Новые подходы к проточной цитометрии для улучшения обнаружения опухолевых клеток при CTCL

Первичные кожные лимфомы представляют собой группу опухолей, происходящих из лимфоцитов (в основном Т-лимфоцитов), которые в первую очередь поражают кожу (например, грибовидный микоз, МФ), хотя на более поздних стадиях они могут распространяться за пределы кожи - например, в кровь - или может уже изначально быть диссеминированным, как в случае с синдромом Сезари (СС), опухолью с очень агрессивным поведением с самого начала, которая по определению уже имеет диссеминацию крови при постановке диагноза. Это очень редкие опухоли, и их трудно диагностировать, поскольку зачастую поражения кожи неотличимы от доброкачественных процессов (последние встречаются гораздо чаще, чем кожные лимфомы). По этой причине нередко задержка с постановкой диагноза приводит к отрицательному влиянию на прогноз пациента, если это опухоль. В настоящее время диагностику диссеминации крови (объем которой также важен, поскольку он влияет на прогноз, тем хуже, чем выше опухолевая нагрузка в крови) проводится методом проточной цитометрии, пришедшей на смену традиционной морфологии. Однако методы проточной цитометрии, используемые в настоящее время в большинстве клинических лабораторий, не стандартизированы среди разных центров, в связи с чем сопоставимость результатов (даже во времени, в одном и том же центре) и их использование в клинических условиях затруднено.

В этом проекте мы ПРЕДПОЛАГАЕМ, что применение новых стратегий «потока следующего поколения», предложенных международной совместной группой EuroFlow (к которой принадлежит заявитель этого предложения), улучшит обнаружение циркулирующих опухолевых клеток у пациентов с кожными Т-клетками. лимфомы, что позволит улучшить клиническое ведение пациентов. Поэтому в этом проекте мы стремимся в качестве ОБЩЕЙ ЦЕЛИ применить стандартизированные стратегии проточной цитометрии нового поколения, разработанные Консорциумом EuroFlow, для быстрого, специфического, чувствительного и воспроизводимого обнаружения и количественного определения опухолевых клеток у пациентов с МФ/ССД. посредством: i) применения стандартизированных процедур окрашивания образцов с панелями антител, разработанных после предыдущих раундов тестирования, которые позволили бы отличать опухолевые Т-лимфоциты от нормальных Т-клеток (специфичность); ii) адаптация метода для анализа большого количества клеток с целью достижения высокой чувствительности обнаружения, что также имеет решающее значение для более точного мониторинга остаточных заболеваний в крови после лечения новыми методами лечения кожных Т-клеточных лимфом; и iii) разработка стратегий автоматического анализа данных цитометрии, чтобы результаты не зависели от личного опыта цитометриста.

ВЛИЯНИЕ. Доступность новой стандартизированной стратегии проточной цитометрии для чувствительного и специфического обнаружения (и количественной оценки) циркулирующих опухолевых клеток в крови (и коже) пациентов с кожной Т-клеточной лимфомой станет важным инструментом для поддержки дермо-гематологической диагностики, с возможность перевода на рутинную диагностику в очень короткий срок после завершения проекта для его применения в больницах, имеющих лабораторию цитометрии/иммунопатологии, с целью: i) Постановки раннего и точного (дифференциального) диагноза между лимфомой - доброкачественное поражение у пациентов с поражениями кожи; ii) Обнаружение опухолевых клеток в крови с большей чувствительностью, чем традиционные методы, для более точного установления распространения в крови первичной кожной Т-клеточной лимфомы и для более надежной и чувствительной оценки реакции на текущие методы лечения.