A standardizált aronia melanocarpa kivonat egy hónapos fogyasztásának hatása a hemodializált betegek vérszegénységére
A standardizált aronia melanocarpa kivonat egy hónapos fogyasztásának hatása hemodialízises betegek vérszegénységére: Fókuszban az oxidatív stressz és a gyulladás
A tanulmány áttekintése
Állapot
Körülmények
Beavatkozás / kezelés
Részletes leírás
- Betegek A vizsgálatban 30 krónikus veseelégtelenségben szenvedő beteg vett részt, akik a Kragujevaci Klinikai Központ Nephrológiai és Dialízisközpontjában dialíziskezelésben részesültek. A felvételi kritériumok a következők voltak: rendszeres dialízis kezelés több mint 3 hónapig, heti 3 alkalommal és 110 g/l-nél alacsonyabb hemoglobin-értékek. A kizárási kritériumok a következők voltak: 80 g/l-nél alacsonyabb hemoglobin-értékek, antioxidáns és immunszuppresszív terápia alkalmazása, ellenőrizetlen rosszindulatú daganatok, bizonyított aktív vérzés és szisztémás gyulladás vagy aktív fertőzés jelenléte.
- Etikai jóváhagyás A kutatást az Orvosi Kutatási Helsinki Nyilatkozat, a Kragujevaci Klinikai Központ Etikai Bizottságának jóváhagyása, 01-14-3039 sz. Valamennyi alany írásos beleegyezését adta a tanulmányi jelentkezés előtt.
- Használt növényi kivonat A Standardizált Aronia kivonat (SAE) a Pharmanova gyógyszergyár hivatalos terméke (Belgrád, Szerbia); ennek ellenére az extrakciós eljárást az EU-Chem cég (Belgrád, Szerbia) végezte. Ez a termék 400mg/30ml polifenolt tartalmaz, míg az ajánlott napi adag 30ml.
- Vérvétel A vizsgálatba bevont betegek standardizált Aronia melanocarpa kivonatot (30 ml/nap) fogyasztottak 30 napon keresztül. A 0. napon, a SAE fogyasztása előtt minden betegtől vérmintát vettünk hematológiai analízishez, gyulladási paraméterekhez, oxidatív stressz paraméterekhez és antioxidáns védelemhez a dialízis előtt. Az összes említett paramétert a termék elfogyasztása után újra meghatároztuk, pl. a vizsgálat 30. napján.
- Analitikai eljárások Vénás vérmintákat (2 x 4,5 ml) vettünk a kiegészítés megkezdése előtt (nulladik nap) és a kiegészítés végén (30. nap). A vérvételhez nátrium-citrátos vákuumcsöveket használtunk. Az első mintát rutin hematológiai vizsgálatokhoz, a második mintát plazma és eritrocita lizátum extrakcióhoz használtuk a redox és gyulladásos állapot meghatározására.
A szisztémás redox állapot kiértékelése A plazmamintákat a következő prooxidánsok szintjének meghatározására használtuk: szuperoxid-anion gyök (O2-), hidrogén-peroxid (H2O2), nitritek (NO2-) és lipidperoxidációs index tiobarbitursav reaktívként mérve. anyagok (TBARS), míg az antioxidáns védekező rendszer paramétereit, így a szuperoxid-diszmutáz (SOD) és a kataláz (CAT) aktivitását, valamint a redukált glutation (GSH) szintjét határoztuk meg vörösvértest-lizátum mintákban.
A) Lipidperoxidációs index (TBARS) meghatározása A plazmaminták lipidperoxidációjának mértékét TBARS méréssel becsültük meg 1%-os tiobarbitursav 0,05 NaOH-ban történő felhasználásával, amelyet a mintával 100°C-on 15 percig inkubáltunk és 530 nm. A TBA-kivonatot 0,8 ml minta és 0,4 ml triklór-ecetsav (TCA) összekeverésével kaptuk; ezt követően a mintákat 10 percre jégre helyeztük, és 15 percig 6000 fordulat/perc sebességgel centrifugáltuk. (1).
b) Nitrit meghatározás (NO2-)
A nitrogén-monoxid (NO) gyorsan lebomlik, és stabil nitrit/nitrát termékeket képez. A NO2-szintet Griess-reagenssel mértük és használtuk a NO-termelés indexeként. NO2 - plazmában történő meghatározáshoz 0,1 ml 3 N PCA (perklorid sav), 0,4 ml 20 mM etilén-diamin-tetraecetsav (EDTA) és 0,2 ml plazma 15 percre jégre került, majd 15 percig 6000 fordulat/perc sebességgel centrifugáltuk. A felülúszó leöntése után 220 μl K2CO3-at adtunk hozzá. A nitriteket 550 nm-en mértük. (2)
Szuperoxid anion gyök meghatározása (O2-)
A szuperoxid anion gyök koncentrációját a plazmamintákban NTB (Nitro Blue Tetrazolium) reagenssel mértük TRIS pufferben (vizsgálati keverék). A mérést 530 nm hullámhosszon végeztük. (3).
