Pharmakokinetik von Diamminsilberfluorid

Teilnehmer Unter den Mitarbeitern der Universidad Católica de Santa María, Arequipa, Peru, wurden sechs gesunde Freiwillige (4 Frauen, Durchschnittsalter 36,2 Jahre, Bereich 23–52 Jahre) rekrutiert. Die Teilnehmer nahmen keine Medikamente ein und hatten die meisten bleibenden Zähne. Die Teilnehmer wurden gebeten, 12 Stunden vor der Studie Fisch oder Tee zu meiden und 4 Stunden vorher keine fluoridierte Zahnpasta zu verwenden. Das Comité de Etica de Investigacion der Universidad Católica de Santa María genehmigte die Studie und es wurde eine Einverständniserklärung eingeholt.

Studienagent DSF [Ag(NH3)2F, CAS RN 33040-28-7, Saforide, Toyo Seiyaku Kasei Co. Ltd. Osaka, Japan] verwendet. DSF ist klar und farblos mit einem schwachen Ammoniakgeruch. Die 38%ige Lösung enthält zwischen 24,4-28,8% (w/v) Silber (Ag) und 5,0–5,9 % Fluorid (F). Die Konzentrationen von Ag und F in dem für die Studie verwendeten DSF betrugen 24,9 % bzw. 5,5 %, und das spezifische Gewicht betrug 1,253 bei 25 °C (Analysenzertifikat, Charge Nr. 155060). Diamminsilberfluorid wird in der Literatur auch als Silberdiamminfluorid, Silberdiaminfluorid oder Silberfluorid bezeichnet.

Verfahren Drei Oberkieferzähne (Eckzahn und Prämolaren) im selben Quadranten wurden behandelt. Drei Zähne wurden behandelt, da dies die durchschnittliche Anzahl empfindlicher Zähne war, die in einer epidemiologischen Studie an Erwachsenen berichtet wurde [5]. Die Zähne waren frei von Restaurationen oder Kavitation. Die Gesichtsoberfläche wurde mit Baumwollgaze getrocknet und dann wurde DSF auf den zervikalen Bereich jedes Zahns aufgetragen. Die Zähne wurden isoliert, um ein Benetzen der Bürste mit Speichel zu vermeiden. Jeder Zahn wurde mit einer separaten Mikrobürste beschichtet, die in das DSF getaucht und vor und nach dem Auftragen gewogen wurde (Modell S2000, Kern & Sohn GmbH, Balingen, Deutschland). Die Summe der Gewichtsunterschiede des aufgetragenen Materials wurde für jeden Teilnehmer berechnet.

Blutentnahme Unmittelbar vor der Applikation von DSF und dann wieder etwa 30 min, 1, 2, 3 und 4 h nach der Applikation wurde Blut aus einer peripheren Vene entnommen. Die Zeiträume wurden basierend auf einer früheren pharmakokinetischen Studie von Fluoridlack ausgewählt [6]. Das Blut wurde in ein fluoridfreies Kunststoff-Vacutainer-Röhrchen mit Gerinnungsaktivator (BD Vacutainer Plus Plastic Serum Tube, BD Diagnostics, New Jersey) überführt. Die Röhrchen wurden bei 1100 g für 10 min zentrifugiert und das Serum mit einer Kunststoffpipette in kryogene Kunststoffröhrchen überführt. Die Proben wurden eingefroren und zur Analyse an die University of Washington transportiert.

Analyse Fluorid. Die Proben wurden aufgetaut und zwei- oder dreifach unter Verwendung der Diffusions- und Nachweismethode mit Hexamethyldisiloxan (HMDS) und Orion F-empfindlicher Elektrode [7-8] analysiert. Um den Nachweis zu verbessern, wurde der Vordiffusionsschritt weggelassen [9], und die Versiegelungen wurden abgeschlossen, bevor 1 ml Serum mit 1 ml HMDS, gesättigter 3 M H2SO4 [10] gemischt wurde. Die Einfanglösung war 20 &mgr;mol 1 M NaOH. Es wurde getrocknet, um Schwankungen der Verdunstung und restliches HMDS zu eliminieren, bevor 100 &mgr;l 3 M Essigsäure bis zu einem endgültigen pH-Wert von 3,4 zugegeben wurden. Standards waren 10 und 100 &mgr;M Fluorid in der gleichen Endkonzentration von NaOH und Essigsäure, entsprechend 1 und 10 &mgr;M F in den Proben. ORION F- und Hülsen-Referenzelektroden wurden mit einem Accumet Basic 0,1 mV-Messgerät (Thermo Fisher Scientific, Milwaukee WI) gekoppelt.

Vacutainer wurden auf Fluorid getestet, indem Rinderplasma in 2 Röhrchen gegeben und über Nacht stehen gelassen wurde, bevor die 2 Proben kombiniert und mit Plasma verglichen wurden, das direkt in Diffusionsschalen gegeben wurde. Die durchschnittlichen Konzentrationen (μM ± SD) betrugen 0,34 ± 0,014 und 0,32 ± 0,012, bzw. Daher stammten weniger als 2 % F in den Serumproben von den Vacutainern und Gerinnungsverstärkern. Die Wiederfindung (Mittelwert ± Standardabweichung) von 1 nMol/ml F, das Rinderserum zugesetzt wurde, betrug 101 ± 4 %. Die Fluoridspiegel wurden gemittelt und sind als uM ausgedrückt.

Silber. Die Proben wurden aufgetaut und mittels induktiv gekoppelter Plasma-Massenspektrometrie (EPA 6020a Rev.1 2007) analysiert. Serum (0,5 ml) wurde mit verdünnter Säure (Endkonzentration: 2 % HCl, 1 % HNO3; Spurenmetallqualität, Fisher, Fairlawn, NJ) auf 2 ml gebracht. Die Proben wurden 10 Minuten lang zentrifugiert (1290 g) und in 15-ml-Polypropylen-Zentrifugenröhrchen filtriert (0,45 &mgr;m, PTFE; alle Polypropylenspritzen). Die Proben wurden auf einem induktiv gekoppelten Massenspektrometer (ICPMS) Agilent 7500CE (Santa Clara, CA) mit He als Kollisionszellengas und einem Autosampler ASX-510 (CETAC, Omaha, NB) analysiert. Es wurde ein Micromist-Zerstäuber (Glass Expansion, Pocasset, MA) verwendet (1,15 l/min Trägergas; kein Make-up-Gas). Die Sprühkammertemperatur betrug 2°C. Die HF-Leistung betrug 1500 W. Ag wurde unter Verwendung von Y als internem Standard quantifiziert. Kalibriersubstanzen wurden mit 2 % HCl und 1 % HNO3 verdünnt, die aus handelsüblichen ICPMS-Lösungen (Ultra Scientific, N. Kingstown, RI; BDH Aristar, VWR, Radnor, PA) hergestellt wurden und im Bereich von 0,5–50 ng/ml lagen. Die Kalibrierung erfolgte durch gewichtete (1/cps) lineare Regression. Die Daten wurden durch das Leerverfahren korrigiert. Silberwerte von weniger als 2 ng/mL wurden auf 2 umkodiert. Silberkonzentrationen werden als ng/mL ausgedrückt.

Beurteilung des Weichgewebes Die Gingiva neben der Anwendung von DSF und die Schleimhaut wurden im Allgemeinen zu Studienbeginn und 24 Stunden nach der Behandlung untersucht. Erythem, Blutungen, weiße Veränderungen, Ulzerationen und Pigmentierung wurden mit Methoden bewertet, die für eine frühere Studie entwickelt wurden [1].