Detección de metilación del ADN en orina para la evaluación de hematuria

Métodos

Diseño del estudio:

Este es un estudio piloto prospectivo destinado a evaluar la eficacia de los biomarcadores de metilación del ADN en la detección de carcinoma urotelial en pacientes con hematuria.

Cálculo del tamaño de la muestra:

Según nuestras observaciones anteriores, la incidencia de carcinoma urotelial en pacientes con hematuria es del 20% al 30%, ligeramente superior a la informada en otra literatura. Por lo tanto, planteamos la hipótesis de que el 25% de los pacientes de la cohorte de hematuria tienen CU. El ratio de asignación de grupo (R): N-/N+ = 75%/25% = 3.

Supuestos:

Área bajo la curva (AUC) bajo H0: 0,5 AUC bajo H1: 0,8 Potencia: 0,95 Nivel de significancia (Alfa): 0,05 Tipo de datos: Continuo Rango de FPR: 0,00 a 1,00

Resultados: Se utilizó el software PASS 15.0 para calcular el tamaño de la muestra y garantizar suficiente poder estadístico. El tamaño de muestra calculado es:

N+ (número de pacientes con CU): 14 N- (número de pacientes sin CU): 42 Tamaño total de la muestra (N): 56

Considerando una tasa de deserción del 20%, el tamaño de muestra ajustado es:

N+': 18 N-': 53 Tamaño total de la muestra (N'): 71

Los criterios de inclusión y exclusión:

Criterios de inclusión:

Edad entre 18 y 99 años, con hematuria macroscópica o microscópica (>5/HP). Capaz de proporcionar 50 ml de orina para analizar antes de la cirugía. Consentimiento para participar en el estudio y firmar el formulario de consentimiento informado.

Criterio de exclusión:

Con antecedentes de malignidad o neoplasias malignas concomitantes distintas a la CU. Infección grave del tracto urinario que conduce a sepsis. Pacientes con catéteres permanentes, nefrostomía o cistostomía. Insuficiencia hepática o renal grave u otras condiciones consideradas inadecuadas para el estudio.

Pacientes que no fueron sometidos a tratamiento quirúrgico por diversos motivos. Muestras con contenido insuficiente de ADN u otras fallas en el control de calidad.

Coleccion de muestra:

Los médicos recolectarán muestras de orina frescas de pacientes con hematuria inscritos y registrarán su información básica, información clínica e historial médico.

Las muestras se numerarán aleatoriamente y se proporcionarán al personal de pruebas de metilación del ADN para garantizar el cegamiento.

Método de prueba:

El personal de pruebas analizará muestras de orina utilizando métodos de prueba de metilación del ADN basados ​​en MSRE-qPCR para evaluar los niveles de metilación del ADN.

Desenmascaramiento y organización de datos:

Una vez que la última muestra se haya inscrito y analizado con éxito, el personal no reclutado y el personal de pruebas revelarán las muestras y organizarán la información clínica y patológica.

Análisis de los datos:

Utilizar los resultados patológicos como estándar de oro. Calcule la sensibilidad, especificidad, valor predictivo positivo y valor predictivo negativo de los biomarcadores de metilación del ADN.

Utilice métodos estadísticos (como curvas ROC) para evaluar el rendimiento diagnóstico de los biomarcadores de metilación del ADN y calcular el AUROC.

Ética y Consentimiento Informado:

Este estudio ha sido aprobado por el comité de ética del hospital y todos los participantes deben firmar un formulario de consentimiento informado.