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Miosina Nuclear VI - um Alvo Terapêutico no Câncer de Mama

11 de novembro de 2019 atualizado por: Karina Cox, Maidstone & Tunbridge Wells NHS Trust

Miosina Nuclear VI - um Alvo Terapêutico no Câncer de Mama Positivo para Receptor de Estrogênio?

A expressão gênica, a transferência do código genético para as proteínas celulares, é um dos processos mais fundamentais nas células vivas. Esse processo é orquestrado por máquinas moleculares baseadas em proteínas, chamadas polimerases de RNA, que leem a sequência de DNA para gerar o RNA mensageiro (mRNA), que é traduzido pelo maquinário celular para produzir proteínas. Nossas células desenvolveram elaborados mecanismos de regulação para controlar essas máquinas moleculares e uma falha nessa regulação leva a doenças como o câncer.

Recentemente, moléculas chamadas miosinas foram descobertas no compartimento de armazenamento genético da célula (o núcleo), onde interagem com polimerases de RNA para regular a produção de proteínas. Isso é interessante porque as miosinas geralmente são encontradas fora do núcleo transportando carga celular ou gerando contração muscular. Nas células de câncer de mama, a miosina é abundante e interage com o receptor de estrogênio. A maioria dos casos de câncer de mama no Reino Unido é positiva para receptores de estrogênio e a ativação desse receptor é um fator importante que controla o crescimento das células cancerígenas. A ativação do receptor de estrogênio parece ser dependente da miosina e este projeto de pesquisa investigará como as miosinas são direcionadas para genes específicos e como elas próprias são reguladas. Isso aumentará muito nossa compreensão do papel das miosinas nucleares no câncer de mama positivo para receptores de estrogênio e pode identificar um novo alvo terapêutico para o desenvolvimento futuro de medicamentos.

Visão geral do estudo

Status

Desconhecido

Condições

Descrição detalhada

Finalidade e Design O principal objetivo deste projeto é entender o significado da recém-descoberta interação entre a miosina VI (MVI) e o receptor de estrogênio em células de câncer de mama. O estudo investigará os tipos de genes que o MVI regula e se os locais de interação MVI - receptor de estrogênio (núcleo ou citoplasma) são importantes para a expressão dos alvos dos receptores de estrogênio. Nas células de câncer de mama, os receptores de estrogênio podem sofrer mutações para se tornar permanentemente ativados, levando ao crescimento desenfreado do tumor. Investigar o papel do MVI neste cenário metabólico pode revelar uma janela terapêutica potencial para câncer de mama positivo para receptor de estrogênio refratário a hormônio.

Para responder a essas perguntas, a metodologia usará a combinação de experimentos em linhagens de células estabelecidas e amostras de pacientes.

A proposta de pesquisa é um esforço colaborativo entre o Dr. Chris Toseland (cujo grupo identificou a ligação entre MVI e o receptor de estrogênio) da Universidade de Kent e os departamentos de Cirurgia de Mama, Patologia e Pesquisa e Desenvolvimento de Maidstone e Tunbridge Wells NHS Trust.

Recrutamento Pacientes potenciais para recrutamento serão identificados na reunião multidisciplinar semanal após um diagnóstico de câncer de mama primário e uma decisão de prosseguir com a cirurgia como primeiro tratamento. A explicação real do estudo ocorrerá durante a primeira consulta de planejamento do tratamento com o cirurgião de mama. A paciente receberá informações por escrito sobre o estudo, bem como um número de contato de uma enfermeira pesquisadora/enfermeira especialista em cuidados com a mama para que ela possa ligar se desejar ser incluída no estudo. Uma segunda consulta clínica será marcada com a co-investigadora, Srta. Karina Cox, para rediscutir o estudo e obter o consentimento por escrito. O cirurgião consultor está familiarizado com o processo de consentimento e determinará se o paciente tem capacidade para dar consentimento para o estudo. Excluiremos todos os pacientes com distúrbio metabólico, comorbidades significativas e doença localmente avançada ou metastática, bem como aqueles com histórico anterior de tratamento contra o câncer, pois os resultados do estudo podem ser afetados por seu distúrbio subjacente, tratamento anterior ou medicação atual .

Confidencialidade O estudo será conduzido dentro dos "Princípios de Caldicott". Os pacientes inscritos no estudo receberão um número de identificação exclusivo que será usado em amostras enviadas à Universidade de Kent para experimentos. O co-investigador clínico manterá um banco de dados seguro de informações identificáveis ​​do paciente, incluindo dados demográficos e clínico-patológicos do tumor.

