Ezt az oldalt automatikusan lefordították, és a fordítás pontossága nem garantált. Kérjük, olvassa el a angol verzió forrásszöveghez.

Nukleáris miozin VI – terápiás célpont a mellrákban

2019. november 11. frissítette: Karina Cox, Maidstone & Tunbridge Wells NHS Trust

Nukleáris miozin VI – terápiás cél az ösztrogénreceptor-pozitív emlőrákban?

A génexpresszió, a genetikai kód átvitele a sejtfehérjékbe az egyik legalapvetőbb folyamat az élő sejtekben. Ezt a folyamatot fehérjealapú molekuláris gépek, úgynevezett RNS-polimerázok irányítják, amelyek a DNS-szekvenciát beolvasva hírvivő RNS-t (mRNS) állítanak elő, amelyet a sejtes gépezet lefordít fehérjék előállítására. Sejtjeink kidolgozott szabályozási mechanizmusokat fejlesztettek ki e molekuláris gépezetek szabályozására, és e szabályozás megbomlása olyan betegségekhez vezet, mint a rák.

A közelmúltban a miozinoknak nevezett molekulákat fedezték fel a sejt genetikai tárolójában (a sejtmagban), ahol kölcsönhatásba lépnek az RNS-polimerázokkal a fehérjetermelés szabályozása érdekében. Ez azért érdekes, mert a miozinok általában a sejtmagon kívül találhatók, szállítva a sejtes rakományt vagy izomösszehúzódást generálva. Az emlőráksejtekben a miozin bőségesen fordul elő, és kölcsönhatásba lép az ösztrogénreceptorral. Az Egyesült Királyságban a mellrák nagy része ösztrogénreceptor-pozitív, és ennek a receptornak az aktiválása a rákos sejtek növekedését szabályozó fontos tényező. Úgy tűnik, hogy az ösztrogénreceptor aktiválása a miozintól függ, és ez a kutatási projekt azt vizsgálja, hogy a miozinok hogyan irányulnak meghatározott génekre, és hogyan szabályozzák őket. Ez nagyban javítja majd a nukleáris miozinok ösztrogénreceptor-pozitív emlőrákban betöltött szerepének megértését, és új terápiás célpontot azonosíthat a jövőbeni gyógyszerfejlesztés számára.

A tanulmány áttekintése

Állapot

Ismeretlen

Körülmények

Részletes leírás

Cél és tervezés A projekt elsődleges célja a miozin VI (MVI) és az ösztrogénreceptor közötti újonnan felfedezett kölcsönhatás jelentőségének megértése emlőráksejtekben. A tanulmány azt vizsgálja, hogy az MVI milyen típusú géneket szabályoz, és hogy az MVI-ösztrogénreceptor kölcsönhatás helyei (nukleusz vagy citoplazma) fontosak-e az ösztrogénreceptor-célpontok expressziójához. Az emlőráksejtekben az ösztrogénreceptorok mutálódnak, hogy véglegesen aktiválódjanak, ami gátlástalan tumornövekedéshez vezet. Az MVI szerepének vizsgálata ebben a metabolikus forgatókönyvben potenciális terápiás ablakot tárhat fel a hormonrefrakter ösztrogénreceptor-pozitív emlőrák számára.

E kérdések megválaszolása érdekében a módszertan a kialakult sejtvonalakon és a betegmintákon végzett kísérletek kombinációját fogja használni.

A kutatási javaslat Dr. Chris Toseland (akinek csoportja az MVI és az ösztrogénreceptor közötti kapcsolatot azonosította) együttműködése a Kenti Egyetemen, valamint a Maidstone és Tunbridge Wells NHS Trust emlősebészeti, patológiai és kutatási és fejlesztési osztálya.