Hidrogén-peroxid meghatározása (H2O2)
A H2O2 mérése a fenolvörös H2O2 általi oxidációján alapult egy torma-peroxidáz által katalizált reakcióban. 200 mikroliter perfuzátumot vagy plazmát csaptunk ki 800 ml frissen készített fenolvörös oldattal; Ezt követően 10 μl (1:20) torma-peroxidázt (közvetlenül felhasználás előtt készítve) adtunk hozzá. A H2O2 szintjét 610 nm-en mértük (4).
A redukált glutation (GSH) meghatározása
A redukált glutation (GSH) szintjét a GSH 5,5-ditiobisz-6,2-nitrobenzoesavval történő oxidációja alapján határoztuk meg. A GSH-kivonatot 0,1 ml 0,1%-os EDTA-val, 400 μl hemolizátummal és 750 μl csapadékoldattal (amely 1,67 g metafoszforsavat, 0,2 g EDTA-t, 30 g NaCl-t tartalmazott, és desztillált vízzel 100 ml-es térfogatra töltve) kaptunk. 3 hét +4C°-on). A GSH szintjét 420 nm-en mértük (5).
- Antioxidáns enzimek meghatározása (SOD, CAT)
Az izolált vörösvértesteket háromszor mostuk három térfogat jéghideg 0,9 mmol/l-es NaCl-tal, és a CAT aktivitás meghatározásához kb. 50 g Hb/l tartalmú hemolizátumot használtunk. CAT puffert, előkészített hemolizátum mintát és 10 mM H2O2-t használtunk a CAT meghatározásához. A detektálást 360 nm-en végeztük. Az SOD aktivitást epinefrin módszerrel határoztuk meg. A hemolizátumot karbonát pufferrel keverjük össze, majd adrenalint adunk hozzá. A detektálást 470 nm-en (6-10) végeztük.
A gyulladásos státusz értékelése A betegek gyulladásos státuszának értékelése érdekében mindkét érdekes ponton (0. és 30. napon) a következő paramétereket mértük: szérum C-reaktív fehérje koncentráció - CRP és tumor nekrózis faktor koncentráció - TNF-α.
A szérum C-reaktív protein (CRP) koncentrációját turbidimetriás módszerrel határoztuk meg az Olympus AU680 készüléken. A normál szérum CRP-koncentráció ≤ 5 mg/l. A mikrogyulladás definíciója szerint a CRP 5 mg/l koncentrációja a szérumban.
A plazma TNF-α koncentrációját enzimhez kötött immunadszorbens vizsgálattal (ELISA) határoztuk meg a kereskedelemben kapható nagy érzékenységű indirekt szendvics enzimhez kötött immunoadszorbens vizsgálattal (Sigma Aldrich).
A hematológiai paraméterek értékelése
Mindkét érdekes ponton a következő hematológiai paraméterek értékeit elemezték minden betegnél:
Vörösvérsejtek (Er), hemoglobin (Hb), hematokrit (Hct), eritrocita index - átlagos testtérfogat (MCV), átlagos corpuscularis hemoglobin (MCH), átlagos corpuscularis hemoglobin koncentráció (MCHC), szérum laktát dehidrogenáz koncentráció (LDH), szérum haptoglobin koncentráció és vas állapot: szérum vaskoncentráció, ferritin; teljes vaskötő kapacitás (TIBC), telítetlen vasmegkötő kapacitás (UIBC), transzferrin telítettség (TSAT), haptoglobin.
- Statisztikai elemzés Az IBM SPSS Statistics 20.0 Desktop for Windows szoftvert használtuk a statisztikai elemzéshez. Az adatok eloszlásának ellenőrzésére Shapiro-Wilk tesztet használtunk. A statisztikai összehasonlításokat az egytényezős varianciaanalízis (ANOVA) teszttel, Tukey post hoc teszttel végeztük el többszörös összehasonlításhoz, az adatok normál eloszlása esetén a csoportok között, míg Kruskal-Wallis módszert alkalmaztuk a csoportok közötti összehasonlításhoz, ahol az adatok eltértek a szokásostól. A p < 0,05 értékeket tekintettük statisztikailag szignifikánsnak.
Tanulmány típusa
Beiratkozás (Tényleges)
Fázis
- Nem alkalmazható
Kapcsolatok és helyek
Tanulmányi helyek
-
-
-
Kragujevac, Szerbia, 34000
- Faculty of Medical Science
-
-
Részvételi kritériumok
Jogosultsági kritériumok
Tanulmányozható életkorok
Egészséges önkénteseket fogad
Tanulmányozható nemek
Leírás
Bevételi kritériumok:
- rendszeres dialízis kezelés több mint 3 hónapig, heti 3 alkalommal
- 110 g/l alatti hemoglobinszint
Kizárási kritériumok:
- 80 g/l alatti hemoglobinszint,
- antioxidáns és immunszuppresszív terápia alkalmazása,
- ellenőrizetlen rosszindulatú daganatok,
- bizonyítottan aktív vérzés
- szisztémás gyulladás vagy aktív fertőzés jelenléte
Tanulási terv
Hogyan készül a tanulmány?
