Aktivita lysozomální kyselé lipázy u nealkoholických ztučnělých jaterních onemocnění (NAFLD LAL)

Nealkoholické ztučnění jater (NAFLD) je multifaktoriální onemocnění postihující čtvrtinu světové populace. Patologická akumulace tuku v hepatocytech je prvním zásahem a je způsobena změněnou jaterní a extrahepatální lipogenezí, lipolýzou a lipofagií velkých lipidových kapének.

Lipofagie hraje klíčovou roli v nástupu NAFLD, v autolysozomech jsou malé kapičky tuku katabolizovány enzymem lysosomální kyselou lipázou (LAL), který hydrolyzuje estery cholesterolu a triglyceridy za vzniku cholesterolu a volných mastných kyselin.

Naše výzkumná skupina prokázala, že subjekty postižené NAFLD vykazují sníženou enzymatickou aktivitu buď ve srovnání s pacienty s chronickým onemocněním jater různé etiologie, ale srovnatelným stagingem, a to buď ve srovnání se zdravými kontrolními subjekty.

Leukocyty jsou hlavním místem enzymatické aktivity v krvi, avšak naše výzkumná skupina ukázala, že ji lze detekovat také uvnitř krevních destiček, což ukazuje, jak může být aktivita LAL vyměňována mezi buňkami.

Naše skupina navíc poprvé ukázala, jak se snižuje intracelulární enzymatická aktivita nezávisle na počtu krevních destiček a leukocytů a progresivně od chronického onemocnění jater až po cirhózu.

Mezi faktory, které přispívají ke změně metabolismu lipidů, je třeba počítat genetickou predispozici k hromadění tuku v játrech. Je zapojeno několik variant genů, které kódují proteiny zapojené do trávení nebo ukládání tuků.

V této studii byly uvažovány: patatinu podobná fosfolipázová doména obsahující 3 (PNPLA3), transmembránová 6 superrodina 2 (TM6SF2) a 17β-hydroxysteroid dehydrogenáza typu 13 (HSD17B13).

Varianta rs738409 (C> G, p.I148M) genu PNPLA3 sestává z proteinu, ve kterém není katalytické místo zcela přístupné substrátu, který se následně hromadí v úložném místě.

Tato varianta se běžně vyskytuje u subjektů NAFLD a bylo široce hlášeno, jak variantní nosiči postupují rychleji k těžkému onemocnění (steatohepatitida) než subjekty divokého typu.

Gen TM6SF2 kóduje membránový transportér zapojený do pohybu triglyceridů, varianta rs58542926 (C> T E167K) je spojována se zvýšenou predispozicí k jaterní fibróze u subjektů s NAFLD. To je pravděpodobně způsobeno ztrátou funkce proteinu, která má za následek retenci triglyceridů a cholesterolu v játrech.

Na rozdíl od PNPLA3 a TM6SF2 má varianta rs72613567 (TA> TAA) genu HSD17B13 ochranný účinek proti progresi NAFLD. Je charakterizována ztrátou funkce proteinu, která chrání před chronickým poškozením jater a zmírňuje progresi onemocnění, ačkoli způsob, jakým dochází k ochrannému účinku, je stále ve studiu.

Vzhledem k multifaktoriální etiologii onemocnění, potřebě provádět cílený dohled u predisponovaných genetických subjektů a za účelem prevence progrese NALFD do závažných patologických forem charakterizovaných zvýšenou mortalitou bude do této studie zařazeno 316 subjektů.

Budou rozděleni následovně: Italští bělochi ve věku > 18 a < 70 let s necirhotickým NAFLD a nositeli varianty PNPLA3 I148M a 158 italských bělochů ve věku > 18 a < 70 let s necirhózou NAFLD a nositelé alely divokého typu.

Budou zvážena následující vylučovací kritéria: jakýkoli typ maligního onemocnění za posledních 5 let, jakýkoli typ zánětlivého nebo autoimunitního onemocnění, kortikosteroidy pro systémové použití, jakýkoli typ léku, který může ovlivnit tělesnou hmotnost nebo složení těla, nedostatečnost ledvin (GFR < 90 ml/min), srdeční selhání (třídy NYHA II-IV), jakýkoli typ onemocnění jater spíše než NAFLD, nadměrný příjem alkoholu (> 140 g/týden u mužů a 70 g/týden u žen), účast na redukci hmotnosti programu v posledních 3 měsících, žlučové soli, cholestyramin v posledních 6 měsících před zařazením, předchozí cholecystektomie, onemocnění žlučníku.

Periferní krev bude odebrána za účelem měření hematických lipidů (celkový cholesterol a frakce, triglyceridy), celkové krevní LAL aktivity, provedení genetické analýzy a nakonec vyhodnocení lipázové aktivity v krevních destičkách.

U 100 pacientů bude také provedena jaterní elastografie podle přítomnosti/nepřítomnosti varianty PNPLA3, aby se zhodnotila genetická predispozice k rozvoji nebo progresi NAFLD Konečně u jedinců, kteří vykazují aktivitu lipázy o 30 % nižší než je normální (0,88 ± 0,38 (průměr ± SD), bude studována methylace promotoru LIPA.