Активность лизосомальной кислой липазы при неалкогольной жировой болезни печени (NAFLD LAL)

Неалкогольная жировая болезнь печени (НАЖБП) — многофакторное заболевание, поражающее четверть населения мира. Патологическое накопление жира в гепатоцитах является первым ударом и связано с измененным печеночным и внепеченочным липогенезом, липолизом и липофагией крупных липидных капель.

Липофагия играет ключевую роль в возникновении НАЖБП, в аутолизосомах небольшие капли жира катаболизируются ферментом лизосомальной кислой липазой (LAL), который гидролизует сложные эфиры холестерина и триглицериды с образованием холестерина и свободных жирных кислот.

Наша исследовательская группа продемонстрировала, что у субъектов, страдающих НАЖБП, наблюдается пониженная ферментативная активность либо по сравнению с пациентами с хроническим заболеванием печени другой этиологии, но сопоставимой стадии, либо по сравнению со здоровыми субъектами контроля.

Лейкоциты являются основным местом ферментативной активности в крови, однако наша исследовательская группа показала, что она также может быть обнаружена внутри тромбоцитов, демонстрируя, как активность ЛАЛ может передаваться между клетками.

Кроме того, наша группа впервые показала, как внутриклеточная ферментативная активность снижается независимо от количества тромбоцитов и лейкоцитов и прогрессивно от хронического заболевания печени до цирроза.

К факторам, способствующим изменению липидного обмена, следует отнести генетическую предрасположенность к накоплению печеночного жира. Задействовано несколько вариантов генов, которые кодируют белки, участвующие в переваривании или хранении жиров.

В этом исследовании рассматривались: пататин-подобная фосфолипаза, содержащая домен 3 (PNPLA3), трансмембранное суперсемейство 6 2 (TM6SF2) и 17β-гидроксистероиддегидрогеназа типа 13 (HSD17B13).

Вариант rs738409 (C>G, p.I148M) гена PNPLA3 состоит из белка, в котором каталитический центр не полностью доступен для субстрата, который, следовательно, накапливается в месте хранения.

Этот вариант обычно встречается у субъектов с НАЖБП, и широко сообщалось, что носители варианта быстрее прогрессируют до тяжелого заболевания (стеатогепатита), чем субъекты дикого типа.

Ген TM6SF2 кодирует мембранный переносчик, участвующий в перемещении триглицеридов, вариант rs58542926 (C> T E167K) связан с повышенной предрасположенностью к фиброзу печени у пациентов с НАЖБП. Вероятно, это связано с потерей функции белка, что приводит к задержке в печени триглицеридов и холестерина.

В отличие от PNPLA3 и TM6SF2 вариант rs72613567 (TA>TAA) гена HSD17B13 обладает защитным действием против прогрессирования НАЖБП. Он характеризуется потерей функции белка, который защищает от хронического повреждения печени и замедляет прогрессирование заболевания, хотя то, как возникает защитный эффект, все еще изучается.

В связи с мультифакторной этиологией заболевания, необходимостью проведения целенаправленного наблюдения за генетически предрасположенными субъектами и с целью предупреждения прогрессирования НАЛЛЗ в сторону тяжелых патологических форм, характеризующихся повышенной смертностью, в данное исследование будет включено 316 человек.

Они будут разделены следующим образом: итальянцы европеоидной расы в возрасте> 18 и <70 лет с нецирротической НАЖБП и носителями варианта PNPLA3 I148M и 158 итальянских европеоидов в возрасте> 18 и <70 лет с нецирротической НАЖБП и носители аллеля дикого типа.

Будут рассмотрены следующие критерии исключения: любой тип злокачественного заболевания за последние 5 лет, любой тип воспалительного или аутоиммунного заболевания, кортикостероиды для системного применения, любой тип лекарств, которые могут повлиять на массу тела или состав тела, почечная недостаточность (СКФ < 90 мл/мин), сердечная недостаточность (II-IV классы по NYHA), любое заболевание печени, кроме НАЖБП, избыточное употребление алкоголя (>140 г/нед для мужчин и 70 г/нед для женщин), участие в программе снижения веса программа за последние 3 месяца, соли желчных кислот, холестирамин за последние 6 месяцев до зачисления, предшествующая холецистэктомия, заболевание желчного пузыря.

Периферическая кровь будет взята для измерения гематических липидов (общий холестерин и фракции, триглицериды), общей активности LAL в крови, для проведения генетического анализа и, наконец, для оценки активности липазы в тромбоцитах.

Эластография печени также будет выполнена у 100 пациентов в зависимости от наличия/отсутствия варианта PNPLA3, чтобы оценить генетическую предрасположенность к развитию или прогрессированию НАЖБП. Наконец, у субъектов, у которых активность липазы на 30% ниже нормы значение (0,88 ± 0,38 (среднее значение ± стандартное отклонение)), будет изучено метилирование промотора LIPA.