Nouvelles approches de cytométrie en flux pour améliorer la détection des cellules tumorales dans le CTCL

Les lymphomes cutanés primitifs sont un groupe de tumeurs dérivées de lymphocytes (principalement des lymphocytes T) qui affectent principalement la peau (comme le mycosis fongoïde, MF), bien qu'elles puissent se propager au-delà de la peau à des stades plus avancés - par exemple vers le sang - ou peut déjà être disséminée initialement, comme c'est le cas du syndrome de Sézary (SS), tumeur au comportement très agressif dès le début, qui par définition présente déjà une dissémination sanguine au moment du diagnostic. Ce sont des tumeurs très rares et difficiles à diagnostiquer car souvent les lésions cutanées ne peuvent être distinguées des processus bénins (ces derniers beaucoup plus fréquents que les lymphomes cutanés). Pour cette raison, il n'est pas rare que le diagnostic soit retardé, avec pour conséquence un impact négatif sur le pronostic du patient s'il s'agit d'une tumeur. Actuellement, le diagnostic de la dissémination sanguine (dont l'ampleur est également essentielle car elle impacte le pronostic d'autant plus que la charge tumorale dans le sang est élevée) est réalisée par cytométrie en flux, qui a remplacé la morphologie conventionnelle. Cependant, les techniques de cytométrie en flux actuellement utilisées dans la plupart des laboratoires cliniques ne sont pas standardisées entre les différents centres, et donc la comparabilité des résultats (même dans le temps, dans le même centre) et leur utilisation en milieu clinique sont difficiles.

Dans ce projet, nous HYPOTHESONS que l'application de nouvelles stratégies de « flux de nouvelle génération » proposées par le groupe collaboratif international EuroFlow (auquel appartient le demandeur de cette proposition) améliorerait la détection des cellules tumorales circulantes chez les patients atteints de lymphocytes T cutanés. lymphome, ce qui permettrait d'améliorer la prise en charge clinique des patients. Par conséquent, dans ce projet, nous visons comme OBJECTIF GÉNÉRAL d'appliquer des stratégies standardisées de cytométrie en flux de nouvelle génération développées par le Consortium EuroFlow pour la détection et la quantification rapides, spécifiques, sensibles et reproductibles des cellules tumorales chez les patients atteints de MF/SS, grâce à : i) l'application de procédures standardisées de coloration d'échantillons avec des panels d'anticorps conçus après des séries de tests précédentes, qui permettraient de distinguer les lymphocytes T tumoraux des lymphocytes T normaux (spécificité) ; ii) adapter la technique pour analyser un grand nombre de cellules, afin d'obtenir une sensibilité de détection élevée, également cruciale pour une surveillance plus précise de la maladie résiduelle dans le sang après le traitement avec les nouvelles thérapies disponibles dans les lymphomes cutanés à cellules T ; et iii) développement de stratégies d'analyse automatique des données cytométriques, afin que les résultats ne dépendent pas de l'expérience personnelle du cytométriste.

IMPACT. La disponibilité d'une nouvelle stratégie standardisée de cytométrie en flux pour la détection (et la quantification) sensible et spécifique des cellules tumorales circulantes dans le sang (et la peau) des patients atteints d'un lymphome cutané à cellules T fournira un outil essentiel pour soutenir le diagnostic dermo-hématologique, avec le possibilité de traduire en diagnostic de routine à très court terme après la fin du projet, pour son application dans les hôpitaux disposant d'un laboratoire de cytométrie/immunopathologie, dans le but de : i) Faire un diagnostic (différentiel) précoce et précis entre lymphome - lésion bénigne chez les patients présentant des lésions cutanées ; ii) Détection des cellules tumorales dans le sang avec une plus grande sensibilité que les méthodes conventionnelles, pour établir plus précisément la dissémination sanguine d'un lymphome cutané primitif à cellules T et pour évaluer la réponse aux traitements actuels de manière plus fiable et plus sensible