Conflito de Interesses Não há conflitos de interesses com este estudo. Quaisquer publicações relacionadas a esta pesquisa serão resumidas e distribuídas aos pacientes participantes.

As amostras de tecido não serão armazenadas indefinidamente. Todo o tecido dos espécimes frescos congelados será usado para os experimentos. As lâminas de parafina, uma vez analisadas, serão devolvidas da Universidade de Kent ao Departamento de Patologia de Maidstone e Tunbridge Wells.

Tipo de estudo

Observacional

Inscrição (Antecipado)

120

Contactos e Locais

Esta seção fornece os detalhes de contato para aqueles que conduzem o estudo e informações sobre onde este estudo está sendo realizado.

Locais de estudo

    • Kent
      • Maidstone, Kent, Reino Unido, ME16 9QQ
        • Recrutamento
        • Maidstone and Tunbridge Wells NHS Trust
        • Contato:

Critérios de participação

Os pesquisadores procuram pessoas que se encaixem em uma determinada descrição, chamada de critérios de elegibilidade. Alguns exemplos desses critérios são a condição geral de saúde de uma pessoa ou tratamentos anteriores.

Critérios de elegibilidade

Idades elegíveis para estudo

18 anos a 85 anos (ADULTO, OLDER_ADULT)

Aceita Voluntários Saudáveis

Sim

Gêneros Elegíveis para o Estudo

Fêmea

Método de amostragem

Amostra Não Probabilística

População do estudo

O tecido será obtido de pacientes com diagnóstico de câncer de mama invasivo precoce submetidos à cirurgia primária. Vamos inscrever 100 mulheres que foram recentemente diagnosticadas com câncer de mama invasivo palpável T2 (> 2 cm) com tratamento cirúrgico primário no Maidstone Hospital.

Descrição

Critério de inclusão:

  • Diagnóstico clínico do câncer de mama inicial
  • Tumor palpável maior que 2cm
  • Agendado para tratamento cirúrgico primário

Critério de exclusão:

  • Câncer de mama localmente avançado
  • câncer de mama metastático
  • Comorbidades significativas (ASA 4 ou superior)
  • História pregressa de câncer de mama

Plano de estudo

Esta seção fornece detalhes do plano de estudo, incluindo como o estudo é projetado e o que o estudo está medindo.

Como o estudo é projetado?

Detalhes do projeto

Coortes e Intervenções

Grupo / Coorte
Intervenção / Tratamento
Casos

Vamos inscrever 100 mulheres que foram recentemente diagnosticadas com câncer de mama invasivo palpável T2 (> 2 cm) com tratamento cirúrgico primário no Maidstone Hospital. Excluiremos todos os pacientes com distúrbio metabólico, comorbidades significativas e doença localmente avançada ou metastática, bem como aqueles com história anterior de tratamento de câncer. Coletaremos dados sobre tamanho, grau e fenótipo do tumor, bem como ER, receptor de progesterona (PR) e status de expressão de Her-2 e informações demográficas do paciente.

Investigaremos a Associação da Miosina VI com o receptor de estrogênio.

  1. Análise de expressão gênica - O RNA será extraído de 100mg de tecido e então submetido a RT-qPCR para determinar os níveis de expressão relativa de vários genes, incluindo MVI e ER Targets. Usaremos a mesma abordagem para determinar quais isoformas de MVI são expressas no tecido.
  2. Análise do conteúdo de proteína - A proteína total será extraída de 100 mg de tecido e a análise de western-blot será usada para determinar as quantidades relativas de MVI. Além disso, usaremos o fracionamento celular para determinar as quantidades relativas de proteína nuclear versus citoplasmática.
  3. Análise genômica - Experimentos de imunoprecipitação de cromatina (ChIP) serão realizados em 100 mg de amostra de tecido. Aqui vamos determinar a localização do MVI no genoma dentro dos diferentes tecidos.
Controles
Uma coorte de tecido mamário de controle será obtida de 20 pacientes submetidos a procedimentos cirúrgicos benignos da mama. Para aqueles pacientes de controle com mamoplastias de redução, o tecido excisado será biopsiado, mas os pacientes com outros tipos de cirurgia benigna terão uma biópsia extra retirada do tecido mamário ao redor da lesão sendo excisada.
  1. Análise de expressão gênica - O RNA será extraído de 100mg de tecido e então submetido a RT-qPCR para determinar os níveis de expressão relativa de vários genes, incluindo MVI e ER Targets. Usaremos a mesma abordagem para determinar quais isoformas de MVI são expressas no tecido.
  2. Análise do conteúdo de proteína - A proteína total será extraída de 100 mg de tecido e a análise de western-blot será usada para determinar as quantidades relativas de MVI. Além disso, usaremos o fracionamento celular para determinar as quantidades relativas de proteína nuclear versus citoplasmática.
  3. Análise genômica - Experimentos de imunoprecipitação de cromatina (ChIP) serão realizados em 100 mg de amostra de tecido. Aqui vamos determinar a localização do MVI no genoma dentro dos diferentes tecidos.

