A diamin-ezüst-fluorid farmakokinetikája

A résztvevők Hat egészséges önkéntest (4 nő, átlagéletkor 36,2 év, 23-52 év) vettek fel az Universidad Católica de Santa María (Arequipa, Peru) munkatársai közül. A résztvevők nem szedtek gyógyszereket, és a legtöbb maradandó foguk is jelen volt. A résztvevőket arra kérték, hogy a vizsgálat előtt 12 órával kerüljék a halat vagy a teát, és ne használjanak fluortartalmú fogkrémet 4 órával azelőtt. A Comité de Etica de Investigacion, Universidad Católica de Santa María jóváhagyta a tanulmányt, és tájékozott beleegyezést kaptak.

DSF vizsgálati ügynök [Ag(NH3)2F, CAS RN 33040-28-7, Saforide, Toyo Seiyaku Kasei Co. Ltd. Osaka, Japán] használták. A DSF tiszta és színtelen, gyenge ammónia szagú. A 38%-os oldat 24,4-28,8% (m/v) ezüst (Ag) és 5,0-5,9% fluorid (F). Az Ag és F koncentrációja a vizsgálathoz használt DSF-ben 24,9%, illetve 5,5%, a fajsúly ​​pedig 1,253 volt 25 °C-on (155060. tételszámú elemzési tanúsítvány). A diamin-ezüst-fluoridot a szakirodalom ezüst-diamin-fluoridnak, ezüst-diamin-fluoridnak vagy ezüst-fluoridnak is nevezi.

Eljárások Három maxilláris fogat (hús és premoláris) kezeltünk ugyanabban a kvadránsban. Három fogat kezeltek, mert ez volt az érzékeny fogak átlagos száma egy felnőtteken végzett epidemiológiai vizsgálatban [5]. A fogak mentesek voltak pótlásoktól vagy üregektől. Az arcfelületet pamut gézzel szárítottuk, majd DSF-et vittünk fel minden fog nyaki területére. A fogakat elkülönítettük, hogy elkerüljük a kefe nyállal történő nedvesítését. Minden fogat külön mikrokefével vontunk be, amelyet DSF-be mártottak, és az alkalmazás előtt és után megmértek (S2000 modell, Kern & Sohn GmbH, Balingen, Németország). A felhasznált anyag súlykülönbségeinek összegét minden résztvevőre kiszámítottuk.

Vérvétel Közvetlenül a DSF alkalmazása előtt, majd ismét körülbelül 30 perccel, 1, 2, 3 és 4 órával az alkalmazás után vért vettünk egy perifériás vénából. Az időszakokat a fluorid lakk korábbi farmakokinetikai vizsgálata alapján választották ki [6]. A vért egy fluoridmentes műanyag Vacutainer csőbe vittük át vérrögaktivátorral (BD Vacutainer Plus Plastic Serum Tube, BD Diagnostics, New Jersey). A csöveket 1100 g-n 10 percig centrifugáltuk, és a szérumot műanyag pipettával vittük át műanyag kriogén csövekbe. A mintákat lefagyasztották és a Washingtoni Egyetemre szállították elemzés céljából.

Elemzés Fluorid. A mintákat felolvasztottuk, és két vagy három párhuzamosban analizáltuk diffúziós és detektálási módszerrel hexametildisziloxánnal (HMDS) és Orion F-érzékeny elektródával [7-8]. A kimutatás javítása érdekében az elődiffúziós lépést elhagytuk [9], és a lezárást befejeztük, mielőtt 1 ml szérumot összekevertünk 1 ml telített 3 M H2SO4 HMDS-sel [10]. A befogó oldat 20 µmol 1 M NaOH volt. Megszárítottuk, hogy kiküszöböljük a párolgás és a maradék HMDS változékonyságát, mielőtt 100 µl 3 M ecetsavat adtunk hozzá a végső pH 3,4 értékig. A standardok 10 és 100 µM fluorid voltak, azonos végső NaOH és ecetsav koncentrációban, ami 1 és 10 µM F-nek felel meg a mintákban. Az ORION F és a hüvely típusú referenciaelektródákat Accumet Basic 0,1 mV-os mérőműszerrel (Thermo Fisher Scientific, Milwaukee WI) csatlakoztattuk.

A vakutainereket fluoridra teszteltük úgy, hogy 2 csőbe szarvasmarha-plazmát adtak, és egy éjszakán át állni hagyták őket, mielőtt a 2 mintát egyesítették, és összehasonlították a közvetlenül diffúziós edényekbe helyezett plazmával. Az átlagos koncentráció (μM±SD) 0,34±0,014 volt és 0,32±0,012, illetőleg. Ezért a szérummintákban kevesebb mint 2% F származott a Vacutainerstől és a vérrögfokozótól. A szarvasmarhaszérumhoz adott 1 nmol/ml F visszanyerése (átlag±SD) 101±4%. A fluoridszinteket átlagoltuk, és µM-ban fejeztük ki.

Ezüst. A mintákat felolvasztottuk és induktív csatolású plazma-tömegspektrometriával (EPA 6020a Rev.1, 2007) elemeztük. A szérumot (0,5 ml) híg savval (végső koncentráció: 2% HCl, 1% HNO3; fémnyom, Fisher, Fairlawn, NJ) 2 ml-re tesszük. A mintákat 10 percig centrifugáltuk (1290 g), majd 15 ml-es polipropilén centrifugacsövekbe szűrtük (0,45 µm, PTFE; csupa polipropilén fecskendő). A mintákat Agilent 7500CE (Santa Clara, CA) induktív csatolású tömegspektrométeren (ICPMS) elemeztük, ütközési cella gázként He-vel és ASX-510 automatikus mintavevővel (CETAC, Omaha, NB). Micromist porlasztót (Glass Expansion, Pocasset, MA) használtunk (1,15 l/perc vivőgáz; pótgáz nélkül). A permetezőkamra hőmérséklete 2°C volt. Az RF teljesítmény 1500 W volt. Az Ag mennyiségi meghatározásához Y belső standardot használtunk. A kalibráló anyagokat 2%-os HCl-lel és 1%-os HNO3-dal hígítottuk, amelyeket kereskedelmi ICPMS minőségű oldatokból (Ultra Scientific, N. Kingstown, RI; BDH Aristar, VWR, Radnor, PA) készítettek, és a koncentráció 0,5-50 ng/ml között volt. A kalibrálás súlyozott (1/cps) lineáris regresszióval történt. Az adatokat üres eljárással javítottuk. A 2 ng/ml-nél kisebb ezüst értékeit 2-re kódoltuk. Az ezüstkoncentrációkat ng/ml-ben fejeztük ki.

Lágyszövetek értékelése A DSF alkalmazása melletti íny és a nyálkahártya általában a kiinduláskor és a kezelés után 24 órával megfigyelhető volt. A bőrpírt, a vérzést, a fehéredést, a fekélyt és a pigmentációt egy korábbi tanulmányhoz kifejlesztett módszerekkel értékelték [1].