Фармакокинетика фторида диаммина серебра

Участники Шесть здоровых добровольцев (4 женщины, средний возраст 36,2 года, диапазон от 23 до 52 лет) были набраны среди сотрудников Католического университета Санта-Мария, Арекипа, Перу. Участники не принимали никаких лекарств и имели большинство постоянных зубов. Участников попросили воздержаться от употребления рыбы или чая за 12 часов до исследования и не использовать фторированную зубную пасту за 4 часа до исследования. Комитет по этике расследований Католического университета Санта-Мария одобрил исследование, и было получено информированное согласие.

Исследовательский агент DSF [Ag(NH3)2F, CAS RN 33040-28-7, Saforide, Toyo Seiyaku Kasei Co. Ltd. Осака, Япония]. ДСФ прозрачный и бесцветный, со слабым запахом аммиака. 38% раствор содержит от 24,4 до 28,8% (мас./об.) серебра (Ag) и 5,0-5,9% фтор (F). Концентрации Ag и F в DSF, использованном для исследования, составляли 24,9% и 5,5% соответственно, а удельный вес составлял 1,253 при 25°C (Сертификат анализа, лот № 155060). Диамминфторид серебра также упоминается в литературе как диамминфторид серебра, диаминфторид серебра или фторид серебра.

Процедуры Были обработаны три верхних зуба (куспид и премоляры) в одном и том же квадранте. Было пролечено три зуба, поскольку это было среднее количество чувствительных зубов, зарегистрированное в эпидемиологическом исследовании взрослых [5]. Зубы были свободны от реставраций или кавитации. Лицевую поверхность подсушивали ватной марлей, а затем на пришеечную область каждого зуба наносили ДСФ. Зубы изолировали во избежание смачивания щетки слюной. На каждый зуб наносили покрытие с помощью отдельной микрощетки, которую погружали в DSF и взвешивали до и после нанесения (модель S2000, Kern & Sohn GmbH, Балинген, Германия). Сумму различий в весе применяемого материала рассчитывали для каждого участника.

Сбор крови Непосредственно перед аппликацией DSF, а затем повторно примерно через 30 мин, 1, 2, 3 и 4 ч после аппликации брали кровь из периферической вены. Периоды времени были выбраны на основе предыдущего исследования фармакокинетики фторсодержащего лака [6]. Кровь переносили в не содержащую фтора пластиковую пробирку Vacutainer с активатором свертывания (BD Vacutainer Plus Plastic Serum Tube, BD Diagnostics, Нью-Джерси). Пробирки вращали при 1100 g в течение 10 мин и сыворотку переносили пластиковой пипеткой в ​​пластиковые криогенные пробирки. Образцы были заморожены и доставлены в Вашингтонский университет для анализа.

Анализ Фтор. Образцы размораживали и анализировали в двух или трех повторностях с использованием метода диффузии и обнаружения с использованием гексаметилдисилоксана (ГМДС) и чувствительного электрода Orion F [7-8]. Чтобы улучшить обнаружение, этап предварительной диффузии был исключен [9], а запечатывание было выполнено до смешивания 1 мл сыворотки с 1 мл HMDS, насыщенного 3 М H2SO4 [10]. Улавливающий раствор представлял собой 20 мкмолей 1 М NaOH. Перед добавлением 100 мкл 3 М уксусной кислоты до конечного рН 3,4 его высушивали, чтобы устранить непостоянство испарения и остаточного содержания ГМДС. Стандартами были 10 и 100 мкМ фторида в той же конечной концентрации NaOH и уксусной кислоты, что соответствует 1 и 10 мкМ F в образцах. Электроды сравнения ORION F и рукавного типа были соединены с измерителем Accumet Basic 0,1 мВ (Thermo Fisher Scientific, Милуоки, Висконсин).

Вакутейнеры тестировали на наличие фтора путем добавления бычьей плазмы в 2 пробирки и оставления их на ночь перед объединением 2 образцов и сравнением их с плазмой, непосредственно помещенной в диффузионные чашки. Средние концентрации (мкМ ± стандартное отклонение) составили 0,34 ± 0,014. и 0,32±0,012, соответственно. Следовательно, менее 2% F в образцах сыворотки было получено из Vacutainers и усилителя свертывания крови. Извлечение (среднее ± стандартное отклонение) 1 нмоль/мл F, добавленного к бычьей сыворотке, составило 101 ± 4%. Уровни фторидов были усреднены и выражены в мкМ.

Серебро. Образцы размораживали и анализировали с помощью масс-спектрометрии с индуктивно связанной плазмой (EPA 6020a Rev.1 2007). Объем сыворотки (0,5 мл) доводили до 2 мл разбавленной кислотой (конечная концентрация: 2% HCl, 1% HNO3; чистота для следовых количеств металлов, Fisher, Fairlawn, NJ). Образцы центрифугировали (1290 г) в течение 10 минут и фильтровали (0,45 мкм, ПТФЭ; полностью полипропиленовый шприц) в полипропиленовые центрифужные пробирки объемом 15 мл. Образцы анализировали на масс-спектрометре с индуктивной связью (ICPMS) Agilent 7500CE (Санта-Клара, Калифорния) с He в качестве газа в ячейке столкновений и автодозаторе ASX-510 (CETAC, Omaha, NB). Использовали распылитель Micromist (Glass Expansion, Pocasset, MA) (газ-носитель 1,15 л/мин; без подпиточного газа). Температура распылительной камеры составляла 2°C. ВЧ-мощность составляла 1500 Вт. Ag определяли количественно, используя Y в качестве внутреннего стандарта. Калибры разбавляли 2% HCl и 1% HNO3, приготовленными из коммерческих растворов класса ICPMS (Ultra Scientific, Н. Кингстаун, Род-Айленд; BDH Aristar, VWR, Рэднор, Пенсильвания) и варьировали от 0,5 до 50 нг/мл. Калибровка проводилась по взвешенной (1/cps) линейной регрессии. Данные были скорректированы методом бланка. Значения серебра менее 2 нг/мл были перекодированы в 2. Концентрации серебра выражены в нг/мл.

Оценка мягких тканей Десны, прилегающие к месту нанесения DSF, и слизистая оболочка обычно осматривались в начале лечения и через 24 часа после лечения. Эритему, кровотечение, белые пятна, изъязвление и пигментацию оценивали с использованием методов, разработанных для более раннего исследования [1].