Neuartige Durchflusszytometrie-Ansätze zur Verbesserung der Erkennung von Tumorzellen bei CTCL

Primäre kutane Lymphome sind eine Gruppe von Tumoren, die von Lymphozyten (hauptsächlich T-Lymphozyten) ausgehen und hauptsächlich die Haut befallen (z. B. Mycosis fungoides, MF), obwohl sie sich in fortgeschritteneren Stadien über die Haut hinaus ausbreiten können – zum Beispiel ins Blut – oder kann bereits anfangs disseminiert sein, wie es beim Sézary-Syndrom (SS) der Fall ist, einem Tumor mit sehr aggressivem Verhalten von Anfang an, der per Definition bereits bei der Diagnose eine Blutdisseminierung aufweist. Es handelt sich um sehr seltene Tumoren, die schwer zu diagnostizieren sind, da die Hautläsionen oft nicht von gutartigen Prozessen zu unterscheiden sind (letztere sind weitaus häufiger als kutane Lymphome). Aus diesem Grund ist es nicht ungewöhnlich, dass sich die Diagnose verzögert und sich dies negativ auf die Prognose des Patienten auswirkt, wenn es sich um einen Tumor handelt. Derzeit wird die Diagnose der Blutausbreitung (deren Menge ebenfalls wichtig ist, da sie die Prognose beeinflusst, je schlimmer die Tumorlast im Blut ist) durch Durchflusszytometrie durchgeführt, die die herkömmliche Morphologie ersetzt hat. Allerdings sind die derzeit in den meisten klinischen Labors eingesetzten Durchflusszytometrietechniken nicht zwischen verschiedenen Zentren standardisiert, und daher ist die Vergleichbarkeit der Ergebnisse (auch über einen längeren Zeitraum, im selben Zentrum) und ihre Verwendung im klinischen Umfeld schwierig.

In diesem Projekt gehen wir davon aus, dass die Anwendung neuartiger „Next-Generation Flow“-Strategien, die von der internationalen Kooperationsgruppe EuroFlow (zu der der Antragsteller dieses Vorschlags gehört) vorgeschlagen wurden, die Erkennung zirkulierender Tumorzellen bei Patienten mit kutanen T-Zellen verbessern würde Lymphom, was eine Verbesserung der klinischen Behandlung der Patienten ermöglichen würde. Daher streben wir in diesem Projekt als ALLGEMEINES ZIEL an, standardisierte Strategien der Durchflusszytometrie der nächsten Generation anzuwenden, die vom EuroFlow-Konsortium für den schnellen, spezifischen, empfindlichen und reproduzierbaren Nachweis und die Quantifizierung von Tumorzellen bei Patienten mit MF/SS entwickelt wurden. durch: i) die Anwendung standardisierter Probenfärbeverfahren mit Antikörper-Panels, die nach früheren Testrunden entwickelt wurden und die Unterscheidung von Tumor-T-Lymphozyten von normalen T-Zellen ermöglichen würden (Spezifität); ii) Anpassung der Technik zur Analyse einer großen Anzahl von Zellen, um eine hohe Nachweisempfindlichkeit zu erreichen, die auch für eine genauere Überwachung der Resterkrankung im Blut nach der Behandlung mit den neuen Therapien, die bei kutanen T-Zell-Lymphomen verfügbar sind, von entscheidender Bedeutung ist; und iii) Entwicklung automatischer Analysestrategien für Zytometriedaten, sodass die Ergebnisse nicht von der persönlichen Erfahrung des Zytometriespezialisten abhängen.

AUSWIRKUNGEN. Die Verfügbarkeit einer neuen standardisierten Durchflusszytometrie-Strategie für den empfindlichen und spezifischen Nachweis (und die Quantifizierung) zirkulierender Tumorzellen im Blut (und der Haut) von Patienten mit kutanem T-Zell-Lymphom wird ein wesentliches Instrument zur Unterstützung der dermohämatologischen Diagnose darstellen Möglichkeit der Umsetzung in die Routinediagnose sehr kurzfristig nach Abschluss des Projekts für die Anwendung in Krankenhäusern, die über ein Labor für Zytometrie/Immunpathologie verfügen, mit dem Ziel: i) Eine frühe und genaue (Differenzial-)Diagnose zwischen Lymphomen und Lymphomen zu erstellen. gutartige Läsion bei Patienten mit Hautläsionen; ii) Nachweis von Tumorzellen im Blut mit höherer Empfindlichkeit als herkömmliche Methoden, um die Verbreitung eines primären kutanen T-Zell-Lymphoms im Blut genauer zu bestimmen und das Ansprechen auf aktuelle Behandlungen zuverlässiger und empfindlicher zu beurteilen