Nya flödescytometrimetoder för att förbättra upptäckten av tumörceller i CTCL

Primära kutana lymfom är en grupp tumörer som härrör från lymfocyter (mest T-lymfocyter) som främst påverkar huden (som mycosis fungoides, MF), även om de kan spridas utanför huden i mer avancerade stadier - till exempel till blodet - eller kan redan spridas initialt, vilket är fallet med Sézary syndrom (SS), en tumör med mycket aggressivt beteende från början, som per definition redan har blodspridning vid diagnos. De är mycket sällsynta tumörer och svåra att diagnostisera eftersom hudskadorna ofta inte kan skiljas från godartade processer (de senare mycket vanligare än kutana lymfom). Av denna anledning är det inte ovanligt att diagnosen blir försenad, med åtföljande negativ inverkan på patientens prognos om det är en tumör. För närvarande utförs diagnosen av blodspridning (mängden av den är också väsentlig eftersom den påverkar prognosen, ju värre desto högre tumörbelastning i blodet) genom flödescytometri, som har ersatt konventionell morfologi. Flödescytometriteknikerna som för närvarande används i de flesta kliniska laboratorier är dock inte standardiserade mellan olika centra, och därför är det svårt att jämföra resultaten (även över tid, i samma center) och deras användning i de kliniska miljöerna.

I det här projektet HYPOTESER vi att tillämpningen av nya "nästa generations flöde"-strategier som föreslagits av den internationella samarbetsgruppen EuroFlow (till vilken sökanden till detta förslag tillhör) skulle förbättra upptäckten av cirkulerande tumörceller hos patienter med kutan T-cell lymfom, vilket skulle göra det möjligt att förbättra den kliniska behandlingen av patienterna. Därför syftar vi i detta projekt som ett ALLMÄNT MÅL att tillämpa standardiserade strategier för nästa generations flödescytometri utvecklade av EuroFlow Consortium för snabb, specifik, känslig och reproducerbar detektion och kvantifiering av tumörceller hos patienter med MF/SS, genom: i) tillämpning av standardiserade provfärgningsprocedurer med antikroppspaneler utformade efter tidigare testomgångar, vilket skulle göra det möjligt att skilja tumör-T-lymfocyter från normala T-celler (specificitet); ii) anpassning av tekniken för att analysera ett stort antal celler, för att uppnå en hög detektionskänslighet, också avgörande för en mer exakt övervakning av kvarvarande sjukdom i blod efter behandling med de nya terapier som finns tillgängliga vid kutana T-cellslymfom; och iii) utveckling av automatiska analysstrategier av cytometridata, så att resultaten inte beror på cytometristens personliga erfarenhet.

PÅVERKAN. Tillgången till en ny standardiserad flödescytometristrategi för känslig och specifik detektion (och kvantifiering) av cirkulerande tumörceller i blod (och hud) hos patienter med kutant T-cellslymfom kommer att utgöra ett viktigt verktyg för att stödja dermohematologisk diagnos, med möjlighet att övergå till rutindiagnos på mycket kort sikt efter avslutat projekt, för dess tillämpning på sjukhus som har ett cytometri/immunopatologiskt laboratorium, med syftet att: i) ställa en tidig och korrekt (differentiell) diagnos mellan lymfom - benign lesion hos patienter med hudskador; ii) Detektera tumörceller i blod med större känslighet än konventionella metoder, för att mer exakt fastställa blodspridning av ett primärt kutant T-cellslymfom, och att bedöma svaret på aktuella behandlingar på ett mer tillförlitligt och känsligt sätt