Farmacocinetica del fluoruro d'argento diamminico

Partecipanti Sei volontari sani (4 femmine, età media 36,2 anni, range 23-52 anni) sono stati reclutati tra i membri del personale dell'Universidad Católica de Santa María, Arequipa, Perù. I partecipanti non assumevano farmaci e avevano la maggior parte dei denti permanenti presenti. Ai partecipanti è stato chiesto di evitare pesce o tè per 12 ore prima dello studio e di non usare dentifricio al fluoro 4 ore prima. Il Comité de Etica de Investigacion, Universidad Católica de Santa María ha approvato lo studio ed è stato ottenuto il consenso informato.

Agente di studio DSF [Ag(NH3)2F, CAS RN 33040-28-7, Saforide, Toyo Seiyaku Kasei Co. Ltd. Osaka, Giappone] è stato utilizzato. DSF è limpido e incolore, con un debole odore di ammoniaca. La soluzione al 38% contiene tra il 24,4 e il 28,8% (p/v) argento (Ag) e 5,0-5,9% fluoruro (F). Le concentrazioni di Ag e F nel DSF utilizzato per lo studio erano rispettivamente del 24,9% e del 5,5% e il peso specifico era di 1,253 a 25°C (certificato di analisi lotto n. 155060). Il fluoruro di diammina argento è anche indicato in letteratura come fluoruro di diammina argento, fluoruro di diammina argento o fluoruro d'argento.

Procedure Sono stati trattati tre denti mascellari (cuspidi e premolari) nello stesso quadrante. Sono stati trattati tre denti perché questo era il numero medio di denti sensibili riportati in uno studio epidemiologico sugli adulti [5]. I denti erano privi di restauri o cavitazione. La superficie facciale è stata asciugata con garza di cotone e poi DSF è stato applicato all'area cervicale di ciascun dente. I denti sono stati isolati per evitare di bagnare lo spazzolino con la saliva. Ogni dente è stato rivestito con un microspazzolino separato, che è stato immerso nel DSF e pesato prima e dopo l'applicazione (Modello S2000, Kern & Sohn GmbH, Balingen, Germania). Per ogni partecipante è stata calcolata la somma delle differenze di peso del materiale applicato.

Prelievo di sangue Immediatamente prima dell'applicazione di DSF e poi di nuovo a circa 30 min, 1, 2,3 e 4 h dopo l'applicazione, è stato prelevato sangue da una vena periferica. I periodi di tempo sono stati scelti sulla base di un precedente studio di farmacocinetica della vernice al fluoruro [6]. Il sangue è stato trasferito in una provetta Vacutainer in plastica priva di fluoruro con attivatore di coagulo (BD Vacutainer Plus Plastic Serum Tube, BD Diagnostics, New Jersey). Le provette sono state centrifugate a 1100 g per 10 minuti e il siero è stato trasferito mediante pipetta di plastica in provette criogeniche di plastica. I campioni sono stati congelati e trasportati all'Università di Washington per l'analisi.

Analisi Fluoruro. I campioni sono stati scongelati e analizzati in duplicato o triplicato utilizzando il metodo di diffusione e rilevazione con esametildisilossano (HMDS) ed elettrodo Orion F-sensibile [7-8]. Per migliorare il rilevamento, la fase di pre-diffusione è stata omessa [9] e i sigilli sono stati completati prima di miscelare 1 mL di siero con 1 mL di HMDS, saturato 3 M H2SO4 [10]. La soluzione di intrappolamento era di 20 µmoli di NaOH 1 M. È stato essiccato per eliminare la variabilità dell'evaporazione e l'HMDS residuo prima di aggiungere 100 pi di acido acetico 3 M a un pH finale di 3,4. Gli standard erano 10 e 100 µM di fluoruro nella stessa concentrazione finale di NaOH e acido acetico corrispondenti a 1 e 10 µM F nei campioni. Gli elettrodi di riferimento ORION F e del tipo a manicotto sono stati accoppiati con un misuratore Accumet Basic da 0,1 mV (Thermo Fisher Scientific, Milwaukee WI).

I Vacutainer sono stati testati per il fluoruro aggiungendo plasma bovino a 2 provette e lasciandole riposare per una notte prima di combinare i 2 campioni e confrontarli con il plasma posto direttamente nelle piastre di diffusione. Le concentrazioni medie (μM±SD) erano 0,34±0,014 e 0,32 ± 0,012, rispettivamente. Pertanto, meno del 2% di F nei campioni di siero proveniva dai Vacutainer e dal potenziatore della coagulazione. Il recupero (media ± SD) di 1 nmole/ml di F aggiunto al siero bovino è stato del 101±4%. I livelli di fluoruro sono stati mediati e sono espressi come µM.

Argento. I campioni sono stati scongelati e analizzati mediante spettrometria di massa plasma accoppiata induttivamente (EPA 6020a Rev.1 2007). Il siero (0,5 mL) è stato portato a 2 mL con acido diluito (concentrazione finale: 2% HCl, 1% HNO3; traccia di grado metallico, Fisher, Fairlawn, NJ). I campioni sono stati centrifugati (1290 g) per 10 minuti e filtrati (0,45 µm, PTFE; siringa tutta in polipropilene) in provette da centrifuga in polipropilene da 15 mL. I campioni sono stati analizzati su uno spettrometro di massa ad accoppiamento induttivo (ICPMS) Agilent 7500CE (Santa Clara, CA) con He come gas della cella di collisione e un campionatore automatico ASX-510 (CETAC, Omaha, NB). È stato utilizzato un nebulizzatore Micromist (Glass Expansion, Pocasset, MA) (gas di trasporto 1,15 L/min; nessun gas di trucco). La temperatura della camera di nebulizzazione era di 2°C. La potenza RF era di 1500 W. Ag è stato quantificato utilizzando Y come standard interno. I calibranti sono stati diluiti con 2% HCl e 1% HNO3 preparati da soluzioni commerciali di grado ICPMS (Ultra Scientific, N. Kingstown, RI; BDH Aristar, VWR, Radnor, PA) e variavano da 0,5 a 50 ng/mL. La calibrazione è stata effettuata mediante regressione lineare ponderata (1/cps). I dati sono stati corretti dalla procedura in bianco. I valori di argento inferiori a 2 ng/mL sono stati ricodificati a 2. Le concentrazioni di argento sono espresse in ng/mL.

Valutazione dei tessuti molli La gengiva adiacente all'applicazione di DSF e la mucosa generalmente sono state osservate al basale e 24 ore dopo il trattamento. Eritema, sanguinamento, alterazioni del bianco, ulcerazione e pigmentazione sono stati valutati utilizzando metodi sviluppati per uno studio precedente [1].