Toborzás Az elsődleges emlőrák diagnózisát és az első kezelésként történő műtétről szóló döntést követően a heti multidiszciplináris találkozón azonosítják a potenciális betegeket. A vizsgálat tényleges magyarázata a kezelő emlősebésszel folytatott első kezeléstervezési konzultáció során történik. A páciens írásos tájékoztatást kap a vizsgálatról, valamint egy kutatónővér/emlőgondozó szakápoló elérhetőségi számát, amelyet felhívhat, ha részt kíván venni a vizsgálatban. Karina Cox kisasszonnyal egy második klinikai időpontot is megbeszélnek, hogy újra megvitassák a vizsgálatot és megszerezzék az írásos beleegyezést. A konzultáns sebész ismeri a beleegyezés folyamatát, és eldönti, hogy a beteg képes-e beleegyezését adni a vizsgálatba. Kizárunk minden olyan beteget, akinek anyagcserezavara, jelentős társbetegsége és lokálisan előrehaladott vagy áttétes betegsége van, valamint azokat, akiknek a kórtörténetében rákkezelés szerepel, mivel a vizsgálat eredményeit befolyásolhatja az alapbetegségük, a korábbi kezelésük vagy a jelenlegi gyógyszeres kezelésük. .

Titoktartás A tanulmány a „Caldicott elvek” szerint történik. A vizsgálatba bevont betegek egyedi azonosító számot kapnak, amelyet a Kenti Egyetemnek kísérletekre küldött mintákon használnak majd. A klinikai társkutató biztonságos adatbázist tart fenn a betegek azonosítására alkalmas adatokból, beleértve a demográfiai és klinikai-patológiai tumoradatokat.

Összeférhetetlenség Ebben a tanulmányban nincs összeférhetetlenség. A kutatással kapcsolatos minden publikációt összefoglalunk, és kiosztunk a résztvevő betegeknek.

A szövetmintákat nem tároljuk korlátlan ideig. A frissen fagyasztott mintákból származó összes szövetet felhasználjuk a kísérletekhez. Az elemzést követően a paraffinlemezeket visszaküldik a Kenti Egyetemről a Maidstone és Tunbridge Wells Patológiai Osztályra.

Tanulmány típusa

Megfigyelő

Beiratkozás (Várható)

120

Kapcsolatok és helyek

Ez a rész a vizsgálatot végzők elérhetőségeit, valamint a vizsgálat lefolytatásának helyére vonatkozó információkat tartalmazza.

Tanulmányi helyek

    • Kent
      • Maidstone, Kent, Egyesült Királyság, ME16 9QQ
        • Toborzás
        • Maidstone and Tunbridge Wells NHS Trust
        • Kapcsolatba lépni:

Részvételi kritériumok

A kutatók olyan embereket keresnek, akik megfelelnek egy bizonyos leírásnak, az úgynevezett jogosultsági kritériumoknak. Néhány példa ezekre a kritériumokra a személy általános egészségi állapota vagy a korábbi kezelések.

Jogosultsági kritériumok

Tanulmányozható életkorok

18 év (FELNŐTT, OLDER_ADULT)

Egészséges önkénteseket fogad

Igen

Tanulmányozható nemek

Női

Mintavételi módszer

Nem valószínűségi minta

Tanulmányi populáció

A korai invazív emlőrákkal diagnosztizált, elsődleges műtéten átesett betegektől szövetet nyernek. A Maidstone Kórházban 100 újonnan diagnosztizált T2 (>2 cm) tapintható invazív emlőrákos nőt veszünk fel elsődleges műtéti kezelésre.

Leírás

Bevételi kritériumok:

  • A korai emlőrák klinikai diagnózisa
  • 2 cm-nél nagyobb tapintható daganat
  • Elsődleges sebészeti kezelésre tervezett

Kizárási kritériumok:

  • Lokálisan előrehaladott emlőrák
  • Áttétes emlőrák
  • Jelentős társbetegségek (ASA 4 vagy magasabb)
  • Az emlőrák korábbi története

Tanulási terv

Ez a rész a vizsgálati terv részleteit tartalmazza, beleértve a vizsgálat megtervezését és a vizsgálat mérését.