Tervezési részletek
- Elsődleges cél: Támogató gondoskodás
- Kiosztás: N/A
- Beavatkozó modell: Egyetlen csoportos hozzárendelés
- Maszkolás: Nincs (Open Label)
Fegyverek és beavatkozások
Résztvevő csoport / kar |
Beavatkozás / kezelés |
|---|---|
|
Kísérleti: Kísérleti csoport
Hemodializált betegek, akik egy hónapig standardizált Aronia Melanocrpa kivonatot fogyasztottak
|
30 napon keresztül minden beteg minden nap 30 ml Alixir 400 Protect-et vesz be
|
Mit mér a tanulmány?
Elsődleges eredményintézkedések
Eredménymérő |
Intézkedés leírása |
Időkeret |
|---|---|---|
|
Vérszegénység kontroll
Időkeret: Két hónap
|
A vasszintek Egység µmol/l
|
Két hónap
|
|
Vérszegénység kontroll
Időkeret: Két hónap
|
A hemoglobin szintek Egység g/l
|
Két hónap
|
|
Vérszegénység kontroll
Időkeret: Két hónap
|
A ferritin szintek Egység ng/ml
|
Két hónap
|
|
Vérszegénység kontroll
Időkeret: Két hónap
|
A transzferrin szintek Egység g/l
|
Két hónap
|
Másodlagos eredményintézkedések
Eredménymérő |
Intézkedés leírása |
Időkeret |
|---|---|---|
|
Oxidatív stressz
Időkeret: Két hónap
|
Szuperoxid anion gyök, Hidrogén-peroxid, Nitritek Egység nmol/ml
|
Két hónap
|
|
Oxidatív stressz
Időkeret: Két hónap
|
Szuperoxid-diszmutáz, kataláz egység U/g Hb x 1000
|
Két hónap
|
|
Oxidatív stressz
Időkeret: Két hónap
|
Csökkentett glutation egység nmol/l vörösvértest x 1000
|
Két hónap
|
Egyéb eredményintézkedések
Eredménymérő |
Intézkedés leírása |
Időkeret |
|---|---|---|
|
Gyulladás
Időkeret: Két hónap
|
A gyulladás paraméterei CRP Egység mg/l
|
Két hónap
|
|
Gyulladás
Időkeret: Két hónap
|
A gyulladás paraméterei TNF alfa Egység pg/ml
|
Két hónap
|
|
Gyulladás
Időkeret: Két hónap
|
A gyulladásos fehérvérsejtek paraméterei Egység x 1000000000 sejt/l
|
Két hónap
|
Együttműködők és nyomozók
Szponzor
Együttműködők
Nyomozók
- Kutatásvezető: Isidora Milosavljevic, Department of pharmacy, University of Kragujevac
Publikációk és hasznos linkek
Tanulmányi rekorddátumok
Tanulmány főbb dátumok
Tanulmány kezdete (Tényleges)
Elsődleges befejezés (Tényleges)
A tanulmány befejezése (Tényleges)
Tanulmányi regisztráció dátumai
Először benyújtva
Először nyújtották be, amely megfelel a minőségbiztosítási kritériumoknak
Első közzététel (Tényleges)
Tanulmányi rekordok frissítései
Utolsó frissítés közzétéve (Tényleges)
Az utolsó frissítés elküldve, amely megfelel a minőségbiztosítási kritériumoknak
Utolsó ellenőrzés
Több információ
A tanulmányhoz kapcsolódó kifejezések
Kulcsszavak
További vonatkozó MeSH feltételek
Egyéb vizsgálati azonosító számok
- Alixir400protect
Terv az egyéni résztvevői adatokhoz (IPD)
Tervezi megosztani az egyéni résztvevői adatokat (IPD)?
Gyógyszer- és eszközinformációk, tanulmányi dokumentumok
Egy amerikai FDA által szabályozott gyógyszerkészítményt tanulmányoz
Egy amerikai FDA által szabályozott eszközterméket tanulmányoz
Ezt az információt közvetlenül a clinicaltrials.gov webhelyről szereztük be, változtatás nélkül. Ha bármilyen kérése van vizsgálati adatainak módosítására, eltávolítására vagy frissítésére, kérjük, írjon a következő címre: register@clinicaltrials.gov. Amint a változás bevezetésre kerül a clinicaltrials.gov oldalon, ez a webhelyünkön is automatikusan frissül. .