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Kernmyosin VI – ein therapeutisches Ziel bei Brustkrebs

11. November 2019 aktualisiert von: Karina Cox, Maidstone & Tunbridge Wells NHS Trust

Nukleares Myosin VI – ein therapeutisches Ziel bei Östrogenrezeptor-positivem Brustkrebs?

Die Genexpression, die Übertragung des genetischen Codes in zelluläre Proteine, ist einer der grundlegendsten Prozesse in lebenden Zellen. Dieser Prozess wird von proteinbasierten molekularen Maschinen, sogenannten RNA-Polymerasen, orchestriert, die die DNA-Sequenz lesen, um Boten-RNA (mRNA) zu erzeugen, die von der zellulären Maschinerie übersetzt wird, um Proteine ​​herzustellen. Unsere Zellen haben ausgeklügelte Regulationsmechanismen entwickelt, um diese molekularen Maschinen zu steuern, und ein Zusammenbruch dieser Regulation führt zu Krankheiten wie Krebs.

Kürzlich wurden Moleküle namens Myosine im genetischen Speicher der Zelle (dem Zellkern) entdeckt, wo sie mit RNA-Polymerasen interagieren, um die Proteinproduktion zu regulieren. Dies ist interessant, da Myosine normalerweise außerhalb des Zellkerns gefunden werden, wo sie zelluläre Fracht transportieren oder Muskelkontraktionen erzeugen. In Brustkrebszellen ist Myosin reichlich vorhanden und interagiert mit dem Östrogenrezeptor. Die Mehrheit der Brustkrebsfälle in Großbritannien ist Östrogenrezeptor-positiv und die Aktivierung dieses Rezeptors ist ein wichtiger Faktor, der das Wachstum von Krebszellen steuert. Die Aktivierung von Östrogenrezeptoren scheint von Myosin abhängig zu sein, und dieses Forschungsprojekt wird untersuchen, wie Myosine auf bestimmte Gene gerichtet sind und wie sie selbst reguliert werden. Dies wird unser Verständnis der Rolle von Kernmyosinen bei Östrogenrezeptor-positivem Brustkrebs erheblich verbessern und möglicherweise ein neues therapeutisches Ziel für die zukünftige Arzneimittelentwicklung identifizieren.

Studienübersicht

Status

Unbekannt

Bedingungen

Detaillierte Beschreibung

Zweck und Design Das Hauptziel dieses Projekts ist es, die Bedeutung der neu entdeckten Wechselwirkung zwischen Myosin VI (MVI) und dem Östrogenrezeptor in Brustkrebszellen zu verstehen. Die Studie wird untersuchen, welche Arten von Genen MVI reguliert und ob die Stellen der MVI-Östrogenrezeptor-Wechselwirkungen (Zellkern oder Zytoplasma) für die Expression von Östrogenrezeptorzielen wichtig sind. In Brustkrebszellen können Östrogenrezeptoren mutieren, um dauerhaft aktiviert zu werden, was zu einem ungehemmten Tumorwachstum führt. Die Untersuchung der Rolle von MVI in diesem Stoffwechselszenario könnte ein potenzielles therapeutisches Fenster für hormonrefraktären Östrogenrezeptor-positiven Brustkrebs aufzeigen.

Um diese Fragen zu beantworten, wird die Methodik eine Kombination von Experimenten an etablierten Zelllinien und Patientenproben verwenden.

Der Forschungsvorschlag ist eine gemeinsame Anstrengung von Dr. Chris Toseland (dessen Gruppe die Verbindung zwischen MVI und dem Östrogenrezeptor identifiziert hat) an der University of Kent und den Abteilungen für Brustchirurgie, Pathologie und Forschung und Entwicklung von Maidstone und Tunbridge Wells NHS Trust.

