Nye flowcytometriske tilnærminger for å forbedre deteksjonen av tumorceller i CTCL

Primære kutane lymfomer er en gruppe svulster avledet fra lymfocytter (for det meste T-lymfocytter) som primært påvirker huden (som mycosis fungoides, MF), selv om de kan spre seg utover huden i mer avanserte stadier - for eksempel til blodet - eller kan allerede spres i utgangspunktet, slik tilfellet er med Sézary syndrom (SS), en svulst med svært aggressiv oppførsel fra begynnelsen, som per definisjon allerede har blodspredning ved diagnose. De er svært sjeldne svulster og vanskelige å diagnostisere fordi hudlesjonene ofte ikke kan skilles fra benigne prosesser (sistnevnte mye mer vanlig enn kutane lymfomer). Av denne grunn er det ikke uvanlig at diagnosen blir forsinket, med påfølgende negativ innvirkning på pasientens prognose dersom det er en svulst. Foreløpig diagnostiseres blodspredning (hvis mengden også er avgjørende fordi den påvirker prognosen, jo verre jo høyere tumorbelastning i blodet) utføres av flowcytometri, som har erstattet konvensjonell morfologi. Strømningscytometriteknikkene som for tiden brukes i de fleste kliniske laboratorier er imidlertid ikke standardisert mellom forskjellige sentre, og derfor er sammenlignbarheten av resultatene (selv over tid, i samme senter) og deres bruk i kliniske omgivelser vanskelig.

I dette prosjektet HYPOTESER vi at anvendelsen av nye "neste generasjons flyt"-strategier foreslått av den internasjonale samarbeidsgruppen EuroFlow (som søkeren av dette forslaget tilhører) vil forbedre deteksjonen av sirkulerende tumorceller hos pasienter med kutan T-celle lymfom, som ville tillate å forbedre den kliniske behandlingen av pasientene. Derfor, i dette prosjektet, tar vi sikte på som et GENERELT MÅL å anvende standardiserte strategier for neste generasjons flowcytometri utviklet av EuroFlow Consortium for rask, spesifikk, sensitiv og reproduserbar påvisning og kvantifisering av tumorceller hos pasienter med MF/SS, gjennom: i) bruk av standardiserte prøvefargingsprosedyrer med antistoffpaneler designet etter tidligere testrunder, som ville tillate å skille tumor T-lymfocytter fra normale T-celler (spesifisitet); ii) å tilpasse teknikken for å analysere et stort antall celler, for å oppnå en høy deteksjonsfølsomhet, også avgjørende for en mer presis overvåking av gjenværende sykdom i blod etter behandling med de nye terapiene som er tilgjengelige i kutane T-celle lymfomer; og iii) utvikling av automatiske analysestrategier av cytometridata, slik at resultatene ikke avhenger av den personlige erfaringen til cytometristen.

INNVIRKNING. Tilgjengeligheten av en ny standardisert flowcytometristrategi for sensitiv og spesifikk påvisning (og kvantifisering) av sirkulerende tumorceller i blod (og hud) hos pasienter med kutant T-cellelymfom vil gi et viktig verktøy for å støtte dermo-hematologisk diagnose, med mulighet for å gå over til rutinediagnostikk på svært kort sikt etter ferdigstillelse av prosjektet, for bruk i sykehus som har et cytometri/immunopatologisk laboratorium, med mål om: i) Stille en tidlig og nøyaktig (differensial) diagnose mellom lymfom - godartet lesjon hos pasienter med hudlesjoner; ii) Påvisning av tumorceller i blod med større følsomhet enn konvensjonelle metoder, for mer presist å etablere blodspredning av et primært kutant T-cellelymfom, og vurdere responsen på aktuelle behandlinger på en mer pålitelig og sensitiv måte