerider), total blod-LAL-aktivitet, for at udføre genetisk analyse og endelig for at evaluere lipaseaktivitet i blodpladerne.

Leverelastografi vil også blive udført hos 100 patienter, afhængigt af tilstedeværelsen/fraværet af PNPLA3-varianten, for at afveje den genetiske disposition for NAFLD-udvikling eller -progression. Endelig hos forsøgspersoner, der har en lipaseaktivitet 30 % lavere end den normale værdi (0,88 ± 0,38 (middel ± SD), vil methyleringen af ​​LIPA-promotoren blive undersøgt.