Nieuwe flow-cytometriebenaderingen om de detectie van tumorcellen in CTCL te verbeteren

Primaire cutane lymfomen zijn een groep tumoren afkomstig van lymfocyten (meestal T-lymfocyten) die voornamelijk de huid aantasten (zoals mycosis fungoides, MF), hoewel ze zich in meer gevorderde stadia buiten de huid kunnen verspreiden – bijvoorbeeld naar het bloed – of kan in eerste instantie al verspreid zijn, zoals het geval is bij het Sézary-syndroom (SS), een tumor die vanaf het begin zeer agressief gedrag vertoont en bij de diagnose per definitie al bloedverspreiding heeft. Het zijn zeer zeldzame tumoren en moeilijk te diagnosticeren omdat de huidlaesies vaak niet te onderscheiden zijn van goedaardige processen (de laatste komen veel vaker voor dan huidlymfomen). Om deze reden is het niet ongebruikelijk dat de diagnose wordt uitgesteld, met de daaruit voortvloeiende negatieve gevolgen voor de prognose van de patiënt als het om een ​​tumor gaat. Momenteel wordt de diagnose van bloedverspreiding (waarvan de hoeveelheid ook essentieel is omdat het de prognose beïnvloedt, hoe slechter de tumorlast in het bloed) wordt uitgevoerd door middel van flowcytometrie, die de conventionele morfologie heeft vervangen. De flowcytometrietechnieken die momenteel in de meeste klinische laboratoria worden gebruikt, zijn echter niet gestandaardiseerd tussen verschillende centra, en daarom is de vergelijkbaarheid van de resultaten (zelfs in de loop van de tijd, in hetzelfde centrum) en hun gebruik in de klinische omgeving moeilijk.

In dit project veronderstellen we dat de toepassing van nieuwe ‘next-generation flow’-strategieën voorgesteld door de internationale samenwerkingsgroep EuroFlow (waartoe de aanvrager van dit voorstel behoort) de detectie van circulerende tumorcellen bij patiënten met cutane T-cel zou verbeteren. lymfoom, wat een verbetering van de klinische behandeling van de patiënten mogelijk zou maken. Daarom streven we er in dit project naar om als ALGEMENE DOELSTELLING gestandaardiseerde strategieën van de volgende generatie flowcytometrie, ontwikkeld door het EuroFlow Consortium, toe te passen voor de snelle, specifieke, gevoelige en reproduceerbare detectie en kwantificering van tumorcellen bij patiënten met MF/SS, door: i) de toepassing van gestandaardiseerde monsterkleuringsprocedures met antilichaampanels die zijn ontworpen na eerdere testrondes, waardoor tumor-T-lymfocyten van normale T-cellen kunnen worden onderscheiden (specificiteit); ii) het aanpassen van de techniek om een ​​groot aantal cellen te analyseren, om een ​​hoge detectiegevoeligheid te bereiken, wat ook cruciaal is voor een nauwkeuriger monitoring van resterende ziekte in het bloed na behandeling met de nieuwe therapieën die beschikbaar zijn bij cutane T-cellymfomen; en iii) ontwikkeling van automatische analysestrategieën van cytometriegegevens, zodat de resultaten niet afhankelijk zijn van de persoonlijke ervaring van de cytometrist.

INVLOED. De beschikbaarheid van een nieuwe gestandaardiseerde flowcytometriestrategie voor gevoelige en specifieke detectie (en kwantificering) van circulerende tumorcellen in het bloed (en de huid) van patiënten met cutaan T-cellymfoom zal een essentieel hulpmiddel bieden ter ondersteuning van de dermo-hematologische diagnose, met de mogelijkheid om op zeer korte termijn na afronding van het project te vertalen naar routinematige diagnose, voor toepassing ervan in ziekenhuizen die beschikken over een Cytometrie/Immunopathologie Laboratorium, met als doel: i) Het stellen van een vroege en nauwkeurige (differentiële) diagnose tussen lymfomen - goedaardige laesie bij patiënten met huidlaesies; ii) Het detecteren van tumorcellen in bloed met een grotere gevoeligheid dan conventionele methoden, om de bloedverspreiding van een primair cutaan T-cellymfoom nauwkeuriger vast te stellen en om de respons op de huidige behandelingen op een betrouwbaardere en gevoeligere manier te beoordelen