Keringő daganatsejt-csökkentő, érintés nélküli nefrektómia (CITO-CERENE)

Ez a tanulmány a CTC-profilt vizsgálja az RCC-ben, és ezek felszabadulását a vérkeringésbe az LRN során.

Az érintett betegeket az Észak-Lisszaboni Egyetemi Kórházi Központ (CHLUN) urológiai osztályának veserák osztályára irányítják, ahol diagnosztizálják az LRN-re alkalmas vesetömeget. A betegek diagnózisát megerősítik, megfelelően felállítják, és kezelési lehetőségeikről közös és megalapozott döntési folyamatot követően döntenek az Európai Urológiai Szövetség (EAU) jelenlegi RCC-re vonatkozó iránymutatásai alapján. A 18 év alatti betegek és a terhes nők kizárásra kerülnek. A betegeket megfelelően tájékoztatják a vizsgálati protokollról, és aláírnak egy konkrét, tájékozott beleegyező nyilatkozatot.

Az LRN-n átesett betegek egy kétkarú, prospektív, egyközpontú, randomizált, kontrollos vizsgálatban vesznek részt, amelyben az érintés nélküli technikát hasonlítják össze, közvetlen pedicle lekötéssel (A csoport) a hagyományos disszekcióval, valamint a vesepedikulum lekötésével vesehúzással (B csoport) ). A műtőbe érkezéskor perifériás vérmintát vesznek. Ezt követően az A csoportba tartozó betegek érintés nélküli RN-n esnek át, és a disszekciót a Gerota fascia síkján keresztül végzik, amíg a megfelelő nagy ér (a jobb oldalon a vena cava, a bal oldalon az aorta) láthatóvá válik. A vesefejet közvetlenül izoláljuk, és Weck® klipekkel ligáljuk, vese manipuláció nélkül. A B csoportba tartozó betegek egy hagyományosabb megközelítésen mennek keresztül, kezdve a Gerota fascia megnyitásával, az ureter azonosításával, az ureter alatti perirenális zsír meghúzásával, miközben a fejfejet a vesepedikulum eléréséig boncolják. Ezután a vesefejet izolálják, miközben fenntartják a vese tapadását és a vese körüli zsírt, és Weck® klipekkel lekötik. A mintavételkor egy második perifériás vérmintát vesznek. Egy harmadik és negyedik perifériás vérmintát vesznek a műtét utáni 1. és 30. napon, hogy tanulmányozzák a CTC műtét utáni kinetikáját. Minden minta 7,5 ml perifériás vért gyűjt.

Kontrollként olyan betegeket használnak, akiknél a vese alulműködése teljes nephrectomia javallata. Az összes nefrektómiás beteg a randomizációs protokollon megy keresztül, egy kontroll karban.

A CTC-ket a perifériás vérmintákból egy mikrofluidikai méret alapú CTC-befogó eszköz – Ruby™ – segítségével izoláljuk. A teljes vérmintákat 80 µl/perc áramlási sebességgel fecskendezik a készülékekbe. Az eszközökön rögzített CTC-ket ezután 4',6-diamidino-2-fenil-indol (DAPI) elleni antitestekkel festik meg a sejtmagok azonosítására, a differenciálódási antigén 45 (CD45) csoportjával a leukociták azonosítására, citokeratinnal 8/18 a hám azonosítására. CTC-k és vimentin a mezenchimális CTC-k vagy CTC-k azonosítására, amelyek epiteliális-mezenchimális átalakuláson mentek keresztül. A vérmintákat a levétel után legfeljebb 30 perccel dolgozzák fel.