Hogyan készül a tanulmány?

Tervezési részletek

Kohorszok és beavatkozások

Csoport / Kohorsz
Beavatkozás / kezelés
Esetek

A Maidstone Kórházban 100 újonnan diagnosztizált T2 (>2 cm) tapintható invazív emlőrákos nőt veszünk fel elsődleges műtéti kezelésre. Kizárunk minden olyan beteget, akinek anyagcserezavara, jelentős társbetegsége és lokálisan előrehaladott vagy áttétes betegsége van, valamint azokat, akiknek a kórtörténetében daganatos kezelés szerepel. Adatokat fogunk gyűjteni a tumor méretéről, fokozatáról és fenotípusáról, valamint az ER-ről, a progeszteron receptorról (PR) és a Her-2 expressziós állapotáról, valamint a betegek demográfiai adatairól.

Megvizsgáljuk a Myosin VI és az ösztrogén receptor kapcsolatát.

  1. Génexpressziós elemzés – 100 mg szövetből RNS-t vonnak ki, majd RT-qPCR-nek vetik alá, hogy meghatározzák több gén, köztük az MVI és az ER Targets relatív expressziós szintjét. Ugyanezt a megközelítést alkalmazzuk annak meghatározására, hogy az MVI mely izoformái expresszálódnak a szövetben.
  2. Fehérjetartalom-elemzés – A teljes fehérjét 100 mg szövetből vonják ki, és Western-blot analízist alkalmaznak az MVI relatív mennyiségének meghatározására. Ezenkívül sejtfrakcionálást fogunk használni a nukleáris és citoplazmatikus fehérje relatív mennyiségének meghatározására.
  3. Genomikai analízis - Chromatin-immunoprecipitation (ChIP) kísérleteket 100 mg szövetmintán végeztünk. Itt meghatározzuk az MVI lokalizációját a genomban a különböző szöveteken belül.
Vezérlők
A kontroll emlőszövet egy csoportját 20, jóindulatú sebészeti emlőkezelésen áteső betegtől nyerik ki. Azoknál a kontroll betegeknél, akiknél redukciós mammoplasztikát végeznek, a kimetszett szövetből magbiopsziát vesznek, de a más típusú jóindulatú műtéten átesett betegeknél extra magbiopsziát vesznek a kimetszett elváltozást körülvevő mellszövetből.
  1. Génexpressziós elemzés – 100 mg szövetből RNS-t vonnak ki, majd RT-qPCR-nek vetik alá, hogy meghatározzák több gén, köztük az MVI és az ER Targets relatív expressziós szintjét. Ugyanezt a megközelítést alkalmazzuk annak meghatározására, hogy az MVI mely izoformái expresszálódnak a szövetben.
  2. Fehérjetartalom-elemzés – A teljes fehérjét 100 mg szövetből vonják ki, és Western-blot analízist alkalmaznak az MVI relatív mennyiségének meghatározására. Ezenkívül sejtfrakcionálást fogunk használni a nukleáris és citoplazmatikus fehérje relatív mennyiségének meghatározására.
  3. Genomikai analízis - Chromatin-immunoprecipitation (ChIP) kísérleteket 100 mg szövetmintán végeztünk. Itt meghatározzuk az MVI lokalizációját a genomban a különböző szöveteken belül.

Mit mér a tanulmány?

Elsődleges eredményintézkedések

Eredménymérő
Intézkedés leírása
Időkeret
A miozin VI génexpressziója és az ösztrogénreceptor célpontjai a tumorszövetben.
Időkeret: 24 óra
RT-qPCR kísérletek a Myosin VI és az ösztrogénreceptor célpontok relatív expressziójának meghatározására tumor eredetű RNS-ben, és összehasonlítják a kontroll emlőszövettel.
24 óra
A Myosin VI fehérje mennyiségi meghatározása tumorszövetben.
Időkeret: 24 óra.
Western-blot analízis és sejtfrakcionálás a Myosin VI relatív mennyiségének meghatározására a nukleáris és citoplazmatikus kompartmentekben 100 mg tumorszövetből extrahált teljes fehérjéhez viszonyítva, és összehasonlítjuk a kontrollszövettel.
24 óra.
A Myosin VI lokalizációja a tumor genomon
Időkeret: 24 óra.
Kromatin-immunprecipitációs kísérletek a Myosin VI helyzetének meghatározására a tumorgenomban és összehasonlításra a kontrollszövettel.
24 óra.

