ジアミン銀フッ化物の薬物動態

参加者 6 人の健康なボランティア (女性 4 人、平均年齢 36.2 歳、範囲 23 ～ 52 歳) が、ペルーのアレキパにあるカタリカ デ サンタ マリア大学のスタッフから募集されました。 参加者は薬を服用しておらず、ほとんどの永久歯が存在していました。 参加者は、研究の 12 時間前から魚やお茶を避け、4 時間前からフッ素添加歯磨き粉を使用しないように求められました。 Comité de Etica de Investigacion、Universidad Católica de Santa María がこの研究を承認し、インフォームド コンセントが得られました。

Study Agent DSF [Ag(NH3)2F、CAS RN 33040-28-7、サフォライド、東洋製薬化成株式会社 大阪、日本]が使用されました。 DSF は無色透明で、弱いアンモニア臭があります。 38% 溶液には 24.4 ～ 28.8% が含まれています。 (w/v) 銀 (Ag)、および 5.0 ～ 5.9% フッ化物（F）。 研究に使用した DSF 中の Ag と F の濃度はそれぞれ 24.9% と 5.5% であり、比重は 25°C で 1.253 でした (Certificate of Analysis Lot #155060)。 ジアミン銀フッ化物は、文献では銀ジアミンフッ化物、銀ジアミンフッ化物または銀フッ化物とも呼ばれる。

手順 同じ象限にある 3 本の上顎歯 (犬歯と小臼歯) を治療しました。 成人の疫学的研究で報告された敏感な歯の平均数であるため、3 本の歯が治療されました [5]。 歯には修復物やキャビテーションはありませんでした。 顔の表面を綿のガーゼで乾かした後、各歯の頸部にDSFを塗布しました。 ブラシが唾液で濡れるのを避けるために、歯を分離した。 各歯は、個別のマイクロブラシを使用してコーティングされ、DSF に浸され、塗布の前後に重量が測定されました (モデル S2000、Kern & Sohn GmbH、Balingen、Germany)。 適用された材料の重量の差の合計が、各参加者について計算されました。

採血 ＤＳＦの適用直前、および適用後約３０分、１、２、３および４時間後に、末梢静脈から血液を得た。 期間は、以前のフッ化物バーニッシュの薬物動態研究に基づいて選択されました [6]。 血液は、凝固活性剤を含むフッ化物を含まないプラスチック製のバキュテイナーチューブ（BD Vacutainer Plus Plastic Serum Tube、BD Diagnostics、ニュージャージー州）に移されました。 チューブを１１００ｇで１０分間遠心分離し、血清をプラスチックピペットでプラスチック極低温チューブに移した。 サンプルは凍結され、分析のためにワシントン大学に運ばれました。

分析フッ化物。 サンプルを解凍し、ヘキサメチルジシロキサン (HMDS) とオリオン F 感応電極を用いた拡散および検出法を使用して、2 回または 3 回分析しました [7-8]。 検出を改善するために、前拡散ステップを省略し [9]、1 mL の血清を 1 mL の HMDS、飽和 3 M H2SO4 と混合する前にシールを完了しました [10]。 トラッピング溶液は、20 µmol の 1 M NaOH でした。 100 μL の 3 M 酢酸を加えて最終 pH 3.4 にする前に、蒸発のばらつきと残留 HMDS を除去するために乾燥させました。 標準は、サンプル中の 1 および 10 μM F に対応する同じ最終濃度の NaOH および酢酸中の 10 および 100 μM フッ化物でした。 ORION F とスリーブ タイプの参照電極を Accumet Basic 0.1 mV メーター (Thermo Fisher Scientific、Milwaukee WI) と組み合わせました。

バキュテナーは、ウシ血漿を 2 本のチューブに加え、一晩放置してから 2 つのサンプルを混ぜ合わせ、拡散皿に直接置いた血漿と比較することにより、フッ化物についてテストされました。 平均濃度 (μM±SD) は 0.34±0.014 でした そして0.32±0.012、 それぞれ。 したがって、血清サンプル中の 2% 未満の F は、バキュテナーと凝固促進剤に由来します。 ウシ血清に添加された１ナノモル／ｍｌのＦの回収率（平均±ＳＤ）は、１０１±４％であった。 フッ化物レベルは平均化され、μM として表されます。

銀。 サンプルを解凍し、誘導結合プラズマ質量分析法 (EPA 6020a Rev.1 2007) を使用して分析しました。 血清 (0.5 mL) を希酸 (最終濃度: 2% HCl、1% HNO3; 微量金属グレード、Fisher、Fairlawn、NJ) で 2 mL にしました。 サンプルを 10 分間遠心分離 (1290 g) し、ろ過 (0.45 µm、PTFE、すべてポリプロピレンシリンジ) して 15 mL ポリプロピレン遠心管に入れました。 サンプルは、Agilent 7500CE (Santa Clara, CA) の誘導結合質量分析計 (ICPMS) で He をコリジョン セル ガスとし、ASX-510 オートサンプラー (CETAC, Omaha, NB) で分析しました。 Micromist ネブライザー (Glass Expansion、ポカセット、マサチューセッツ州) を使用しました (1.15 L/分のキャリアガス、メイクアップガスなし)。 スプレーチャンバーの温度は2℃でした。 RF 電力は 1500 W でした。Y を内部標準として使用して Ag を定量しました。 キャリブラントは、市販の ICPMS グレードの溶液 (Ultra Scientific, N. Kingstown, RI; BDH Aristar, VWR, Radnor, PA) から調製した 2% HCl および 1% HNO3 で希釈し、範囲は 0.5 ～ 50 ng/mL でした。 キャリブレーションは、加重 (1/cps) 線形回帰によって行われました。 データは手順ブランクによって修正されました。 2 ng/mL 未満の銀の値は 2 に記録されました。銀濃度は ng/mL で表されます。

軟部組織の評価 DSF の適用に隣接する歯肉と粘膜は、通常、ベースライン時と治療の 24 時間後に観察されました。 紅斑、出血、白色変化、潰瘍、色素沈着は、以前の研究で開発された方法を使用して評価されました [1]。