Detecção de metilação de DNA na urina para avaliação de hematúria

Métodos

Design de estudo:

Este é um estudo piloto prospectivo que visa avaliar a eficácia dos biomarcadores de metilação do DNA na detecção de carcinoma urotelial em pacientes com hematúria.

Cálculo do tamanho da amostra:

Com base em nossas observações anteriores, a incidência de carcinoma urotelial em pacientes com hematúria é de 20% a 30%, um pouco maior do que o relatado em outra literatura. Portanto, levantamos a hipótese de que 25% dos pacientes da coorte de hematúria apresentam CU. A proporção de alocação do grupo (R): N-/N+ = 75%/25% = 3.

Premissas:

Área sob a curva (AUC) sob H0: 0,5 AUC sob H1: 0,8 Poder: 0,95 Nível de significância (Alfa): 0,05 Tipo de dados: Faixa FPR contínua: 0,00 a 1,00

Resultados: Utilização do software PASS 15.0 para cálculo do tamanho da amostra para garantir poder estatístico suficiente. O tamanho da amostra calculado é:

N+ (número de pacientes com CU): 14 N- (número de pacientes sem CU): 42 Tamanho total da amostra (N): 56

Considerando uma taxa de evasão de 20%, o tamanho da amostra ajustado é:

N+': 18 N-': 53 Tamanho total da amostra (N'): 71

Critérios de inclusão e exclusão:

Critério de inclusão:

Idade entre 18 e 99 anos, com hematúria macroscópica ou microscópica (>5/HP). Capaz de fornecer 50ml de urina para teste antes da cirurgia. Consentimento em participar do estudo e assinatura do termo de consentimento livre e esclarecido.

Critério de exclusão:

Com história de malignidade ou malignidades concomitantes diferentes de UC. Infecção grave do trato urinário levando à sepse. Pacientes com cateteres de demora, nefrostomia ou cistostomia. Insuficiência hepática ou renal grave ou outras condições consideradas inadequadas para o estudo.

Pacientes que não foram submetidos a tratamento cirúrgico por motivos diversos. Amostras com conteúdo de DNA insuficiente ou outras falhas no controle de qualidade.

Coleta de amostras:

Os médicos coletarão amostras frescas de urina de pacientes inscritos com hematúria e registrarão suas informações básicas, informações clínicas e histórico médico.

As amostras serão numeradas aleatoriamente e fornecidas ao pessoal de teste de metilação do DNA para garantir o cegamento.

Método de teste:

A equipe de testes analisará amostras de urina usando métodos de teste de metilação de DNA baseados em MSRE-qPCR para avaliar os níveis de metilação do DNA.

Desobstrução e Organização de Dados:

Depois que a última amostra for registrada e testada com sucesso, o pessoal não recrutador e o pessoal de teste revelarão as amostras e organizarão as informações clínicas e patológicas.

Análise de dados:

Usando resultados patológicos como padrão ouro. Calcule a sensibilidade, especificidade, valor preditivo positivo e valor preditivo negativo dos biomarcadores de metilação do DNA.

Use métodos estatísticos (como curvas ROC) para avaliar o desempenho diagnóstico de biomarcadores de metilação do DNA e calcular o AUROC.

Ética e Consentimento Informado:

Este estudo foi aprovado pelo comitê de ética do hospital e todos os participantes devem assinar um termo de consentimento livre e esclarecido.