Rekrutierung Potenzielle Patientinnen für die Rekrutierung werden beim wöchentlichen multidisziplinären Treffen nach der Diagnose des primären Brustkrebses und der Entscheidung, als erste Behandlung mit einer Operation fortzufahren, identifiziert. Die eigentliche Aufklärung der Studie erfolgt im Rahmen des ersten Behandlungsplanungsgesprächs mit dem behandelnden Brustchirurgen. Die Patientin erhält schriftliche Informationen über die Studie sowie eine Kontaktnummer einer Forschungskrankenschwester/Brustpflegespezialistin, die sie anrufen kann, wenn sie in die Studie aufgenommen werden möchte. Mit der Co-Ermittlerin Miss Karina Cox wird ein zweiter Termin in der Klinik vereinbart, um die Studie erneut zu besprechen und eine schriftliche Zustimmung einzuholen. Der beratende Chirurg ist mit dem Einwilligungsprozess vertraut und wird feststellen, ob der Patient in der Lage ist, der Studie zuzustimmen. Wir werden alle Patienten mit einer Stoffwechselstörung, signifikanten Komorbiditäten und lokal fortgeschrittener oder metastasierter Erkrankung sowie Patienten mit einer Vorgeschichte einer Krebsbehandlung ausschließen, da die Ergebnisse der Studie durch ihre zugrunde liegende Erkrankung, vorherige Behandlung oder aktuelle Medikation beeinflusst werden können .

Vertraulichkeit Die Studie wird gemäß den „Caldicott-Prinzipien“ durchgeführt. Patienten, die an der Studie teilnehmen, erhalten eine eindeutige Identifikationsnummer, die für Proben verwendet wird, die für Experimente an die University of Kent geschickt werden. Der klinische Mitprüfer führt eine sichere Datenbank mit patientenidentifizierbaren Informationen, einschließlich demografischer und klinisch-pathologischer Tumordaten.

Interessenkonflikt Es gibt keine Interessenkonflikte mit dieser Studie. Alle Veröffentlichungen im Zusammenhang mit dieser Forschung werden zusammengefasst und an die teilnehmenden Patienten verteilt.

Gewebeproben werden nicht unbegrenzt aufbewahrt. Das gesamte Gewebe der frisch eingefrorenen Proben wird für die Experimente verwendet. Die Paraffin-Objektträger werden nach der Analyse von der University of Kent an die pathologische Abteilung von Maidstone und Tunbridge Wells zurückgeschickt.

Studientyp

Beobachtungs

Einschreibung (Voraussichtlich)

120

Kontakte und Standorte

Dieser Abschnitt enthält die Kontaktdaten derjenigen, die die Studie durchführen, und Informationen darüber, wo diese Studie durchgeführt wird.

Studienorte

    • Kent
      • Maidstone, Kent, Vereinigtes Königreich, ME16 9QQ
        • Rekrutierung
        • Maidstone and Tunbridge Wells NHS Trust
        • Kontakt:

Teilnahmekriterien

Forscher suchen nach Personen, die einer bestimmten Beschreibung entsprechen, die als Auswahlkriterien bezeichnet werden. Einige Beispiele für diese Kriterien sind der allgemeine Gesundheitszustand einer Person oder frühere Behandlungen.

Zulassungskriterien

Studienberechtigtes Alter

18 Jahre bis 85 Jahre (ERWACHSENE, OLDER_ADULT)

Akzeptiert gesunde Freiwillige

Ja

Studienberechtigte Geschlechter

Weiblich

Probenahmeverfahren

Nicht-Wahrscheinlichkeitsprobe

Studienpopulation

Das Gewebe wird von Patientinnen gewonnen, bei denen ein früher invasiver Brustkrebs diagnostiziert wurde und die sich einer primären Operation unterziehen. Wir werden 100 Frauen aufnehmen, bei denen neu T2 (> 2 cm) tastbarer invasiver Brustkrebs diagnostiziert wurde, die sich einer primären chirurgischen Behandlung im Maidstone Hospital unterziehen.

Beschreibung

Einschlusskriterien:

  • Klinische Diagnose von Brustkrebs im Frühstadium
  • Tastbarer Tumor größer als 2 cm
  • Geplant für primäre chirurgische Behandlung

Ausschlusskriterien:

  • Lokal fortgeschrittener Brustkrebs
  • Metastasierender Brustkrebs
  • Signifikante Komorbiditäten (ASA 4 oder höher)
  • Vorgeschichte von Brustkrebs

Studienplan

Dieser Abschnitt enthält Einzelheiten zum Studienplan, einschließlich des Studiendesigns und der Messung der Studieninhalte.

