Détection de la méthylation de l'ADN urinaire pour l'évaluation de l'hématurie

Méthodes

Étudier le design:

Il s'agit d'une étude pilote prospective visant à évaluer l'efficacité des biomarqueurs de méthylation de l'ADN dans la détection du carcinome urothélial chez les patients atteints d'hématurie.

Calcul de la taille de l'échantillon :

D'après nos observations précédentes, l'incidence du carcinome urothélial chez les patients atteints d'hématurie est de 20 à 30 %, légèrement plus élevée que celle rapportée dans d'autres publications. Par conséquent, nous émettons l'hypothèse que 25 % des patients de la cohorte d'hématurie souffrent de CU. Le ratio d'attribution de groupe (R) : N-/N+ = 75%/25% = 3.

Hypothèses:

Aire sous la courbe (AUC) sous H0 : 0,5 AUC sous H1 : 0,8 Puissance : 0,95 Niveau de signification (Alpha) : 0,05 Type de données : Plage FPR continue : 0,00 à 1,00

Résultats : Utilisation du logiciel PASS 15.0 pour le calcul de la taille de l'échantillon afin de garantir une puissance statistique suffisante. La taille de l'échantillon calculée est :

N+ (nombre de patients avec RCH) : 14 N- (nombre de patients sans RCH) : 42 Taille totale de l'échantillon (N) : 56

En considérant un taux d’abandon de 20 %, la taille de l’échantillon ajustée est :

N+' : 18 N-' : 53 Taille totale de l'échantillon (N') : 71

Critères d'inclusion et d'exclusion :

Critère d'intégration:

Âgé de 18 à 99 ans, avec hématurie macroscopique ou microscopique (>5/HP). Capable de fournir 50 ml d’urine pour les tests avant la chirurgie. Consentez à participer à l'étude et signez le formulaire de consentement éclairé.

Critère d'exclusion:

Avec des antécédents de tumeur maligne ou de tumeurs malignes concomitantes autres que la CU. Infection sévère des voies urinaires conduisant à une septicémie. Patients porteurs de cathéters à demeure, de néphrostomie ou de cystostomie. Insuffisance hépatique ou rénale sévère ou autres conditions jugées inappropriées pour l'étude.

Patients n’ayant pas subi de traitement chirurgical pour diverses raisons. Échantillons avec une teneur en ADN insuffisante ou d’autres échecs du contrôle qualité.

Collecte d'échantillons:

Les cliniciens prélèveront des échantillons d'urine fraîche auprès des patients hématuriques inscrits et enregistreront leurs informations de base, leurs informations cliniques et leurs antécédents médicaux.

Les échantillons seront numérotés au hasard et fournis au personnel chargé des tests de méthylation de l'ADN pour garantir la mise en aveugle.

Méthode de test :

Le personnel de test analysera des échantillons d'urine à l'aide de méthodes de test de méthylation de l'ADN basées sur MSRE-qPCR pour évaluer les niveaux de méthylation de l'ADN.

Levée de l'aveugle et organisation des données :

Une fois le dernier échantillon recruté et testé avec succès, le personnel non recruté et le personnel chargé des tests ouvriront l'aveugle des échantillons et organiseront les informations cliniques et pathologiques.

L'analyse des données:

Utiliser les résultats pathologiques comme référence. Calculez la sensibilité, la spécificité, la valeur prédictive positive et la valeur prédictive négative des biomarqueurs de méthylation de l’ADN.

Utilisez des méthodes statistiques (telles que les courbes ROC) pour évaluer les performances diagnostiques des biomarqueurs de méthylation de l’ADN et calculer l’AUROC.

Éthique et consentement éclairé :

Cette étude a été approuvée par le comité d'éthique de l'hôpital et tous les participants doivent signer un formulaire de consentement éclairé.