Farmakokinetika diaminu stříbrného fluoridu

Účastníci Šest zdravých dobrovolníků (4 ženy, průměrný věk 36,2, rozmezí 23-52 let) bylo přijato mezi zaměstnance Universidad Católica de Santa María, Arequipa, Peru. Účastníci neužívali žádné léky a měli většinu stálých zubů. Účastníci byli požádáni, aby se 12 hodin před studií vyhýbali rybám nebo čaji a 4 hodiny před studií nepoužívali fluoridovanou zubní pastu. Comité de Etica de Investigacion, Universidad Católica de Santa María studii schválil a byl získán informovaný souhlas.

Studijní agent DSF [Ag(NH3)2F, CAS RN 33040-28-7, Saforide, Toyo Seiyaku Kasei Co. Ltd. Osaka, Japonsko] byl použit. DSF je čirý a bezbarvý, se slabým zápachem po amoniaku. 38% roztok obsahuje mezi 24,4-28,8% (w/v) stříbro (Ag) a 5,0-5,9 % fluorid (F). Koncentrace Ag a F v DSF použitém pro studii byly 24,9 % a 5,5 %, v daném pořadí, a specifická hmotnost byla 1,253 při 25 °C (certifikát analytické šarže č. 155060). Diaminfluorid stříbrný je v literatuře také označován jako diaminfluorid stříbrný, diaminfluorid stříbrný nebo fluorid stříbrný.

Postupy Byly ošetřeny tři maxilární zuby (kuspidální a premoláry) ve stejném kvadrantu. Byly ošetřeny tři zuby, protože to byl průměrný počet citlivých zubů uváděný v epidemiologické studii dospělých [5]. Zuby byly bez náhrad nebo kavitace. Povrch obličeje byl vysušen bavlněnou gázou a poté byl DSF aplikován na cervikální oblast každého zubu. Zuby byly izolovány, aby se zabránilo smáčení kartáčku slinami. Každý zub byl potažen pomocí samostatného mikrokartáčku, který byl ponořen do DSF a zvážen před a po aplikaci (Model S2000, Kern & Sohn GmbH, Balingen, Německo). Pro každého účastníka byl vypočten součet rozdílů v hmotnosti aplikovaného materiálu.

Odběr krve Bezprostředně před aplikací DSF a poté znovu přibližně 30 minut, 1, 2, 3 a 4 hodiny po aplikaci byla odebrána krev z periferní žíly. Časová období byla vybrána na základě předchozí farmakokinetické studie fluoridového laku [6]. Krev byla přenesena do plastové zkumavky Vacutainer bez fluoru s aktivátorem sraženiny (BD Vacutainer Plus Plastic Serum Tube, BD Diagnostics, New Jersey). Zkumavky byly stočeny při 1100 g po dobu 10 minut a sérum bylo přeneseno plastovou pipetou do plastových kryogenních zkumavek. Vzorky byly zmraženy a převezeny na Washingtonskou univerzitu k analýze.

Analýza Fluorid. Vzorky byly rozmraženy a analyzovány v duplikátech nebo triplikátech za použití difúzní a detekční metody s hexamethyldisiloxanem (HMDS) a Orion F-senzitivní elektrodou [7-8]. Pro zlepšení detekce byl vynechán krok před difúzí [9] a těsnění bylo dokončeno před smícháním 1 ml séra s 1 ml HMDS, nasycené 3 M H2SO4 [10]. Zachycovacím roztokem bylo 20 umolů 1M NaOH. Před přidáním 100 ul 3M kyseliny octové do konečného pH 3,4 byl vysušen, aby se eliminovala variabilita odpařování a zbytkový HMDS. Standardy byly 10 a 100 uM fluorid ve stejné konečné koncentraci NaOH a kyseliny octové odpovídající 1 a 10 uM F ve vzorcích. Referenční elektrody ORION F a objímkového typu byly spojeny s měřičem Accumet Basic 0,1 mV (Thermo Fisher Scientific, Milwaukee WI).

Vacutainery byly testovány na fluorid přidáním hovězí plazmy do 2 zkumavek a jejich ponecháním sedět přes noc před spojením 2 vzorků a jejich porovnáním s plazmou přímo umístěnou v difuzních miskách. Průměrné koncentrace (μM±SD) byly 0,34±0,014 a 0,32±0,012, respektive. Proto méně než 2 % F ve vzorcích séra pocházelo z Vacutainers a zesilovače sraženiny. Výtěžnost (průměr ± SD) 1 nmol/ml F přidaného do hovězího séra byla 101 ± 4 %. Hladiny fluoridu byly zprůměrovány a jsou vyjádřeny jako uM.

Stříbrný. Vzorky byly rozmraženy a analyzovány pomocí hmotnostní spektrometrie s indukčně vázaným plazmatem (EPA 6020a Rev. 1 2007). Sérum (0,5 ml) bylo doplněno na 2 ml zředěnou kyselinou (konečná koncentrace: 2 % HC1, 1 % HN03; jakost stopových kovů, Fisher, Fairlawn, NJ). Vzorky byly odstřeďovány (1290 g) po dobu 10 minut a přefiltrovány (0,45 um, PTFE; všechny polypropylenové stříkačky) do 15ml polypropylenových centrifugačních zkumavek. Vzorky byly analyzovány na Agilent 7500CE (Santa Clara, CA) indukčně vázaném hmotnostním spektrometru (ICPMS) s He jako plynem srážkové buňky a automatickým vzorkovačem ASX-510 (CETAC, Omaha, NB). Byl použit nebulizér Micromist (Glass Expansion, Pocasset, MA) (1,15 l/min nosného plynu; žádný přídavný plyn). Teplota rozprašovací komory byla 2 °C. RF výkon byl 1500 W. Ag byl kvantifikován pomocí Y jako vnitřního standardu. Kalibranty byly zředěny 2% HCl a 1% HNO3 připravenými z komerčních ICPMS roztoků (Ultra Scientific, N. Kingstown, RI; BDH Aristar, VWR, Radnor, PA) a byly v rozmezí 0,5-50 ng/ml. Kalibrace byla provedena váženou (1/cps) lineární regresí. Data byla opravena prázdným postupem. Hodnoty stříbra menší než 2 ng/ml byly překódovány na 2. Koncentrace stříbra jsou vyjádřeny jako ng/ml.

Hodnocení měkkých tkání Dáseň přilehlá k aplikaci DSF a sliznice byly obecně pozorovány na začátku léčby a 24 hodin po léčbě. Erytém, krvácení, bílé změny, ulcerace a pigmentace byly hodnoceny pomocí metod vyvinutých pro dřívější studii [1].