Wie ist die Studie aufgebaut?

Designdetails

Kohorten und Interventionen

Gruppe / Kohorte
Intervention / Behandlung
Fälle

Wir werden 100 Frauen aufnehmen, bei denen neu T2 (> 2 cm) tastbarer invasiver Brustkrebs diagnostiziert wurde, die sich einer primären chirurgischen Behandlung im Maidstone Hospital unterziehen. Wir werden alle Patienten mit einer Stoffwechselstörung, signifikanten Komorbiditäten und lokal fortgeschrittener oder metastasierter Erkrankung sowie solche mit einer Vorgeschichte einer Krebsbehandlung ausschließen. Wir werden Daten zu Tumorgröße, Grad und Phänotyp sowie ER, Progesteronrezeptor (PR) und Her-2-Expressionsstatus und demografische Informationen der Patienten sammeln.

Wir werden die Assoziation von Myosin VI mit Östrogenrezeptoren untersuchen.

  1. Genexpressionsanalyse – RNA wird aus 100 mg Gewebe extrahiert und dann einer RT-qPCR unterzogen, um die relativen Expressionsniveaus mehrerer Gene zu bestimmen, einschließlich MVI- und ER-Targets. Wir werden den gleichen Ansatz verwenden, um zu bestimmen, welche Isoformen von MVI im Gewebe exprimiert werden.
  2. Analyse des Proteingehalts – Das Gesamtprotein wird aus 100 mg Gewebe extrahiert und eine Western-Blot-Analyse wird verwendet, um die relativen Mengen an MVI zu bestimmen. Darüber hinaus werden wir die Zellfraktionierung verwenden, um die relativen Mengen an nukleärem gegenüber zytoplasmatischem Protein zu bestimmen.
  3. Genomische Analyse – Chromatin-Immunopräzipitation (ChIP)-Experimente werden an 100 mg Gewebeprobe durchgeführt. Hier werden wir die Lokalisierung von MVI auf dem Genom in den verschiedenen Geweben bestimmen.
Kontrollen
Eine Kohorte von Kontrollbrustgewebe wird von 20 Patientinnen erhalten, die sich gutartigen chirurgischen Brusteingriffen unterziehen. Bei den Kontrollpatientinnen mit Mammareduktionsplastiken wird das entnommene Gewebe einer Kernbiopsie unterzogen, aber Patienten mit anderen gutartigen Operationen wird eine zusätzliche Kernbiopsie aus dem Brustgewebe entnommen, das die zu entfernende Läsion umgibt.
  1. Genexpressionsanalyse – RNA wird aus 100 mg Gewebe extrahiert und dann einer RT-qPCR unterzogen, um die relativen Expressionsniveaus mehrerer Gene zu bestimmen, einschließlich MVI- und ER-Targets. Wir werden den gleichen Ansatz verwenden, um zu bestimmen, welche Isoformen von MVI im Gewebe exprimiert werden.
  2. Analyse des Proteingehalts – Das Gesamtprotein wird aus 100 mg Gewebe extrahiert und eine Western-Blot-Analyse wird verwendet, um die relativen Mengen an MVI zu bestimmen. Darüber hinaus werden wir die Zellfraktionierung verwenden, um die relativen Mengen an nukleärem gegenüber zytoplasmatischem Protein zu bestimmen.
  3. Genomische Analyse – Chromatin-Immunopräzipitation (ChIP)-Experimente werden an 100 mg Gewebeprobe durchgeführt. Hier werden wir die Lokalisierung von MVI auf dem Genom in den verschiedenen Geweben bestimmen.

Was misst die Studie?