O que o estudo está medindo?

Medidas de resultados primários

Medida de resultado
Descrição da medida
Prazo
Expressão gênica de alvos de receptores de miosina VI e estrogênio no tecido tumoral.
Prazo: 24 horas
Experimentos de RT-qPCR para determinar a expressão relativa de alvos de receptores de miosina VI e estrogênio em RNA derivado de tumor e comparar com tecido mamário de controle.
24 horas
Quantificação da proteína Miosina VI no tecido tumoral.
Prazo: 24 horas.
Análise de Western-blot e fracionamento celular para determinar as quantidades relativas de Miosina VI em comparação com a proteína total extraída de 100mg de tecido tumoral nos compartimentos nuclear e citoplasmático e comparar com o tecido controle.
24 horas.
Localização da Miosina VI no genoma tumoral
Prazo: 24 horas.
Experimentos de imunoprecipitação de cromatina para determinar a posição da Miosina VI no genoma do tumor e comparar com o tecido controle.
24 horas.

Medidas de resultados secundários

Medida de resultado
Descrição da medida
Prazo
Comparação da localização nuclear da miosina VI e do receptor de estrogênio entre diferentes grupos prognósticos de câncer de mama.
Prazo: 3 meses
Experimentos de imuno-histoquímica em tecido tumoral preservado em parafina para determinar a presença de miosina VI nuclear e receptores de estrogênio e, usando um sistema de pontuação, comparar entre grupos prognósticos de câncer de mama e tecido controle.
3 meses

Colaboradores e Investigadores

É aqui que você encontrará pessoas e organizações envolvidas com este estudo.

Colaboradores

Investigadores

  • Diretor de estudo: Hazel Everest, Maidstone and Tunbridge Wells NHS Trust

Publicações e links úteis

A pessoa responsável por inserir informações sobre o estudo fornece voluntariamente essas publicações. Estes podem ser sobre qualquer coisa relacionada ao estudo.

Publicações Gerais

Datas de registro do estudo

Essas datas acompanham o progresso do registro do estudo e os envios de resumo dos resultados para ClinicalTrials.gov. Os registros do estudo e os resultados relatados são revisados ​​pela National Library of Medicine (NLM) para garantir que atendam aos padrões específicos de controle de qualidade antes de serem publicados no site público.

Datas Principais do Estudo

Início do estudo (REAL)

5 de maio de 2019

Conclusão Primária (ANTECIPADO)

1 de dezembro de 2020

Conclusão do estudo (ANTECIPADO)

1 de dezembro de 2020

Datas de inscrição no estudo

Enviado pela primeira vez

11 de janeiro de 2018

Enviado pela primeira vez que atendeu aos critérios de CQ

9 de fevereiro de 2018

Primeira postagem (REAL)

12 de fevereiro de 2018

Atualizações de registro de estudo

Última Atualização Postada (REAL)

13 de novembro de 2019

Última atualização enviada que atendeu aos critérios de controle de qualidade

11 de novembro de 2019

Última verificação

1 de novembro de 2019

Mais Informações

Termos relacionados a este estudo

Plano para dados de participantes individuais (IPD)

Planeja compartilhar dados de participantes individuais (IPD)?

NÃO

Informações sobre medicamentos e dispositivos, documentos de estudo

Estuda um medicamento regulamentado pela FDA dos EUA

Não

Estuda um produto de dispositivo regulamentado pela FDA dos EUA

Não

Essas informações foram obtidas diretamente do site clinicaltrials.gov sem nenhuma alteração. Se você tiver alguma solicitação para alterar, remover ou atualizar os detalhes do seu estudo, entre em contato com register@clinicaltrials.gov. Assim que uma alteração for implementada em clinicaltrials.gov, ela também será atualizada automaticamente em nosso site .

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