Rilevazione della metilazione del DNA nelle urine per la valutazione dell'ematuria

Metodi

Progettazione dello studio:

Si tratta di uno studio pilota prospettico volto a valutare l'efficacia dei biomarcatori della metilazione del DNA nel rilevare il carcinoma uroteliale in pazienti con ematuria.

Calcolo della dimensione del campione:

Sulla base delle nostre precedenti osservazioni, l'incidenza del carcinoma uroteliale nei pazienti con ematuria è del 20%-30%, leggermente superiore a quanto riportato in altra letteratura. Pertanto, ipotizziamo che il 25% dei pazienti nella coorte di ematuria abbia una colite ulcerosa. Il rapporto di allocazione del gruppo (R): N-/N+ = 75%/25% = 3.

Presupposti:

Area sotto la curva (AUC) sotto H0: 0,5 AUC sotto H1: 0,8 Potenza: 0,95 Livello di significatività (alfa): 0,05 Tipo di dati: Intervallo FPR continuo: da 0,00 a 1,00

Risultati: utilizzo del software PASS 15.0 per il calcolo della dimensione del campione per garantire una potenza statistica sufficiente. La dimensione del campione calcolata è:

N+ (numero di pazienti con CU): 14 N- (numero di pazienti senza CU): 42 Dimensione totale del campione (N): 56

Considerando un tasso di abbandono del 20%, la dimensione del campione corretta è:

N+': 18 N-': 53 Dimensione totale del campione (N'): 71

Criteri di inclusione ed esclusione:

Criterio di inclusione:

Età compresa tra 18 e 99 anni, con ematuria macroscopica o microscopica (>5/HP). In grado di fornire 50 ml di urina per il test prima dell'intervento chirurgico. Consenso alla partecipazione allo studio e firma del modulo di consenso informato.

Criteri di esclusione:

Con storia di tumori maligni o tumori maligni concomitanti diversi dalla CU. Grave infezione del tratto urinario che porta alla sepsi. Pazienti con cateteri a permanenza, nefrostomia o cistostomia. Grave insufficienza epatica o renale o altre condizioni ritenute non idonee allo studio.

Pazienti che non sono stati sottoposti a trattamento chirurgico per vari motivi. Campioni con contenuto di DNA insufficiente o altri errori di controllo qualità.

Raccolta campioni:

I medici raccoglieranno campioni di urina fresca dai pazienti con ematuria iscritti e registreranno le loro informazioni di base, informazioni cliniche e anamnesi.

I campioni verranno numerati in modo casuale e forniti al personale addetto ai test di metilazione del DNA per garantire l'accecamento.

Metodo di prova:

Il personale addetto ai test analizzerà i campioni di urina utilizzando metodi di test della metilazione del DNA basati su MSRE-qPCR per valutare i livelli di metilazione del DNA.

Apertura dell'occultamento e organizzazione dei dati:

Dopo che l'ultimo campione è stato arruolato e testato con successo, il personale non reclutante e il personale addetto ai test apriranno i campioni e organizzeranno le informazioni cliniche e patologiche.

Analisi dei dati:

Utilizzando i risultati patologici come gold standard. Calcolare la sensibilità, la specificità, il valore predittivo positivo e il valore predittivo negativo dei biomarcatori della metilazione del DNA.

Utilizzare metodi statistici (come le curve ROC) per valutare le prestazioni diagnostiche dei biomarcatori di metilazione del DNA e calcolare l'AUROC.

Etica e consenso informato:

Questo studio è stato approvato dal comitato etico dell'ospedale e tutti i partecipanti devono firmare un modulo di consenso informato.