Primäre Ergebnismessungen

Ergebnis Maßnahme
Maßnahmenbeschreibung
Zeitfenster
Genexpression von Myosin VI und Östrogenrezeptorzielen in Tumorgewebe.
Zeitfenster: 24 Stunden
RT-qPCR-Experimente zur Bestimmung der relativen Expression von Myosin VI und Östrogenrezeptorzielen in tumorabgeleiteter RNA und zum Vergleich mit Kontrollbrustgewebe.
24 Stunden
Quantifizierung von Myosin VI Protein in Tumorgewebe.
Zeitfenster: 24 Stunden.
Western-Blot-Analyse und Zellfraktionierung zur Bestimmung der relativen Mengen an Myosin VI im Vergleich zum Gesamtprotein, das aus 100 mg Tumorgewebe in nuklearen und zytoplasmatischen Kompartimenten extrahiert wurde, und Vergleich mit Kontrollgewebe.
24 Stunden.
Lokalisierung von Myosin VI auf dem Tumorgenom
Zeitfenster: 24 Stunden.
Chromatin-Immunpräzipitationsexperimente zur Bestimmung der Position von Myosin VI im Tumorgenom und Vergleich mit Kontrollgewebe.
24 Stunden.

Sekundäre Ergebnismessungen

Ergebnis Maßnahme
Maßnahmenbeschreibung
Zeitfenster
Vergleich der nuklearen Myosin VI- und Östrogenrezeptor-Lokalisierung zwischen verschiedenen Brustkrebs-Prognosegruppen.
Zeitfenster: 3 Monate
Immunhistochemie-Experimente an paraffinkonserviertem Tumorgewebe, um das Vorhandensein von nukleären Myosin VI- und Östrogenrezeptoren zu bestimmen und unter Verwendung eines Bewertungssystems zwischen Brustkrebs-Prognosegruppen und Kontrollgewebe zu vergleichen.
3 Monate

Mitarbeiter und Ermittler

Hier finden Sie Personen und Organisationen, die an dieser Studie beteiligt sind.

Mitarbeiter

Ermittler

  • Studienleiter: Hazel Everest, Maidstone and Tunbridge Wells NHS Trust

Publikationen und hilfreiche Links

Die Bereitstellung dieser Publikationen erfolgt freiwillig durch die für die Eingabe von Informationen über die Studie verantwortliche Person. Diese können sich auf alles beziehen, was mit dem Studium zu tun hat.

Allgemeine Veröffentlichungen

Studienaufzeichnungsdaten

Diese Daten verfolgen den Fortschritt der Übermittlung von Studienaufzeichnungen und zusammenfassenden Ergebnissen an ClinicalTrials.gov. Studienaufzeichnungen und gemeldete Ergebnisse werden von der National Library of Medicine (NLM) überprüft, um sicherzustellen, dass sie bestimmten Qualitätskontrollstandards entsprechen, bevor sie auf der öffentlichen Website veröffentlicht werden.

Haupttermine studieren

Studienbeginn (TATSÄCHLICH)

5. Mai 2019

Primärer Abschluss (ERWARTET)

1. Dezember 2020

Studienabschluss (ERWARTET)

1. Dezember 2020

Studienanmeldedaten

Zuerst eingereicht

11. Januar 2018

Zuerst eingereicht, das die QC-Kriterien erfüllt hat

9. Februar 2018

Zuerst gepostet (TATSÄCHLICH)

12. Februar 2018

Studienaufzeichnungsaktualisierungen

Letztes Update gepostet (TATSÄCHLICH)

13. November 2019

Letztes eingereichtes Update, das die QC-Kriterien erfüllt

11. November 2019

Zuletzt verifiziert

1. November 2019

Mehr Informationen

Begriffe im Zusammenhang mit dieser Studie

Plan für individuelle Teilnehmerdaten (IPD)

Planen Sie, individuelle Teilnehmerdaten (IPD) zu teilen?

NEIN

Arzneimittel- und Geräteinformationen, Studienunterlagen

Studiert ein von der US-amerikanischen FDA reguliertes Arzneimittelprodukt

Nein

Studiert ein von der US-amerikanischen FDA reguliertes Geräteprodukt

Nein

Diese Informationen wurden ohne Änderungen direkt von der Website clinicaltrials.gov abgerufen. Wenn Sie Ihre Studiendaten ändern, entfernen oder aktualisieren möchten, wenden Sie sich bitte an register@clinicaltrials.gov. Sobald eine Änderung auf clinicaltrials.gov implementiert wird, wird diese automatisch auch auf unserer Website aktualisiert .

Klinische Studien zur Brustkrebs

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