A Palbociclibre adott rezisztencia és immunválasz emlőrákban

A kutatók azt javasolják, hogy végezzenek biomarker- és molekuláris profilalkotási vizsgálatot hosszirányban párosított tumorbiopsziákon és szérumokon, akik hormonreceptor-pozitív (HR+) metasztatikus emlőrákban (BC) szenvednek, és Palbociclib-bal (Palbo) kezelték endokrin terápiával kombinálva.

A kutatók azt tervezik, hogy daganatbiopsziát és vérmintát vesznek, mind a kezelés előtt, mind a progresszió után 40 olyan betegtől, akiknél szerzett rezisztencia alakul ki a Palbo + endokrin kombinációs kezeléssel szemben. Minden vizsgálatot párhuzamosan végeznek mind a kezelés előtti, mind a kezelés utáni mintákon, hogy azonosítsák azokat a különbségeket, amelyek a szerzett rezisztenciát okozhatják. A ciklin E1 és E2 szintjét IHC fogja értékelni a tumorbiopsziákon. A neuregulin-1 szintjét ELISA-vizsgálattal értékeljük szérumon. A tumorbiopsziákat a teljes exome szekvenálás (WES) és a teljes transzkriptom szekvenálás (RNS-Seq) segítségével tovább profilozzák. Az egyező vérmintákat WES-nek vetjük alá a szomatikus mutációk kimutatásának megkönnyítése érdekében. A páros tumorbiopsziákon a TIL-markerek immunhisztokémiai (IHC) analízisén mennek keresztül a Palbo-indukált változások értékelésére. Végül a házon belüli keringő tumor DNS (ctDNS) vizsgálatot alkalmazzuk, amely egy egyedi tervezésű panelt alkalmaz a Palbo szerzett rezisztencia tanulmányozására, 40 pár plazmaminta elemzésére. Az egyedi ctDNS panelt kibővítjük, hogy az e vizsgálat során azonosított további mutációkat is tartalmazzon, amelyek szerzett rezisztenciát eredményeznek.

A Palbo-kezelés intratumorális TIL-ekre gyakorolt ​​hatásának további értékelése érdekében a vizsgálók azt tervezik, hogy 20 betegtől páros tumorbiopsziát és megfelelő vérmintákat vesznek majd a kiinduláskor és két időpontban (6 hét, 12 hét) a Palbo-kezelés során. És kiválasztják azokat a metasztatikus BC-betegeket, akiknél stabil betegségek (SD) mutatkoznak a Palbo-kezelésre adott válaszreakcióként, mielőtt megtudnák, hogy rendelkezésre áll-e a progresszió utáni biopszia. A tumorbiopsziákat WES, RNA-Seq és IHC analízisnek vetik alá. Ezen túlmenően a kutatók azt tervezik, hogy számszerűsítik az immunsejt-alpopulációk bőségét az illesztett vérmintákban áramlási citometria (FACS) segítségével, hogy felmérjék a Palbo-kezelésnek a szisztematikus immunitásra gyakorolt ​​hatását.

Míg a kezelés alatti mintákat a Palbo-kezelés megkezdése után 6 hét és 12 hét után lehet gyűjteni, átlagosan körülbelül 18 hónap kell ahhoz, hogy a kezdetben kezelt, késői stádiumú HR+ emlőrákos betegeknél kialakuljon szerzett rezisztencia. Becslések szerint a visszaesett esetek 40%-ánál lesz sikeres biopszia a beleegyezés hiánya vagy a nehezen operálható biopsziák, például a csak csontmetasztázisok miatt. Ezért a vizsgálók azt tervezik, hogy 2018 második negyedévéig körülbelül 100 betegtől származó kezelés előtti biopsziát és vérmintát rögzítenek annak érdekében, hogy 40 posztprogressziós biopsziát párosítva gyűjtsenek össze 2 éves időkereten belül. FFPE tárgylemezeket készítenek az összes tumorbiopsziából, beleértve a kiindulási 100 esetet is, és H&E festésnek vetik alá. A kutatók gépi tanulással és a H&E adatok digitális képalkotó elemzésével észlelik és számszerűsítik a TIL-eket.