Másodlagos eredményintézkedések

Eredménymérő
Intézkedés leírása
Időkeret
A nukleáris miozin VI és az ösztrogén receptor lokalizáció összehasonlítása a különböző emlőrák prognosztikai csoportok között.
Időkeret: 3 hónap
Immunhisztokémiai kísérletek paraffinnal megőrzött daganatszöveten a nukleáris miozin VI és ösztrogénreceptorok jelenlétének meghatározására, valamint pontozási rendszer segítségével az emlőrák prognosztikai csoportjai és a kontrollszövet összehasonlítása.
3 hónap

Együttműködők és nyomozók

Itt találhatja meg a tanulmányban érintett személyeket és szervezeteket.

Együttműködők

Nyomozók

  • Tanulmányi igazgató: Hazel Everest, Maidstone and Tunbridge Wells NHS Trust

Publikációk és hasznos linkek

A vizsgálattal kapcsolatos információk beviteléért felelős személy önkéntesen bocsátja rendelkezésre ezeket a kiadványokat. Ezek bármiről szólhatnak, ami a tanulmányhoz kapcsolódik.

Általános kiadványok

Tanulmányi rekorddátumok

Ezek a dátumok nyomon követik a ClinicalTrials.gov webhelyre benyújtott vizsgálati rekordok és összefoglaló eredmények benyújtásának folyamatát. A vizsgálati feljegyzéseket és a jelentett eredményeket a Nemzeti Orvostudományi Könyvtár (NLM) felülvizsgálja, hogy megbizonyosodjon arról, hogy megfelelnek-e az adott minőség-ellenőrzési szabványoknak, mielőtt közzéteszik őket a nyilvános weboldalon.

Tanulmány főbb dátumok

Tanulmány kezdete (TÉNYLEGES)

2019. május 5.

Elsődleges befejezés (VÁRHATÓ)

2020. december 1.

A tanulmány befejezése (VÁRHATÓ)

2020. december 1.

Tanulmányi regisztráció dátumai

Először benyújtva

2018. január 11.

Először nyújtották be, amely megfelel a minőségbiztosítási kritériumoknak

2018. február 9.

Első közzététel (TÉNYLEGES)

2018. február 12.

Tanulmányi rekordok frissítései

Utolsó frissítés közzétéve (TÉNYLEGES)

2019. november 13.

Az utolsó frissítés elküldve, amely megfelel a minőségbiztosítási kritériumoknak

2019. november 11.

Utolsó ellenőrzés

2019. november 1.

Több információ

A tanulmányhoz kapcsolódó kifejezések

Terv az egyéni résztvevői adatokhoz (IPD)

Tervezi megosztani az egyéni résztvevői adatokat (IPD)?

NEM

Gyógyszer- és eszközinformációk, tanulmányi dokumentumok

Egy amerikai FDA által szabályozott gyógyszerkészítményt tanulmányoz

Nem

Egy amerikai FDA által szabályozott eszközterméket tanulmányoz

Nem

Ezt az információt közvetlenül a clinicaltrials.gov webhelyről szereztük be, változtatás nélkül. Ha bármilyen kérése van vizsgálati adatainak módosítására, eltávolítására vagy frissítésére, kérjük, írjon a következő címre: register@clinicaltrials.gov. Amint a változás bevezetésre kerül a clinicaltrials.gov oldalon, ez a webhelyünkön is automatikusan frissül. .

Iratkozz fel